中药新药临床前药效及毒理研究ppt77-医药保健(编辑修改稿)

中药新药临床前药效及毒理研究ppt77-医药保健(编辑修改稿)内容摘要：

表现，离体为抑制，口服煎剂一般为兴奋，主要原因是离体时为其中橙皮苷和对羟福林等成份的作用；口服时药物的所含挥发油对胃肠粘膜的刺激发挥作用。 栀子苷的利胆作用很弱，在体内代谢物京尼平（ genipin） 作用增强；正如磺胺类药物体外的抗菌作用甚弱一样。  为了解决这个问题 ， 血清药理学的实验方法是首先给动物服药 ， 然后取其血清作为药物源进行药理学观察。 粗制剂和复杂的成分经过消化已及吸收分布 ， 代谢排除等体内过程 ， 再取含药的血清进行药理实验 ， 比较接近药物体内环境中产生药理作用的真实过程 ， 故适用于中药 ， 特别是复方进行药效评价及其作用机制的研究 ， 还可进行血清药化学及药气力学的研究。 受试动物多用大鼠 ， 豚鼠 、 家兔等。 每日服药 1次或 2次 （ 间隔 2~4h） ， 连用 3日 ， 亦可每日 1次 ， 连续 7日。 给药剂量可参考公式：剂量 =在体实验的给药量 反应系统中被稀释的倍数。 但可能因血药浓度不完全随给药剂量相应增加 ， 以及受灌骨浓度和容量的限制等 ， 不可能达到公制成的血清冻干粉 ， 加入反应系统 ， 使之达到需要的浓度。 给药后采血的参考时间 ， 如每日给药 2次 ， 连续 3日 ， 为末次给药后的 30mim至1h。 血清药理实验 ， 虽然可以克服离体实验中存在的某些缺点 ， 但尚未完全成熟 ， 还存在着一定的问题。 例如 ， 血清的来源和含药浓度 、 加药剂量 （ 不能添加 100%浓度的血清 ） ， 以及动物给药的剂量 、 给药方式 、采血时间 、 血清处理等诸多因素 ， 需要进一步完善和确定 ， 故影响其推广应用。 另外 ， 对不通血液而起的作用 ， 尤其是中药对整体的调节功能 ，便不能反映和观察。 因此 ， 不能完全取代体内实验。  又称在体实验，是用整体动物进行药理实验的方法。 根据试验需要可以选用正常动物或病理模型动物，按照试验的周期可以分为急性实验和慢性实验。 前者一般指观察一次给药后机体在短时间内出现的反应，如麻醉动物血压实验、急性毒性试验等。 但中药往往起效较慢，作用较温和，即使急性实验，有时也需持续多次给药，如 3~7日甚至更长时间后才能出现效应。 慢性实验指观察机体在较长时间内多次给药出现的反应，如寿命试验、慢性造瘘（胃肠瘘、子宫瘘等）、长期毒性试验等。 在体实验比较接近临床状态，尤其符合中药多成分、多靶点、多系统的调节整体作用，并可弥补离体实验的不足和局限性，故中药的药效学试验以体内实验为主，体外实验为辅。 结合中医临床用药的实践，以消化道给药为主，其他给药途径为辅。 尚若为中药有效成分或有效部位（群）、制剂较纯者，或临床为注射给药者，可用体外实验或注射给药进行主要药学试验。 （二）药效学试验的动物模型  研究和评价新药的防治作用需要建立动物模型 ， 20世纪以来 ， 新药研究发展较快的原因之一是成功建立了很多病理模型 ， 从而开辟了实验治疗的广阔领域。  ：理想的动物模型应与人类疾病的临床相似 ， 特别是中医 “ 病 ” 或 “ 证 ” 的动物模型应具有中医特点 ， 与临床辨证相似。 