缺血性心脏病(心绞痛、心肌梗死)药ppt82-医药保健(编辑修改稿)

缺血性心脏病(心绞痛、心肌梗死)药ppt82-医药保健(编辑修改稿)内容摘要：

物。 2．方法 健康犬或小型堵，雌雄兼用，体重 1215kg实验动物用戊巴比妥钠 (30mg／ kg) 静脉麻酐，手术台固定，分离气管并插管，连接电动呼吸机，调节潮气量300— 600ml，动脉氧 分压维持在如 — 100mmHg，血 ph在正常范围；左侧第四肋开胸，露心脏，剪开心包，做 心包床：分离冠状动脉左旋及主动脉根部。 放置相应直径电磁量计探头，分别测量冠脉 血流量及心出量。 左心室尖部插管，连接压力换能器，测定左室内压，再经微分恻定左室内压上升最大速率。 颈外静脉插管至冠状静脉窦，动脉插管，以血氧测定仪或血气分析仪分别测定冠状静脉血氧含量及动脉血氧含量，计算心肌耗氧量。 股动脉插管测定动脉血压，以肢体导联观测标准导心电图并计算心率。 公式算其他血流动力学指标：心搏出量、耗氧指数、心脏指数、冠脉阻力外周阻力及氧利用率等。 将上述各项指标同步录于多道生理记录仪。 3. 注意点 本实验难度较大，耍具备成套精密仪器。 、实验人员要经过严格训练，尽量减少对心肌功能的影响。 分离主动脉根部、冠状动脉及相应电磁换能器、心尖部插管等是手术成功的关键。 (七 )冠脉循环实验 1．原理 冠脉流量是评价防治心肌缺血药物的重要指标。 多年来，国内外对扩张冠状动脉的药物进行广泛、系统、深入的研究：，虽然能增加冠脉血流量的药物很多，但不一定都有防治心肌缺血的作用。 研究中，应以多种指标综合分析，了解平衡两方面的变化，特别是净效应，才能获得准确的结论。 冠脉流量测定分两种：即整体冠脉流量的测定和离体冠脉流量的测定。 为了解药物对缺血区心肌实际供血情况，可在整体实验动物中进行冠脉侧支循环、心肌区域血流量、心肌营养血流的研究，从不同角度反映药物对冠脉循环的影响及防治心肌缺血的疗效。 2．方法 (1)犬冠脉循环实验法：冠脉血流量测定，手术方法与步骤同心脏血流动力学试验。 实验动物开胸完成后，分离冠状动脉左旋支，放置适宜电磁流量探头，测量冠脉血流量．测定动脉血压。 实验结束后，取下心脏称重，以 1／ 3心重作为冠脉旋支血流供血区域，计算每 100g心肌每 lmin血流量。 冠脉侧支循环研究方法：实验用健康成年犬，手术同前，开胸手术完成后，分离上动脉根部。 放相应直径电磁流量计探头．测量心输出量。 在冠脉左前降支下 1／ 3处，分离并结扎冠状动脉，于远端插入冠脉插管。 分离颈总动脉插管，与冠脉插管相连形成旁路，灌注前降支远端。 三通的第三臂接橡皮臂，以收集反流量，测量反流压。 插前，静脉注入肝素 750u／ kg。 分离股动脉，插入动脉管，记录动脉血压。 实验开始，阻断须总动脉向冠脉左前支的灌流。 停灌后 10 min，分别记录心输出量、冠脉反流量及反流压，动脉压及心率，作为给药前对照值，然后给予实验药物。 给药后不同时间，分别纪录各值，反流量推算单位压力差下冠脉恻支血管流量 (CVC)=反流量／动脉舒张压，以此反映侧支血流阻力变化。 (2)冠状静脉窦血流量测定：通过测量冠状静脉窦血流量，反映冠脉血流量的变化，约 60％的冠脉血经冠脉窦流入右心房。 利用冠状静脉窦插管直接抽血测定血氧含量，计算出心肌耗氧量及氧摄取率。 