医院输血免役检验标准操作规程汇编(编辑修改稿)

医院输血免役检验标准操作规程汇编(编辑修改稿)内容摘要：

作规程 编制 /时间 XXX/ 审核 /时间 XXX/ 审批 /时间 XXX/ 1．目的 规范检测“ HBeAb” 过程。 2．原理 HBeAb 的检测采用竞争抑制 ELISA 法，即用抗 HBeAg 抗体包被聚苯乙烯微孔，样本中的 HBeAb 与之竞争结合游离的 HBeAg，再与酶标记的抗 HBeAb 抗体结合，经显色剂作用后呈现颜色反应。 3．样本 血清或血浆 样品类型为受见检者血清或血浆。 用真空采样管采集受检者血液标本 4～ 5ml。 保证样品管的密闭状态，离心分离血清 /浆备用。 储存样品，保持样品管完全密闭，在室温 (15到 30176。 C)条件下不超过 8小时。 如果 8小时内不能完成检测即应将标本放入 2到 8176。 C冰箱 冷藏。 4．设备试剂 检测仪器： Biocell Int 酶标仪， DEMIII 自动酶标洗板机。 试剂： 科华公司 HBsAg 诊断试剂盒 (ELISA)。 浓缩洗涤液按 1/20 比例以蒸馏水稀释备用。 5．标准和质控 室内质控 符合《 输血科 室内质控程序》的要求。 质控品 卫生部临床检验中心提供 , 浓度 1ng/ml。 CUTOFF 值计算公式 MAX[,MW(NEG)]。 校验公式 POS。 判断标准 阳性： S/CO＜。 阴性： S/CO＞。 测定波长 450nm。 参考波长 630nm。 6．操作步骤： 样本编号→样本分离、检测仪器准备、试剂准备→样本测定、录入资料→分析质控 /结果→打印检验结果→签发报告单。 65 样本编号 按顺序将申请单和样本一一对应编号。 认真检查检验目的、病人姓名、性别、科室、床号，血液量 3ml。 样本分离 将已编号的样本配平离心， 3000r/min 5min。 仪器和试剂准备 根据样本多少准备试剂，增加 3 孔，分别设置空白对照、阴性对照和临界质控；检测 仪器按《酶标 仪作业指导书 》和《 自动酶标洗板机作业指导书 》操作。 样本检测 用微量加样器取 50ul 相应样品及质控品、阴阳性对照品加入对应各孔，空白对照不加。 每孔再加酶标结合物 50ul（或 1 滴）（空白对照除外），轻微振荡 5 分钟后，置 37℃水浴箱中孵育 30 分钟。 用洗板机洗涤 6 次，拍干。 每孔加显色剂 A、 B 各 50ul（或 1 滴），混匀，密封， 37℃避光显色 15分钟。 显色时间从开始加第一滴显色液 B 开始计时。 每反应孔加终止液 50ul（或 1 滴），混匀。 终止后在 10 分钟内完成判读，用酶标仪在 450nm 波长处测定。 先观察室内质控是否在控，判断结果的可信性，将数据处理、计算、并储存，导入数据库。 单项阳性样本必须复查；“灰区”结果必须复查；罕见模式必须复查。 核对结果，打印、签发报告。 检验完毕后，清理其桌面，血清样本放入专用样本贮存冰箱内，质控血清盘放入冰箱；填写操作记录使用记录本。 保养仪器，关机。 7． 控制品使用水平和频率 质控水平：卫生部临界值血清 , 每板一次。 8．参考范围 阴性，阴性： S/CO1. 9．临床意义 HBeAb 是 HbeAg 的相应抗体，通常晚于其它标志物出现，一般认为 HbeAg消失和 HbeAb 出现是病情趋向好转的征象，但不能完全保证 HBV DNA 停止复制或无传染性；也多见于 HBV 健康携带者。 10．引用文件 输血科 室内质控程序。 66 输血科 预防措施程序。 HBeAb 试剂盒说明书。 标本采集、接收、保存操作程序。 BIOCELL 酶标仪标准操作程序。 洗板机标准操作程序。 