神经免疫内分泌学引论(doc101)-经营管理(编辑修改稿)

神经免疫内分泌学引论(doc101)-经营管理(编辑修改稿)内容摘要：

神经末梢可与脾淋巴细胞形成突触联系。 4. 淋巴结 在淋巴结的包膜下及包膜内，可见乙酰胆硷 (acetylcholine, ACh)能神经纤维，而 NE 能神经进入淋巴结实质中，绕周边血管成丛分布，少许在实质中游离。 在淋巴结的门部、被膜下、皮质与髓质交界及髓质和副皮质区有 SP、 VIP、 NPY、 CGRP 等肽能神经纤维的分布。 5. 淋巴管 交感和副交感神经纤维支配淋巴管，并有区域性特点。 另外，肠壁粘膜下层的淋巴小结或 Peyer 氏结与粘膜免疫密切相关， 并受 SP 肽能神经纤维的支配。 SP 肽能神经纤维还存在于肠绒毛中央乳糜管周围， 后者还有 ACh 能神经纤维分布。 以上事实说明，免疫组织和器官受到交感神经、副交感神经和肽能神经纤维的支配，从形态上体现出神经系统对免疫系统的直接影响，这种神经支配可以突触方式和非典型突触两种方式 ,即 线性传导 和 体 中国最大的管理资料下载中心 (收集 \整理 . 部分版权归原作者所有 ) 第 14 页 共 101 页 积性传导 ,后者应视为神经纤维末梢的旁分泌现象。 至于整体条件下两种方式何者为主，尚不知晓。 神经纤维对淋巴组织和器官的影响至少涉及以下几方面：①血流调控；②淋巴细胞的分化、发育、成熟、移行和再循环；③细胞因子或其它免疫因子的生成和分泌 ；④免疫应答的强弱及维持的时间等。 (二 ) 免疫细胞上的受体分布 运用药理学方法、放射受体分析、放射自显影、受体生化和受体分子生物学等技术，已在免疫细胞膜上或胞内发现众多激素、神经肽和神经递质的特异性受体。 1. 经典神经递质受体 (1) 肾上腺素受体：肾上腺素能受体可分为α和β两型 ,并可再分为α α 2 和β 1 及β 2 型。 已知胸腺和脾接受肾上腺素能纤维的支配 ,并发现在胸腺细胞和脾细胞膜上有β受体的分布。 小鼠胸腺细胞β受体在胚胎期的亲和力 (Kd=)高于成年鼠 (Kd=)。 用β受体激动 剂异丙肾上腺素刺激后 ,胎鼠胸腺细胞 cAMP 增高也更为明显。 小鼠淋巴细胞上β受体的 Kd 为 1nM,结合位点数为 500 个 /细胞。 另有报道 ,用 125I标记的受体拮抗剂进行受体分析表明 ,小鼠淋巴细胞上受体为β 2 亚型，其 Kd=，受体密度为 3000 个 /细胞。 用 24 株近交系小鼠进行的受体分析表明， T 和 B 细胞上β 2 受体动力学参数基本相同，亦不受性别影响。 大鼠腹腔肥大细胞膜上有β受体分布 ,Kd 为 177。 ，结合容量为 40000177。 14000 个 /细胞 ,药理学分析表明 ,这些β受体中 ％为β 2，而 ％为β 1 亚型 ,且用 IgE 致敏或相关 Ag 刺激肥大细胞均不改变β受体的特性。 静止的肥大细胞以β受体激动剂刺激 15 秒 ,胞内 cAMP 即有明显的增多 ,但不影响 IgE介导的组织胺的释放。 年轻大鼠的脾实质细胞有β 2和β 2 受体的共存。 家兔外周血淋巴细胞的β受体密度为 3500 左右 /细胞，其 Kd 为 177。 人外周血淋巴细胞、多形核白细胞、单核细胞、巨噬细胞及血小板上均有肾上腺素能受体。 正常人和哮喘患者淋巴细胞上β受体密度有异，而受体亲和力 中国最大的管理资料下载中心 (收集 \整理 . 部分版权归原作者所有 ) 第 15 页 共 101 页 不变，服用β受体激动剂可降低β受体密度 ,呈下调现象。 正常自愿受试 者每天服用 terbutaline 6mg,7天后淋巴细胞上β 2 受体数目减少 42％。 T 和 B 淋巴细胞的受体参数无明显差异。 血小板上有α肾上腺素能受体 ,刺激其受体可促进血小板聚集。 人多形核白细胞及 Mφ上有α 2 受体的存在。 另据新近报道 , 慢性感染患者外周血中单个核细胞的β 2受体密度与血清中可溶性 IL2 受体的水平有关。 (2) 多巴胺受体：小鼠和大鼠淋巴细胞膜有多巴胺受体 ,其 Kd 分别为 177。 和。 小鼠 B淋巴细胞上的受体密度为 60000 个 /细胞， 且多种抗多巴胺药物均可抑制放射性配基与多巴胺受体 的结合。 (3) ACh 受体：以同位素标记的 M受体可见于小鼠脾淋巴细胞和非淋巴细胞上 ,前者的 Kd 为 1nM，密度为 200 个 /细胞，后者密度为 400 个 /细胞。 小鼠胸腺和家兔胸腺细胞的胆碱能受体为 N 型 ,可特异地结合银环蛇毒素 ,提示胸腺的部分细胞可能起源于神经嵴或神经外胚层。 骨髓干细胞膜上的 ACh 受体参与干细胞的激活。 另外， Jurkat 细胞株具有 M3 型的ACh 受体， M3 受体激活后细胞内 Ca2+浓度上升，这一效应系 PLC 和 IP３所介导的。 Jurkat 细胞膜上 M3受体的 Kd 为 ，最大结合为 45370 位点 /细胞，所制备细胞膜也具有这一结合活性。 (4) 5 羟色胺 (5hydroxytryptamine， 5HT)： 5HT 既是神经递质， 又是免疫细胞如肥大细胞和嗜碱性粒细胞的活性分泌物。 已发现激活的人 T 细胞膜上有 5HT 1a 受体的分布，此受体的激活可增加胞内 cAMP 浓度。 人 T 淋巴细胞系 Jurkat 也表达 5HT1a受体 ,其作用可由 IP3 和 Ca2+介导。 (5) 组织胺 (histamine)受体：人 T 细胞有Ｋ d 为 0.4nM 及数目为 3500/细胞的组织胺受体。 CD8+T 细胞上的组胺受体为 H2型 ,其密度约为 6000～ 7000/细胞，并受白细胞介素和 H2受体拮抗剂西米替丁的调节。 B 细胞上的组织胺受体亦以 H2型居多。 2. 类固醇激素受体 分子生物学研究工作表明，几种类固醇激素的胞内受体构成一受体超家族 , 包括糖皮质激素受体 (glucocorticoid, receptor,GR)、雄激素受体 (androgen r 中国最大的管理资料下载中心 (收集 \整理 . 部分版权归原作者所有 ) 第 16 页 共 101 页 eceptor,AR)、孕激素受体 (progesterone receptor,PR)、盐皮质激素受体 (mineralocorticoid,receptor,MR)、甲状腺激素受体 (thyroid hormone receptor,TR),视黄酸受体 (retinoic acid receptor, RAR)及维生素 D 受体 (vitamin D receptor,VDR)。 其中 GR、 MR、AR和 PR均可识别和结合 DNA分子中一段基因序列，称之为糖皮质激素反应原件 (glucocorticoid response element， GRE),其序列为 TGCTAnnnTGTTCT。 由GRE 介导可影响靶基因的转录。 (1) GR： GR 广泛分布于多种淋巴组织及器官，存在于免疫细胞的胞浆及核内。 GR 在免疫细胞的表达有如下特点：①有较大的性别差异，如雌鼠胸腺细胞内 GR 浓度低于雄鼠。 ②抗原刺激及 PHA 均可上调 GR 浓度，而地塞米松则使其下调。 ③ Ca2+参与对 GR失活速率的调控。 ④ IL2 及 IL4 联合应用可降低人外周血单个核细胞 GR 对配基的亲和力，并使其数目增加，此作用可被 IFNγ阻断。 ⑤ LPS 可促进 GR 在小鼠 Mφ的表达。 GR 由 800 多氨基酸组成，其序列可分为几个功能区域：① DNA 结合区，由 80 氨基酸残基构成，中心部分为两个锌指结构，可结合于 DNA 双螺旋的大沟(major groove)内；② C 端为糖皮质激素 (GC)结合区；③ N 末端有 Tau1 区，可在 GR 与 DNA 结合后，以反式激活靶基因的转录。 此外，在 GC 结合区邻近 ,也有Taul 区 ,参与 GR 在核内转位。 无配基存在时， GR 与300kDa 的蛋白复合物结合而处于无活性状态。 此蛋白复合物由 2 个亚单位的 90kDa 热休克蛋白 (HSP90),59kDa 的免疫亲和素 (immunophilin)及其它抑制性蛋白组成 ,HSP90 结合于 GR 的 C 末端，参与 GR 的折叠构型并防止其自胞浆向核内转位。 免疫亲和素也可结合 CsA、 FK506 及 rapamycin 等免疫抑制剂，提示 GC 的免疫效应与其它免疫 抑制剂的作用机制可能类同。 (2) AR：已证实在大鼠、小鼠的胸腺及鸡的法氏囊上皮细胞内有睾酮受体存在。 (3) ER 及 PR：雌二醇 (E2)受体存在于大鼠、小鼠、牛及人的胸腺中 ,其 Kd 约为 , 可能定位于胸腺上皮细胞或网状细胞内。 