但要求一个动物模具型完全与人类疾病及临床表现相似 ， 这几乎是不可能的。 因为许多人类疾病的病因和病理变化尚未阐明 ， 除传染病以外 ， 大多来类推于基因的异常和缺陷。 中医的 “ 病 ” 、 “ 证 ” 尤为复杂 ， 例如 ， 脾虚证可见消化道吸收 、 分泌 、 自主神经功能紊乱 ， 体温调节中枢和血管运运中枢失常 ， 内分泌和免疫功能变化等系统的异常。 某些动物模型往往侧重于体现有关 “ 病 ” 、 “ 证 ” 的一定阶段 ， 某一证型 ， 某些主要症状或病理变化。  动物模型有自发性动物模型及诱发性或实验两大类。 前者包括突变系的遗传疾病和近交系的肿瘤模型 ， 如高血压大鼠 、 高血糖小鼠 、 肥胖症小鼠 、 无胸腺裸鼠 、 青光眼兔等。 其最大优点是疾病的发生发展类似于人类 ， 但这些模型来源困难 ， 不可能大量使用。 近代医学常用的是实验性动物模型 ， 即通过物理 、 化学和生物等致病因素 ， 人工诱发动物某些组织器官或全身的损伤 ， 在功能 、代谢和 （ 或 ） 形态学上出现与人类相应疾病类似的病变。 这类模型可以在短期内大量复制及适应研究目的等特点 ， 但其与自然发生的疾病模型毕竟存在一定差异性。 为此 ， 在设计制造该类模型时 ， 应尽可能克服其不足之处 ， 发挥特点。  评价模型的好坏、成功与否，关键是看能否反映防治对象的本质。 只要能反映事物的本质，模型的设计越简单好。 例如，抗毒药的模型，只要给动物攻毒就行；药物的抗菌、抗病毒作用常用体内保护试验可做常规的抗菌谱，观察指标合理，效率也高。 至于技术的先进性，方法的难易固然能反映研究的水平，但不是主要的。 如果模型选择不当，再高的水平只是花架子，不可能得到正确的结果。  动物模型选择标准应尽可能符合中医临床证或病的要求，以整体模型为主。 例如，根据 “ 虚则补之 ” 的辨证施治原则，研究补益药最好采用虚证模型，因为正常动物属阴阳平衡，正气不虚的机体，故对许多临床患者有效的补益药用正常动物往往看不到补益的效果。 研究证明，在 “ 气虚证 ” 动物模型上，免疫指标比正常动物普遍低下，给予参芪注射液后，多项免疫指标明显回升，而对正常动物则不如虚证模型升高明显。 正如解热药只降低发热者的体温，对正常体温却无降温作用，解痉药则对痉挛情况下的器官作用强而显著一样。  动物病理模型是具有人类疾病模拟性表现的实验对象和材料 ， 它是探索人类疾病本质及新药有效性评价的一个重要方法和手段。 人类各种疾病的发生发展极为复杂 ， 要深入研究其发病机 机和病理变化 ， 以及观察和评价药物的疗效 ， 不能也不应该在病人身上进行。 例如 ， 放射病 、 毒气中毒 、 烈性传染病等平时很难见到 ， 急性白血病 、 血友病及自身免疫性疾病等收集亦较困难。 有的疾病潜伏期及病程较长 ，如肿瘤 、 慢性气管炎 、 肺心病等 ， 要几年 、 几十年 ， 有些致病因素需要隔代乃至几代才能显示。 即使病种病情相同 ， 因病人的性别 、 年龄 、 体质 、 遗传及社会因素等不同 ， 也会影响疾病的病理过程。 利用动物 ， 可以在控制实验条件下 ， 用单一或特定的病因 ， 短期或较短时间内复制出典型的病理模型 ， 不但在群体上容易得到满足 ， 并且可以避免在人身上进行实验的危险性。  