67 项目名称 XX大学 XX医院输血科 文件编号 ZNYXXXX/MYXM305 版次 /修改 第 2版 /第 0次修改 ELISA 乙肝核心抗体 (HBcAb)操作规程 编制 /时间 XXX/ 审核 /时间 XXX/ 审批 /时间 XXX/ 1．目的 规范检测“ HBcAb” 过程。 2．原理 ： HBcAb 的检测采用竞争抑制 ELISA 法，即用 HBcAg 包被聚苯乙烯微孔，样本中的 HBcAb 和酶标记的抗 HBcAg 抗体竞争与之结合，经显色剂作用后呈现颜色反应。 3．范围 所有被受理的“ HBcAb” 检测申请单及相关合格样本。 3．样本 血清或血浆 样品类型为受见检者血清 或血浆。 用真空采样管采集受检者血液标本 4～ 5ml。 保证样品管的密闭状态，离心分离血清 /浆备用。 储存样品，保持样品管完全密闭，在室温 (15到 30176。 C)条件下不超过 8小时。 如果 8小时内不能完成检测即应将标本放入 2到 8176。 C冰箱冷藏。 4．设备试剂 检测仪器： Biocell Int 酶标仪， DEMIII 自动酶标洗板机。 试剂： 科华公司 HBsAg 诊断试剂盒 (ELISA)。 浓缩洗涤液按 1/20 比例以蒸馏水稀释备用。 5．标准和质控 室内质控 符合《 输血科 室内质控程序》的要求。 质控品 卫生部临床检验中心提供 , 浓度 1ng/ml。 CUTOFF 值计算公式 MAX[,MW(NEG)]。 校验公式 POS。 判断标准 阳性： S/CO＜。 阴性： S/CO＞。 测定波长 450nm。 参考波长 630nm。 6．操作步骤： 样本编号→样本分离、检测仪器准备、试剂准备→样本测定、录入资料→分析质控 /结果→打印检验结果→签发报告单。 68 样本编号 按顺序将 申请单和样本一一对应编号。 认真检查检验目的、病人姓名、性别、科室、床号，血液量 3ml。 样本分离 将已编号的样本配平离心， 3000r/min 5min。 仪器和试剂准备 根据样本多少准备试剂，增加 3 孔，分别设置空白对照、阴性对照和临界质控；检测仪器按《酶标 仪作业指导书 》和《 自动酶标洗板机作业指导书 》操作。 样本检测 受检者血清样本先做 1： 50 稀释，即 10ul 样本＋ 500ul 生理盐水。 用微量加样器取 50ul 稀释样品及质控品、阴阳性对照品加入对应各孔，空白对照不加。 每孔再加酶标结合物 50ul（或 1 滴）（空白对照除外），轻微振荡 5 分钟后，置 37℃水浴箱中孵育 30 分钟。 用洗板机洗涤 6 次，拍干。 每孔加显色剂 A、 B 各 50ul（或 1 滴），混匀，密封， 37℃避光显色 15分钟。 显色时间从开始加第一滴显色液 B 开始计时。 每反应孔加终止液 50ul（或 1 滴），混匀。 终止后在 10 分钟内完成判读，用酶标仪在 450nm 波长处测定。 先观察室内质控是否在控，判断结果的可信性，将数据处理、计算、并储存，导入数据库。 单项阳性样本必须复查； “灰区”结果必须复查；罕见模式必须复查。 核对结果，打印、签发报告。 检验完毕后，清理其桌面，血清样本放入专用样本贮存冰箱内，质控血清盘放入冰箱；填写操作记录使用记录本。 保养仪器，关机。 7． 控制品使用水平和频率 质控水平：卫生部临界值血清 , 每板一次。 8．参考范围 阴性，阴性： S/CO1. 9．临床意义 HBcAb 是 HBV 病毒感染的主要标志物之一，在感染“窗口期”其它指标为阴性时， HbcAb 有可能为阳性。 可持续数月、数年乃至终生。 是诊断 HBV 感染常用指标，也是 HBV 流行病学调查的 指标。 10．引用文件 输血科 室内质控程序。 69 输血科 预防措施程序。 HBcAb 试剂盒说明书。 标本采集、。