五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性变化研究_硕士博士学位论文(编辑修改稿)

五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性变化研究_硕士博士学位论文(编辑修改稿)内容摘要：

40 表 512 人参醇提物的抑菌作用（ n=3） ........................................ 41吉林农业大学硕士学位论文 五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性变化研究 1 第一章 前言 五灵脂与人参配伍研究概况 五灵脂与人参配伍的文献研究 中药十九畏是中药药性理论的重要组成部分，其是否为临床配伍禁忌，从古至今都颇有争议。 而本文研究的五灵脂与人参正是中药十九畏中临床应用较多的一对配伍，对其进行实验研究，可为临床合理配伍提供科学有效的重要依据。 参考李德全 [1]的五灵脂与人参配伍的方剂统计分析结果，得知五灵脂与人参配伍共用的古今方剂共 47首。 其中以五灵脂功效、主治为主的方剂有 34首，以人参功效、主治为主的方剂有 8首，以二者功 效并重的有 5首。 以五灵脂功效、主治为主的方剂有： 癥 回生片：五灵脂（醋炙） 14g，人参 42g。 处方来源 ： 《中国药典》（ 2020 年版）。 ：五灵脂 5 钱，人参 5 钱。 处方来源 ： 《玉案》卷五。 ：五灵脂 1 分，人参 1 分。 处方来源 ： 《医碥》卷六。 ：五灵脂 1 两，人参 1 两。 处方来源：《圣惠》卷四十六。 ：五灵脂（炒） 1 两，人参 1 两。 处方来源 ： 《圣济总录》卷十一。 ：五灵脂 1 两，人参半两。 处方来源 ： 《圣济总录》卷六十五。 ：五灵脂 5 分，人参 8 分。 处方来源 ： 《女科玉尺》卷四。 ：五灵脂杏核大，人参 1 钱。 处方来源 ： 《鸡峰》卷二十。 ：五灵脂（水飞） 2 钱半，人参 2 钱半。 处方来源 ： 《诚书》卷八。 癥 回生丹：五灵脂 2 两，人参 6 两。 处方来源 ： 《温病条辨》卷一。 ：五灵脂 1 分，人参 2 分半。 处方来源 ： 《秘传外科方》。 ：五灵脂 1 两，人参 3 两。 处方来源 ： 《疡医大全》卷二十八。 ：五灵脂（醋浸，瓦焙） 5 钱，人参 5 钱。 处方来源 ： 《宁坤秘籍》卷上。 ：五灵脂 1 钱 1 字，人参 1 钱 1 字。 处方来源 ： 《医学入门》卷七。 ：五灵脂 3 两，人参 3 两。 处方来源 ： 《普济方》卷九十三。 ：五灵脂（醋炒） 5 钱，人参（炒） 5 钱。 处方来源 ： 《奇方类编》卷下。 ：五灵脂 5 钱，人参 3 钱。 处方来源 ： 《全国中药成药处方集》（南京方）。 ：五灵脂（以醋和面裹，烧令香熟去面）杏核大，人参 1 分。 处方来源 ： 《普济方》卷三十六引《指南方》。 ：五灵脂（醋炒） 5 钱，人参（去芦） 3 钱。 处方来源 ： 《全国中药成药处方集》（天津方）。 ：五灵 脂半两，人参 1 分。 处方来源 ： 《圣惠》卷八十二。 吉林农业大学硕士学位论文 五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性 变化研究 2 ：五灵脂钱半，人参 5 分。 