有害物质的测定(编辑修改稿)内容摘要:

观察 菌落总数 大肠菌群 病原菌检验 三、菌落总数检验 检样稀释及培养 ( 1)以无菌操作,将检样 25g(或 25mL)剪碎以后,放于含有 225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成 1: 10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000r/min100000r/min的速度处理 1min,做成 1: 10的均匀稀释液。 ( 2)用 1mL灭菌吸管吸取 1: 10稀释液 1mL,沿管壁徐徐注入含有 9mL灭菌生理盐水或其他稀释的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均匀,做成 1: 100的稀释液。 ( 3)另取 1mL的灭菌吸管,按上项操作顺序作 10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用 1支 1mL灭菌吸管。 ( 4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择 23个适宜稀释度,分别在作 10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移 1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。 ( 5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至 46 ℃ 营养琼脂培养基 [可放置在(( 46177。 1) ℃ )水浴锅内保温 ]注入平皿15mL20mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有 1mL稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 ( 6)等琼脂凝固后,翻转平板,置( 36177。 1) ℃ 恒温箱内培养( 48177。 2) h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数,即得 1g( 1mL)样品所含菌落总数。 样品稀释程序 菌落计算方法 ( 1)菌落计数方法 做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。 在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 ( 2)菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择 选取菌落数在 30~ 300之间的平板作为菌落总数测定标准。 一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘 2以代表全皿菌落数。 平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。 ② 稀释度的选择。
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