鸡法氏囊也有 E2 受体。 PR则见于大鼠胸腺细胞内。 3. 神经肽及肽类激素受体 中国最大的管理资料下载中心 (收集 \整理 . 部分版权归原作者所有 ) 第 17 页 共 101 页 (1) ACTH 受体：已知小鼠脾细胞膜上有高亲和力和低亲和力两种 ACTH 受体，其 Kd 分别为 0. 1nM和 ，受体密度为 3000/细胞及 5000/细胞。 人外周血单个核细胞也有此两种受 体 , Kd值分别为 4nM 和。 免疫细胞上的 ACTH 受体与肾上腺皮质细胞膜的 ACTH 受体性质和结构基本相同，其分子量为 225kDa,由 4 条多肽链构成，分子量分别是 8 6 52 和 22kDa。 (2) GH 受体：小鼠及小牛胸腺细胞，人 T 细胞、外周血单个核细胞均有 GH 受体分布。 胸腺的 GH 受体密度为 10～ 20200/细胞 , 而 IM9淋巴母细胞系细胞膜上 GH 受体的 Kd 为 ,密度为 4000/细胞。 (3) PRL 受体： PRL 与 GH 对免疫细胞作用广泛 ,故其各自受体亦应存在于免疫细胞膜上。 人外周血 T及 B 淋巴细胞 PRL 受体 Kd=, 密度为 360/细胞，由 E2 所致的大鼠淋巴瘤 Nb2 株细胞的 PRL 受体Kd 为 75pM,每个细胞有 12020 个结合位点。 另发现 , 环孢霉素 A 能增加淋巴样细胞对 125IPRL 的结合。 (4) 阿片肽受体：阿片肽受体不同的亚型及非阿片样受体均存在于免疫细胞膜上。 人外周血淋巴细H纳络酮。 非阿片肽受体主要与β 内啡肽 (β endorphin、β END)的 C 端相结合 , 参与调节淋巴细胞对植物血凝素的反应。 (5) SP 受体：利用放射受体分 析、放射自显影及FACS 等技术已证实 SP 特异性受体分布广泛，如大鼠脾脏富含 B 细胞的边缘区，小鼠脾脏及肠壁 Peyer氏结中的 T和 B细胞，豚鼠腹腔巨噬细胞等 (表 102)。 表 102 SP 受体在免疫细胞上的分布及特性 (6) 其它： CD4+T 细胞膜上有与腺苷酸环化酶相偶联的 VIP 受体。 降钙素受体分布于人外周血 B 细胞膜上 ,提示降钙素不但能调节骨骼生理过程，还可影响免疫功能。 同样 ,LHRH、 促肾上腺皮质激素释放激素（ corticotropinreleasing hormone， CRH）、 中国最大的管理资料下载中心 (收集 \整理 . 部分版权归原作者所有 ) 第 18 页 共 101 页 CGRP、 ANP、心房利钠肽 (atrial natriuretic polypeptide, ANP)、血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ ,AⅡ )、 VIP、 SS 等受体也见于免疫组织及免疫细胞上。 4. 褪黑素受体 目前发现，在鸡、鸭等家禽及鹌鹑的胸腺、脾脏、 淋巴结和法氏囊等部位可特异性结合褪黑素。 褪黑素具有脂溶性，可穿透胞膜而作用于胞浆及核内受体。 (三 ) 免疫细胞合成的神经肽或激素 1. POMC 族肽 前阿黑皮素（ proopiomelanocortin,POMC)为促肾上腺皮质激素 (adrenocorticotropin,ACTH)的前体分子 ,也是β LPH(促脂激素 )、α MSH(黑素细胞刺激素 )及β END 的前身。 人外周血淋巴细胞及脾细胞在病毒感染及 LPS作用下 , 可分泌 ACTH和β END,与垂体分泌的 ACTH 和β END 结构一致。 小鼠脾脏中部分 Mφ及大鼠某些淋巴细胞则稳定生成这些激素， POMC mRNA 可表达于 Mφ及淋巴细胞中。 在 PHA 刺激下，人外周血细胞中 POMC mRNA表达增强。 LPS 刺激小鼠脾细胞 ,亦使其胞浆中 POMC mRNA 增多。 小鼠白细胞对不同的刺激反应各异 ,如以 CRF 或 新城病毒加入培养液中，则白细胞分泌的 POMC 肽类以 ACTH(1～ 39)和β END(1～ 31)为主 ,而 LPS 引起白细胞主要生成 ACTH(1～ 25)和β END(1～ 16,1～ 17)。 有人将β END 归为细胞因子。 2. TSH 已证明人外周血 B 细胞在 SEA 刺激下可分泌 TSH。