处方来源 ： 《简明医彀》卷七。 ：五灵脂（醋炒） 5 钱，人参（去芦） 5 两。 处方来源 ： 《北京市中药成方选集》。 ：五灵脂 1 两，人参 1 两半。 处方来源 ： 《圣济总录》卷六。 ：五灵脂 2 两，人参 2 两。 处方来源 ： 《朱氏集验方》卷十。 ：五灵脂 2 钱，人参 5 钱。 处方来源 ： 《辨证录》卷三。 ：五灵脂 5 分，人参 2 钱半。 处方来源 ： 《万氏家抄方》卷五引钱氏方。 ：五灵脂（炒 ） 8 钱，人参（去芦）半两。 处方来源 ： 《杨氏家藏方》卷一。 ：五灵脂半两，人参半两。 处方来源 ： 《圣济总录》卷一七七。 ：五灵脂 1 钱，人参 3 分。 处方来源 ： 《普济方》卷三九一。 ：五灵脂 1 两，人参 1 两。 处方来源 ： 《张氏医通》卷十三。 ：五灵脂 5 分，人参 2 钱半。 处方来源 ： 《古今医鉴》卷十三。 ：五灵脂 5 分，人参 7 分。 处方来源《医学入门》卷七。 ：五灵脂（炒） 2 钱，人参 3 钱。 处方来源 ： 《幼幼集成》卷三。 以人参功效、主 治为主的方剂有： ：人参半两，五灵脂半两。 处方来源：《普济方》卷二四三。 ：人参（去芦） 2 两，五灵脂 1 两。 处方来源：《医方类聚》卷一五三引《经验秘方》。 ：人参 9g，五灵脂 15g。 处方来源 ： 《金鉴》卷四十八。 ：人参 7 钱，五灵脂 5 钱。 处方来源 ： 《中国医学大辞典》引彭祖方。 ：人参 1 两，五灵脂 1 两半。 处方来源 ： 《医方类聚》卷八十九引《施圆端效方》。 ：人参 5 钱，五灵脂 5 钱。 处方来源 ： 《活人方》卷二。 延寿丹：人参 7 钱，五灵脂 5 钱。 处方来源 ： 《医学入门》卷一。 ：人参 7 钱，五灵脂 5 钱。 处方来源 ： 《遵生八笺》卷十八。 以二者功效并重的方剂有： ：人参 10g，五灵脂 10g。 处方来源：福建中医药 1993,24（ 5）： 13 ：人参 3 钱，五灵脂 3 钱。 处方来源：《医中一得》。 ：人参 2 两，五灵脂 2 两。 处方来源 ： 《医方类聚》卷八十九引《施圆端效方》。 ：人参（去芦）半两，五灵脂 1 分。 处方来源 ： 《幼幼新书》卷二十三引《医方妙选》。 ：人参 2 钱，五灵脂（微焙，研末，酒飞，去砂） 2 钱。 处方来源 ： 《医林纂要》卷八。 吉林农业大学硕士学位论文 五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性 变化研究 3 讨论： 人参从古至今一直作为重要药物，在各方面应用的都比较多，尤其在抗衰老方面应用较多。 但是从上边内容分析可知，在五灵脂和人参配伍应用的方剂中大多数是以五灵脂的主治功效为主的，多用于胃痛瘀血症和妇科瘀血症，二者配伍后虽然也有用于抗衰老的治疗，但数量较少，只有 23 首，这一点与人参大量在抗衰老方剂中应用这一现象很不相称，是否提示：五灵脂与人参配伍后，五灵脂使人参在抗衰老方面的作用丧失了。 人参又是否使五灵脂 的在某些方面的作用增强了。 国内在对五灵脂与人参配伍后的很多方面都进行了实验研究，多数是对人参部分活性成分变化进行研究，但从文献分析来看，五灵脂与人参配伍，多数是以五灵脂功效、主治为主，但目前对五灵脂与人参配伍后五灵脂活性成分含量变化方面尚缺乏研究来证实，因此，本论文以此作为深入研究的方向之一。 