正确制作或选择一个合理的动物模型，可以增加药效学研究的真实性、可信性、成功率，提高研究的设计水平和科学性。 相反，使用一个不合理的模型，则会使实验结果失去准确性，甚至与原设计完全相反。 即使得出实验者满意的结果，也会因动物模型选择不当而得不到认可。  “ 证 ” 是中医在长期临床实践中对某些症候群的概括 ， 对诊断和治疗等十分重要 ， 辨证才能施治。 可见 ， 建立证的动物模型 ， 一方面可提供该证的研究对象 ， 探索其病因 、 病机 、 证候及病理变化等 ， 以便了解疾病的本质；另一方面则用于观察和评价新药的疗效。 在中药药理研究中 ， 目前应用较多的动物模型主要有两类：一类是拟“ 病 ” 的模型 ， 另一类是拟 “ 证 ” 的模型。 后者如 “ 血瘀 ” 、 “ 阴虚 ” 、“ 阳虚 ” 、 “ 气虚 ” 、 “ 血虚 ” 、 “ 脾虚 ” 、 “ 肾虚 ” 、 “ 厥脱证 ” 等动物模型。 但由于目前对各种 “ 证 ” 的病因病机和生理生化变化等本质远未彻底阐明 ， 故很难复制与临床有关 “ 证 ” 相符的动物模型。 为检验所制 “ 证 ” 模型的可靠性 ， 目前常从两个方面加以衡量 ， 一是用比较法 ，将动物模型的症状与中医临床症状加以比较。 由于中医辨证是从人体出发 ， 采用望 、 闻 、 问 、 切的诊断方法很难在动物身上进行 ， 所以要用要模型动物上所测得的生理生化指标 、 组织形态变化与临床患难与共者情况进行比较。 另一是用药物反证法 ， 即用中药代表方 （ 药 ） 对所建立病理模型进行治疗 ， 根据有无疗效来判断模型的可靠与否 ， 同时也可以观察中药的作用。 例如 ， 模拟血瘀证的病理模型能被活血瘀方 （ 药 ） 所逆转；血虚证动物模型 ， 用养血药治疗 ， 应产生预期的治疗作用。 为使动物模型尽量接近中医的 “ 证 ” ， 应采用多种病因 ， 不同动物 ， 以及多方法 ， 多指标地进行研究。  动物模型虽然在人类疾病及药物的研究中，发挥了不可抹抹灭的作用，但由于种属差异，造模方法，机体反应性的不同，特别社会因素和环境因素等，很难与人类疾病及证候的临床表现完全相同。 尽管人们建立了一些病（证）的动物模型，但尚处于探索阶段，有的仅用于病因病机证候的研究，不适宜药理学试。 比较成熟、科学合理的中医病（证）动物模型甚少，无论是数量或是质量均与目前要求相差甚远。 在不同模型上，药物疗效的差异给新药的研制工作带来较大的困难。 为此，研究中应尽量选择与人体反应比较接近的动物模型，发现矛盾时应深入分析原因，从中找出比较合理的模型。 一个药物往往需要用几个模型（一般为 2个或以上），从不同侧面证实其药效。 有的要在研制工作中反复进行，切忌单凭个别动物指标就作绝对的肯定或否定。  在实际评价具体的模型时 ， 仍然存在很多分岐 ， 即使像病因已明的病毒性乙型肝炎 ， 至今仍无大家能接受的模型 ， 有的认为鸭肝炎可以作为模型 ， 但有人认为鸭肝炎与人的乙型肝炎相差较大。 对中医 “ 证 ” 的动物模型争议更大 ， 如 20纪纪 60年代的糖皮激素“ 阳虚 ” 模型 ， 至今仍持有不同见解。 有些疾病的模型本身就不大好建立 ， 如高血压 、 冠心病 、 风湿病等 ， 虽相应地建了许多模型 ， 亦成功的评选过一些新药 ， 但与人体比较 ， 在病因和病理上还有相当的距离。 