生物制药工艺学-生物制药工艺技术的发展-医药保健(编辑修改稿)内容摘要:

可以防止酶的渗出,底物仍能渗入网格内与酶相接触。 包埋法的优点是酶分子本身不参与水不溶性网格的形成,许多酶都可用此法固定化。 其操作简单,酶分子只是被保埋起来,而未受到化学反应,因此固定化酶表现活力较高。 常用的报埋剂有聚丙烯酰胺,卡拉胶,淀粉凝胶,三醋酸纤维素,海藻酸,胶原,血纤维,大豆蛋白等。 例:卡拉胶保埋细胞生产苹果酸 ( 3)共价键结合法 共价键结合法是通过化学反应使酶与聚合物载体共价偶联。 酶与载体共价结合的功能团包括氨基,羧基,酚羟基,巯基,羟基,咪唑基。 常用共价键结合法有:重氮化法,烷基化和芳基化法,戊二醛结合反应法,钛螯合法,硫醇-二硫化物的互换反应等。 固定化糖化酶 ( 4)肽键结合法 该法主要将含羧基的水不溶性载体变成酰基叠氮,异氰酸盐,卤化物等衍生物,再使这些衍生物与酶的游离氨基进行反应,形成肽键。 ( 5)交联法 交联法是使用双功能或多功能试剂与酶分子之间进行分子间的交联反应的固定化方法。 由于酶蛋白的功能基团,如氨基,酚基,巯基,和咪唑基,参与交联反应,因此可能影响酶的活性中心结构,而使酶活力显著失活。 交联剂有多种,主要为戊二醛。 在固定化酶的基础上,固定化细胞技术得到迅速发展,其实际应用速度已超过固定化酶。 固定化细胞具有更多的优点,它省去酶的分离操作。 在细胞内,酶稳定性较高,进行固定化时,活力丧失较少,且能利用天然存在的多酶体系,制造成本更低。 但是反应产物与底物必须容易透过细胞膜。 固定化酶和固定化细胞在食品发酵工业和制药工业方面的应用,不仅可以改革现有的生产工艺,而且可以创新多酶反应工艺,还可以促使发酵工业发生根本性变革,因此在制药工业中的应用具。
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