注意事项：本法研究药物对犬或猫的冠状静脉窦流出量、心肌耗氧量的影响，简单方便，作为初筛抗心绞痛药物，能从供血与耗氧两力面来评价。 (3)Rb测定心肌营养血流量：冠脉血流除了通过毛细血管为心肌提供营养性血流外，一部分血流经动 — 静脉吻合支分流人静脉，两者构成冠脉总血流量。 为寻找治疗冠心病药物，观测心肌营养性血流量及冠脉总血流两者配合更有意义。 铷与钾为同族元素，理化性质相似，均可通过血流进入心肌胞，血流越大，撮取量越多。 Rb半衰期为 19． 5日，易于测定，对心肌有特殊的亲和力，摄取量为骨骼肌的 2， 5倍，故适用于测定心肌营养血流量。 方法：取体重 24g的健康小鼠分组，给药或对照药后隔一定时间，根据待试药物的药代动力学过程确定，从尾静脉注射 RbCl生理盐水溶液o． 1ml(4000— 10000脉冲／ min)， 5s注入，注射后 30s，立即处死动物，取心脏，用生理盐水冲洗 4次，每次 l0ml。 然后将心脏置玻璃研钵内．磨成匀浆，放特制铝箔小皿内，在普通灯下烘干，用射线自动标器计数。 以每个心脏放射性占注入总放射性的分数为指标，观察小鼠心肌摄取 Rb量的多少。 注意：①为防污染，全部操作在盘内进行．实验后一并处理。 ② Rb量及动物处死时间要准确，井将心脏的动静脉全部剪掉。 ③每只动物取心脏时所用剪刀、镊子齐用 — 套．以防不同动物间相干扰。 (4)心肌区域血流量测定：放射微粒法测定心肌区域血流量的原理是利用放射性素标记的微粒注入左心房，循环的微粒几乎全部组织固定，故微粒流人每个器官的量 (以放射性表示 )与该器官血流成正比。 区域性心肌血流量的操作方法是用羰化塑料微球悬于含 o． 01％吐愠 80的生理盐水内，使用的置旋涡混合器 I— 2min，取微球 500万，用生理盐水稀释到l0ml， 10s内注入麻醉开胸犬左房导管，再用 10ml盐水冲洗导管：注射微球的同时用恒速泵以 67ml／ min的速度从插人动脉弓的导管连续取 3份参考样品，每份 40s。 实验结束时取出心，剔除表面的脂肪、血管与心瓣膜，将左窒壁切割成每份重 1～ 2g的组织块，每块分成内膜下、中间与外膜下心肌层。 用多导Y能诺分析仪记心肌与参考血样品的放射。 汁算心肌区域性血流量。 根据阻断冠脉前后心肌组织内血流量的变化．减少 25％以上者为缺血，减少大于 75％者为严重缺血区。 用以研究药物对心肌缺血时不同部位，不问层次的心肌血流量的影响。 (5)离体心脏冠脉灌流法：哺乳动物离体心脏，插管人动脉灌流肘，灌流液须经冠状动脉经右心房流出心脏，故流出量可代表冠脉流量，在灌注压不变的条件下，其流量可反映冠脉阻力的变化。 方法：雄性大鼠，体重 200250g，腹腔注射 0． 6％戊巴比罢钠 45mg／ kg麻醉．仰位固定，分离 — 侧股静脉，注入肝素 125u，剪开胸．暴露心脏，动脉第 — 支头臂动脉发出处近端横断，速将心脏投入 4C灌流液，冲洗冠状动脉中的残留血液，将心脏移至 lallgendoff灌流装置 F端，以 Krebs— Henseleit液灌流。 待心脏跳动规则后，在肺动脉起始处剪一小口，以利冠状血回流液排出。 心脏表面放置铂电极，连接电刺激，用于心脏起搏。 