有的疾病现在还缺乏模型 ， 如神经性皮炎 、 鳞屑病 、 酒查鼻等。 有些药物剂型也难以在动物上实施 ， 如脐敷 、坐敷及肛门栓剂等。  由上可见 ， 很多动物模型尚有待改进 、 完善和积累经验 ， 更多的则有待于创新建立。 应该支持和鼓励人员努力探索 ， 在充分实验基础上 ， 创建新的动物模型。 由于中药与化学药品药效学研究的基本原则 、 主要内容和技术要求 ， 有很多相同之处 ， 故亦可借鉴现代药理学的理论 、 方法和手段 ， 以补充中药药理学研究工作方法的不足。 例如 ， 结扎冠状动脉造成 “ 心肌缺血 ” 的动物模型 ，用醋酸刺激制造 “ 溃疡病 ” 动物模型等。 只有这样 ， 才能促进药效学评价的发展。 另外 ， 每一种动物模型 ， 常常对某些药效反液压较敏感和准确 ， 而对其他方面则较差 ， 在选用动物模型时 ， 应充分权衡其优缺点 ， 用其所长 ， 以取得理想的结果。 （四）药效学试验指标的选择  药效学试验选用的指标应能准确无误地反映药物对机体的影响 ，所以要注意以下几项要求。  所选指标应该针对性强 、 专属性好 ， 能够反映变化本质。 例如 ， 要观察药物的降压或升压作用 ， 检测血压是特异性的关键指标；如要说明药物对急性肾炎的治疗作用 ， 尽管血压升高也是急性肾炎常见症状 ， 但并非特异的关键指标。 因为急性肾炎并不一定会有血压升高 ， 血压变化也不能代表药物对急性肾炎的疗效；而应选择肾功能检查 、 尿液检查或肾形态学检查等作为关键指标。 在中药药理研究中 ， 有时确定特异性指标还存在困难。 例如 ， 要说明中药的解表 、 开窍 、 助阳 、 滋阴等 ， 难以找到单一的特异性指标。 对此 ， 在一个指标不够时 ， 可以用一组指标来弥补。 如解表药可选用发汗解热 、 镇静 、 镇咳 、 祛痰 、 平喘 、 抗炎 、 抗敏及免疫功能等药效学试验指标。  指标要敏感 ， 能准确反映病情 、 证候的变化及药物的防治作用。 敏感性差或迟钝的指标 ， 会遗漏某些阳性变化 ， 造成假阴性。 有的指标 ， 由于弥散度大 ， 标准差大 ， 而导致统计学无显著性意义。  指标要稳定 ， 重现性好 ， 结果才可靠。 如发现重复性差 ，应及时排除种种干扰因素 ， 纠正对检测指标的影响 ， 重新实验。 否则重复性差的结果不可信 ， 不能作为新药疗效评价的依据。  主观检测的指标 ， 不够准确。 例如 ， 肉眼观察动物自发活动的影响 ， 可带有很大的主观性。 如果用光电计数仪 ， 计算动物活动的次数 ， 或用记录仪记录小鼠在一定时间内活动或行走的轨迹 ， 那就是客观的量化指标。 肉眼测量血压计水银柱 ， 亦有很大误差 ， 而用描记仪直接描记血压曲线 ， 动态的记录血压的变化 ，则更为客观。  为了判断和比较药物的作用 ， 便于统计学处理 ， 检测指标应有量的概念。 但是指标本身并不都是有数量的。 量反应指标有数量可表示 ， 而质反应指标则没有。 后者只反映现象的出现与否 ， 如死与不死 、 掠厥与不惊厥等。 这类指标只能通过累计现象出现的频率来达到数量化 （ 如阳性反应的百分率 ）。 也可采用计分法 ， 接阳性反应的程度人为地区分为若干级。 例如 ， ， 把小鼠的行为分解为 40多个指标 ，每个指标都区分为 8级 ， 以。