五灵脂与人参配伍化学实验研究进展 近年来，有很多学者从药理、临床方面对五灵脂与人参的配伍进行了研究，研究结果存在分歧。 有人认为五灵脂与人参配伍可以增强疗效 [23]，有人认为人参中加入五灵脂降低了药效 [45]。 张旭等人从化学方面，对五灵脂与人参的配伍实质，采用液质联用技术，对其配伍前后的人参皂苷的变化进行了比较系统的研究。 而此次实验结果表明，使用液质联用技术可以快速的鉴定五灵脂与人参的配伍溶液、药渣和沉淀中人参皂苷的含量变化。 五灵脂的加入，可以使溶液中人参皂苷的总量趋于减少，但五灵脂加入量不同对人参中各单体皂苷的影响各不相同，五灵脂的加入，使部分人参皂苷生成沉淀。 李德全 [1]也对人参与五灵脂配伍进行了实验研究，用薄层色谱法定性研究有效成分，用紫外分光光度法和高效液相法对人参和五灵脂配伍后成分进行定量分 析，实验结果表明，人参与五灵脂合用后，使人参总皂苷和人参皂苷 Rg1， Rb1， Re 的含量降低，而作者认为含量降低的程度与煎煮方式以及两种药物的用量比例有关。 国内在对五灵脂与人参配伍后的化学方面进行的实验研究，多数是针对人参部分活性成分变化进行研究，到目前为止对五灵脂与人参配伍后五灵脂活性成分含量变化方面尚缺乏研究来证实，因此，本论文以此作为深入研究的方向之一。 五灵脂与人参配伍药理实验研究进展 毒性作用 在现代药理学实验中，五灵脂与人参配伍，从小白鼠急性毒性实验证明，二者合用毒性 较小。 例如：小鼠急性毒性实验表明 [6]， 人参与五灵脂配伍，口服不具毒性，但腹腔注射毒性呈增加趋势；而大鼠的亚急性毒性实验显示，五灵脂与人参配伍并不影响大鼠的血小板数，白细胞数量和血红蛋白含量及体重。 对大白鼠肝、肾功能的检测，能说明五灵脂与人参共用至少不会增加正常动物肝、肾的损害 , 相反对肝、肾功能还可能有改善作用。 吉林农业大学硕士学位论文 五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性 变化研究 4 免疫实验 鲁耀邦 [7]等人通过对人参与五灵脂 1:1 配伍后，正常小鼠免疫功能研究的实验证明了，人参与五灵脂配伍组与人参、五灵脂单煎液组比较，对正常小鼠单核吞噬细胞系统吞噬功能、免疫 器官发育、溶血素抗体形成，均有显著增强的作用，但各组比较并无显著差异，即人参与五灵脂配伍后，未使免疫功能降低。 郭国华 [8]等的研究表明，人参、五灵脂配伍具有一定的抗免疫抑制剂降低 WBC 的作用， 对正常生理及免疫功能低下的小鼠，当人参剂量等于或小于五灵脂时，对小鼠的白细胞、红细胞及肾上腺等指数影响不显著，使骨髓有核细胞数显著降低。 但当人参剂量大于五灵脂剂量时，可使上述指标显著升高 [8]。 因此认为 在免疫效应方面，五灵脂基本上不影响人参的作用，相畏现象不明显。 毛晓健 [9]等报道了在环磷酰胺（ CPA）造成小鼠免疫 功能抑制条件下及正常条件下，人参，五灵脂不同比例配伍前后对小鼠骨髓中血中红细胞，有核细胞数，白细胞数，免疫器官重量，凝血时间等影响的研究成果，即人参能增加 CPA 作用下骨髓中有核细胞数，五灵脂及五灵脂与人参的配伍组的影响不明显。 在 CPA 及正常条件下，人参组及五灵脂与人参配伍组均能增加血中白细胞数，红细胞数及免疫器官的重量，得到结论五灵脂对上述指标影响不明显，但能延长凝血时间 (正常小鼠 )，且五灵脂与人参配伍后比用单味时效果更明显 [9]。 