灌注约 15rain后，连续测定每分钟冠脉流量 3次：待恒定后开始给药，／ H量筒收集流出记录给药前后及给药后每 lmin流出量。 同叫可测定心肌耗氧星及其他生化指标的变化。 注意事项：药物的 pH及无机离子含量血接近生理值，否则酸性药液可增加冠脉流量，须用与药物同样 pH及无机离子的对照剂。 实验中供氧，温度、灌流压力及灌液 PH要固定不变。 灌流液必须用新鲜蒸馏水临时配制。 冠脉血管阻力受血管张力影响，受心肌紧张度对心血管支持力的影响。 药物抑制心肌收缩力，可使血管阻力降低．冠脉流量增加，假阳性。 为排除这种影响，可先心脏纤颤，然后观察约物对冠脉流量的影响。 用 6V直流电产生的断续感应电震直接刺激心脏，或用方形波刺激器刺激，也用交流电刺激引起心纤颤，然后测定每 lmin冠脉流量的变化。 (八 )心肌氧代谢实验 在心肌代谢中，氧的供需占有重要地位，供氧不足，耗氧增加是缺血性心脏病的主要矛盾。 左心室心肌耗氧量为每分钟8— 10ml／ 100g(心肌 )，工作负荷增加时每分钟可达 40ml／100g(心肌 )。 停心肌供氧，经 3次收缩即出现缺氧，因此，心肌耗氧测定是研究防治冠心病药物的重要指标。 心肌氧代谢的研究方法约分为三类。 1．直接测定 ①心肌耗氧星测定，在电磁流量汁测定冠脉血鼓的同叫反复多次测定动脉血及冠状静脉窦血氧量。 可计算心肌耗氧。 ②心肌氧张力测定，极谱仪的铂电极插入丌胸犬的心肌，连续纪录心肌氧张力的变化。 心肌缺血时内膜下血流及氧张力下降甚于心外股，缺血什损伤及坏死也较外层心肌严重，因此，用双暴露电极测定左心室外／内膜下氧张力变化以研究药物的影响，更有意义。 能选择性增加心膜下氧张力的药物或措施，对缺血性心肌都有保护作用。 这方法仪器昂贵，国内尚未广泛应用，③离体心脏心肌片或心肌组织及体外培养心肌细胞耗氧量测定，离体心脏灌流，分别测定流人液及流小液的含量，可算出心肌耗氧。 或用瓦氏呼吸器测定心肌的耗氧量。 或测氧仪直接测定心肌片的耗氧量。 方法简便，结果稳定。 2 间接测定 ①张力 — 时间指数，根据心肌耗氧量与心脏做功有密切关系的原理，间接推测心肌耗氧量的变化。 ②心肌耗氧指数，根据左心室需氧量决定于心率及收缩压的原理，间接推算心肌耗氧量的变化。 ③正性肌力作用 ，心肌收缩力、心肌缩短速度与心肌耗氧呈线形关系，凡有正性肌力作用或延长射血时间者，均增加心肌耗氧量，可根据药物指标的影响推测心肌耗氧量的变化。 3 心肌耐缺氧实验 增加心肌供血 (供氧 )或减少能量 (氧 )消耗，维持能量 氧 )代谢平衡，可提高心肌耐缺氧能力，国内常用耐缺氧实验综合评价 — 些药物的作用。 ①离体心脏灌流耐缺氧实验，用不同程度的低氧或无氧流液灌流离体心脏，观察心脏功能、形态及生化指标的变化，可反映离体心脏对不同缺氧程度的耐受能力以及药物的影响，并可用于受体作用的研究，但易受体外环境的影响，须严格拧制实验条件。 ②大鼠心肺灌流耐缺氧实验，此法除可反映离体心脏的耐缺氧能力和药物作用外，可同时测定血压、心输出、心房压及静脉压等各项指标，说明这些因素与心肌耐缺氧之间的关系以及药物的作用。 实验方法较前者复杂，但可获得较多信息，对药物研究有 — 定实用价值。 ③体外培养心肌细胞耐缺氧实验，利用体外的人或动物心肌细胞，模拟临床缺血性心脏病形成缺氧缺糖性损伤的细胞病理模型，用于研究药物对心肌细胞缺氧能力的影响．