胚胎干细胞的研究与应用_毕业论文正文(编辑修改稿)内容摘要:

康程度应远远高于 ICM[8]; ③ 虽然 PGCs 用于 ESCs 的培养还存在诸多问题,但无论在数量上还是取材方法上, PGCs 的获取均比桑椹胚和囊胚的获取容易 ,因而更具有实际的应用价值。 PGCs 用于 ESCs 培养的影响因素 基础培养基的选择 ESCs 的体外培养工作 要求在严格的无菌条件下进行。 常规使用的培养液有白血病细胞抑制因子 (LIF)、胎牛血清、 L 一谷氨酸、非必须氨基酸 (NEAA)以及高浓度的 DME 等。 因 DMEM 比较适于生长速度快和呈集落状生长的细胞,而 PGCs 正符合这一 特点。 因此采用 DMEM 为基础培养液是能够满足胚胎干细胞和饲养层细胞的生长要求的 [9]。 饲养层对胚胎干细胞的影响 适宜饲养层的使用使得体外培养的 PGCs 增殖成为可能。 目前广泛应用的饲养层有三种,STO(一种已建系的小鼠胚胎成纤维细胞 )、 Pmef(小鼠原代胚胎成纤维细胞 )。 由于后者所模 拟的体外培养条件与 PGCs 在体内生长的环境更为接近。 故更有利于 ESCs 生长 [10]。 近年来,研究人员通过实验发现,以睾丸支持细胞 (SCs)作为饲养层与 PGCs 共饲养,可明显提高 PGCs 的增殖能力 [11], SCs 除可以产生大量 CL 外, 还可产生层粘连蛋白 (LN)(一种黏附蛋白 ),另外, SCs 还能分泌多种内源性生长因子和分泌抑制因子,包括 LIF、 SCF(干细胞生长湖北大学自考 独 立本科段 论文 胚胎干细胞的研究与应用 8 因子 )、 bFGF(碱性成纤维细胞因子 )等。 因此,从理论上说,可提取动物睾丸 SCs,然后将 PGCs与 SCs 共培养,不仅可促进 PGCs 贴壁。 而且能有效地 抑制体外培养中 PGCs 的分化,的确是一项值得继续研究与开发的好方法。 湖北大学自考 独 立本科段 论文 胚胎干细胞的研究与应用 9 第 五 章 ESCs 的应用前景 ESCs 的应用最主要的应用是基础科学研究、医学和农业科学等方面,特别是在发育生物学、克隆动物、 药学研究 以及组织器官的修复移植等方面有着无比广泛的应用前景 [12]。 5. 1 克隆动物的生产 由于 ESCs 具有全能性和多能性,并可以在体外增殖、 分化,因而是克隆动物的理想材料,ESCs 的运用大大加快了家畜育种工作的进程,迅速提高有利于基因及其组合在群体中的比例。 5. 2 器官移植 ESCs 作为一种“ 种子细胞” 为临床的组织、器官移植提供 了大量的材料, hESC 经过免疫排斥基因剔除后.再定向诱导终末器官以避免不同个体间的移植排斥,这样就可能解决一直困扰着免疫学界及医学界的同种异型个体间的移植排斥难题。 5. 3 组织和器官的修复 由于 ES 细胞具有多能性,可发育分化为三胚层细胞,即发育分化成机体所有类型组织细胞的能力,任何因物理、化学或生物因素等造成的细胞损伤或病变都可以通过移植由 ES 细胞定向分化而来的特异组织细胞或器官来治疗。 目前,运用药物或细胞因子诱导 ES 细胞定向分化为神经细胞 [13]、心肌细胞 、肝细胞 [14]、软骨细胞等已多有报导。 动物发育生物学研究 近年来 细胞分化是发育生物学的核心问题之一,至今有许多问题还不清楚,而体外培养PGCs并建立 ESCs系提供了在细胞和分子水平上研究哺乳动物发育生物学提供了理想的实验体系。 药学研究方面 湖北大学自考 独 立本科段 论文 胚胎干细胞的研究与应用 10 胚胎干细胞系可分化为多种细胞类型,又是能在培养基中不断自我更新的细胞来源。 它发展为胚体后的生物系统,可模拟体内细胞与组织间复杂的相互作用,这在药物研究领域具有广泛的用途。 胚胎干细胞有望在短期内 就能体现的优势在于药物筛选中。 目前用于药物筛选的细胞都来源于动物或癌细胞这样非正常的人体细胞,而胚胎干细胞可以经体外定向诱导,为人类提供各种组织类型的人体细胞,这使得更多类型的细胞实验成为可能。 虽不会完全取代在整个动物和人体上的实验,但会使药品研制的过程更为有效。 当细胞系实验表明药品是安全的且效果良好,才有资格在实验室进行动物和人体的进一步实验。 在候选药物对各种细胞的药理作用和毒性试验中,胚胎干细胞提供了对新药的药理、药效、毒理及药代等研究的细胞水平的研究手段,大大减少了药物检测所需动物的数量,降低了成本。 另外,由于胚胎干细胞类似于早期胚胎的细胞,它们有可能用来揭示哪些药物干扰胎儿发育和引起出生缺陷。 人胚胎干细胞还可以用于其它用途。 由于这类细胞本质上可以无限量地产生人体细胞,它们对于旨在发现稀有人蛋白的研究计划理应有用。 国际上许多制药公司、学者都瞄准了这一重要的研究领域。 近年来 ,大量实验研究表明多种中药对胚胎干细胞的定向分化有调控作用,这些发现不仅为干细 胞的定向分化开辟了新的途径, 而且对于中药作用机制的研究、中药新药的研制开发、某些疑难疾病防治水平的提高等都具有重要意义。 湖北大学自考 独 立本科段 论文。
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