抗应激实验 有报道 认为 ，五灵脂可降低人参的抗耐缺氧 作用和抗疲劳作用 [8]， 还有 报道 称 人参 ，五灵脂及其配伍 组 ，均能明显提高正常小鼠耐缺氧、耐疲劳、耐寒、耐高温的能力，且上述作用在配伍组与单味药组中均无显著性差异 [10]。 因此 认为五灵脂对人参抗应激作用无明显影响。 有实验证明 五灵脂与人参配伍并用，对小鼠艾氏腹水癌细胞（ EBC）扩散有抑制作用，能延长荷瘤小鼠的存活期，且效果明显优于单味人参。 郭国华等 [11]观察了人参与五灵脂配伍对小鼠四氯化碳肝损伤影响，实验表明：人参与五灵脂配伍对四氯化碳造成的急性肝损伤小鼠有保护作用。 目前为止，国内对五灵脂与人参配 伍的药理实验方面研究多数是针对以人参功效、主治为主的 方面进行 药理研究 ，但 从文献分析来看，五灵脂与人参配伍，多数是以五灵脂功效、主治为主，所以，本论文将对此进行研究。 五灵脂与人参配伍临床研究进展 我国古代医学家对五灵脂与人参配伍能不能应用于临床早有争议，支持者有之，反对者也不少。 五灵脂与人参并用在临床自古就有，且应用较多，疗效显著。 如李时珍的父亲李言闻曾指出： “古方疗月闭，四物汤加人参、五灵脂，是畏而不畏也。 ”[12]《张氏医通》吉林农业大学硕士学位论文 五灵脂与人参配伍化学成分及体外药理活性 变化研究 5 中治疗血蛊的琥珀人参丸： “此人参与五灵脂并用，最能浚血。 血在隔膜之 上，非五灵脂无以浚之。 ”显然，五灵脂善通瘀血，与人参并用则效力更佳。 常敏毅 [13]在临床上治疗肝癌、肝硬化及腹腔肿瘤时，常在抗癌中草药中家红参 3g，五灵脂 15g，使用多年，并未见有 1 例发生毒副反应，且大多数症状均有改善。 五灵脂与人参两者并用 ， 在临床上已用于冠心病 、 胃溃疡 、 疳积 [12]、 神经性头痛 、 胃癌、慢性胆囊炎、结核性胸膜炎、再生障碍性贫血、风湿性心脏病、急性风湿病等病症 ，并且都有较好的疗效。 这些论述有力的说明了，五灵脂与人参配伍是可以应用于临床的，且具有重要的医疗价值，值得深入研究。 五灵脂研 究概况 五灵脂为脊索动物门，哺乳纲，鼯鼠科 （ Petauristidae） ，复齿鼯鼠 （ Trogopterus xanthipes MilneEdwards） 的干燥粪便，主产于山西、河北等省，及北京市郊，湖北，四川等省亦有少量饲养，全年均可在岩洞或石缝周围寻找收集 [14]。 图 11 复齿鼯鼠及五灵脂 Pig11 Trogopterus xanthipes MilneEdwards and Faeces Trogopterori 五灵脂的考证与分布 五灵脂的 基原考证 五灵脂这味药材最早记载于宋开宝 67 年，刘翰马志等编著的《开宝本草》 [15]，五灵脂，味甘，温，无毒。 主疗心腹冷气，小儿五疳，辟疫，治肠风，通利气脉，女子月闭。 出北地，此是寒号虫粪也。 ”据李时珍的《本草纲目》记载：“鹖鴠乃侯时之鸟也，五台诸山甚多，其状如小鸡，四足有肉翅，夏月毛采五色，自鸣若曰：凤凰不如我。 至冬毛落如鸡雏，忍寒而号曰：得过且过。 其屎恒集一处，气甚腥恶，粒大如豆，采之有如糊者，有粘块如糖者。 人亦以沙石杂而货之。 凡用糖心润泽者为真。 ” [16]李时珍已经在《本草纲目》中把五灵脂的原动物形 态、习性、分布，以及药材形状、气味、真伪优劣都形象的描述的吉林农业大学硕士学位论文。