与前述方法结合。 可从器官、组织及细胞水平反映药物对心肌耐缺氧能力的影响。 ④其他，小鼠常压或减压缺氧实验，方法简单，应用广，反映整体 (特别是脑组织 )的耐缺氧能力，但特异性差，不能反映心肌的耐缺氧力，易受镇静、催眠或刺激性药物的影响，出现假阳性。 用小鼠或大鼠测定速度、存活时间及死亡时余存氧含量，可以较准确的反映出整体动物的耗氧速度及药物的影响，较前者精细，但亦不能直接说明心肌的耐氧能力，耗氧速度。 4，其他 心肌代谢除氧的摄取利用外，尚包括碳水化合物，脂肪、蛋白质等方面。 深入研究药物对这方面的影响，是必要的。 酶学研究．如磷酸肌酸酶 (CPK)可以定量地反映心肌损伤的程度，乳酸脱氧酶及天冬氨酸转氨酶 (AST)等，也常用以反映心肌损伤度。 测定动脉血，冠状静脉或缺血区血液乳酸或钾的含量，较心电图及血流动力学更敏感的反映心肌缺氧程度及药物的影响。 两者升高说明心肌缺氧。 下面重点介绍几种常用方法。 (1)心肌耗氧量直接测定法：经冠状静脉窦和颈总动脉插管，抽取冠状静脉和颈总动脉血，以血氧测定仪或血气分析仪直接测定血氧含量算心肌耗氧量。 可与实验中同时测定的其他血流动力学指标如冠脉血流量、血压、心电图等连续描记于生理记录仪，进行比较研究。 方法：健康成年犬，戊巴比妥钠 (30mg／ kg)静脉麻醉．开胸手术同前，从颈外静脉插冠状静脉窦，同时颈总动脉插管。 药前及药后不同时间抽取血样进行血氧测定，与其他血流动力学指标同时纪录相比较。 注意事项：熟练掌握冠状静脉窦插管技术，保持导管在冠状静脉窦内正确位，以保证血流通畅。 取血量要适度，避免抽取血量过多而造成缺血。 (2)氧电极测定心肌耗氧率的方法：氧电极怯测定系利用氧在极化电压下溶解的氧被还原而产生电流。 所以当测定系统将电极与被测溶液用能通过气体分子的聚乙烯薄膜隔开后，在一定极化电压下电极中测的电流量将只反映破测系统弥散过来的氧，故与被测溶液中的氧分压成正比，与组织的耗氧成反比，从而可以反映组织的代谢活动。 方法：大鼠或家兔随机分组，给药或对照液后，分别测定心肌耗氧量或结扎冠状动脉形成心肌缺血。 再经 — 定时间后处死动物，取心肌梗死区及对照区心肌组织，于冰浴上切、称重，加入心肌孵液，于 37℃ 恒温水浴平衡，然后将孵育液注入测氧仪，测氧分压，孵育前后的氧分压差值即为该组织的耗氧值。 实验时，每份样本检测 2～ 3次，取其均值。 注意事项：本法为整体实验，离体测定，可对正常心脏或缺血心脏进行不同部位的心肌耗氧量测定，反映药物对正常及缺血心肌耗氧的影响，方法简便，快速、易普及，但影响因素较多，嘛醉、呼吸状态及供氧情况，心肌标本的处理从测氧条件的控制，仪器的稳定性与灵敏以及实验环境温度的变化等，均可影响实验结果作用。 (3)非特异性方法：小鼠常压耐缺氧实验法 方法：将 lo个 250ml或 500ml的磨口广口瓶放入钠石灰 10g，上垫滤纸。 然后每瓶放人一只小鼠，各组动物分别给生理盐水或药物。 将小鼠放入瓶后，将徐有凡士林的瓶盖盖紧，记录时间，观察各组动物存活时间。 可用玻璃干燥器代替广口瓶。 用纸板隔为小格，每格放入小鼠一只，干燥器内放入一定量的钠灰或氢氧化钠氯化钙等量，用以吸收水分和二氧化碳。 或用装有氧电极的橡皮塞塞紧瓶，使氧电极与瓶内气体接触，连接测氧仪。