紫苏子有效成分的提取分离毕业论文(编辑修改稿)

紫苏子有效成分的提取分离毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

提取分离 3 酸、亚油酸、油酸 ， 经查阅文献可知还含有花生四烯酸、花生酸 [3]、二十碳 — 烯酸、二十碳烷酸。 其主要成分及含量如表所示 ： 表 21紫苏子油的脂肪酸组成 (%) 成分 亚麻酸 亚油酸 油酸 棕榈酸 花生酸 硬脂酸 含量 （二） 氨基酸 紫苏子约含有 18 种氨基酸 ，其中动物必需氨基酸含量较高。 例如，赖氨酸、含硫氨基酸 [4]等。 这十八种氨基酸 分别为： 天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、色氨酸。 各主要成分及含量如表所示 ： 表 22 紫苏子的氨基酸含量 (W/%) 氨基酸 含量 氨基酸 含量 氨基酸 含量 天门冬氨酸 丙氨酸 络氨酸 苏氨酸 胱 氨酸 苯丙氨酸 丝氨酸 缬氨酸 赖氨酸 谷氨酸 甲硫氨酸 组氨酸 甘氨酸 异亮氨酸 精氨酸 脯氨酸 亮氨酸 色氨酸 （三） 黄酮类和多酚类化合物 紫苏子的醇提取物所得到的成分主要是黄酮和多酚类化合物 ，且结果表示两者含量较丰富 [5]。 紫苏子中 黄酮和多酚类化合物的主要成分为咖啡酸、迷迭香酸、儿茶素、槲皮素、黄酮醇等 [6][7]。 杨晓 静等 [8]采用气相色谱法和快速硅胶柱 色谱 法对紫苏油中甾醇、4甲基甾醇和三甾醇等不皂化物的成分进行分离和分析 ， 同时采用气相色谱 质谱联用确定 了 7种甾醇类化合物 ， 分别为菜油甾醇 (Campesterol)、胆甾醇 (Cholesterol)、豆甾醇 (Stigmasterol)、 α 波菜甾醇 (αSpinasterol)、 β 谷甾醇 (βSitosterol)。 紫苏子有效成分的提取分离 4 （四） 微量元素、矿质元素 检测发现紫苏子中含有铁、锌、铜、钾、钙、镁、钠、磷、猛、砷、汞、钒、镍、硅、硼、铬、铅、铭等 18 种矿物质元素，还可分离得到谷 维素、 β 胡萝卜素、抗过敏的多元酚、 VB VB VE 等。 表 23 紫苏子中的维生素、矿质元素含量 (mg/kg) 维生素 含量 元素 含量 元素 含量 元素 含量 VB2 P Al Zn VB1 Ca Na Co VC K Mn Cr VE Mg Cu Pb β 胡萝卜素 Fe Ni Hg （五） 其它 从紫苏子中可以分离得到 %的谷维素、磷脂等 [9]。 二、 药理活性的研究 （一） 降血脂 紫苏子的脂肪油提取物具有明显的降血脂作用。 陈氏等 [10]研究发现大豆肽和紫苏子油制成的制剂降脂肽可以显著降低高血脂模型大鼠的血清中 TC及 TG浓度 ， 明显升高HDLC水平 ， 停止灌胃 1周后 ,仍可使血清中 TG 维持在较低水平。 谭氏等 [11]报道紫苏子油对大鼠脂代谢紊乱有预防作用 ， 对兔实验性高脂血症有改善作用。 郭氏等 [12]的试验结果也表明紫苏子油对高脂血症大鼠均有一定的调整血脂的作用 ， 且作用优于对照组。 分析其 作用机制 ， 可能是紫苏子富含 α 亚麻酸 (十八碳三烯酸 )是 ω 3 长链多烯长饱和脂肪酸 二十碳五烯酸 (EPA)和二十二碳六烯酸 (DHA)的前体物质。 在体内酶的作用下 ，α 亚麻酸转变为 EPA 和 DHA， 后者通过抑制 TC 合成酶的限速酶羟甲基戊二酸单酰铺酶A 还原酶的活性而减少体内 TC的合成 ， 同时 ω 3 脂肪酸能刺激 TC代谢为胆酸和中性固醇而从粪便排除 ， 从而降低血脂。 紫苏子有效成分的提取分离 5 （二） 促进学习记忆能力 紫苏子中的脂肪油提取物具有促进小鼠的学习记忆能力的作用。 文献报道从紫苏子提取有脂肪油 ， 可减少小鼠跳台错误次数 ， 能明显提高小鼠水迷路测 验的正确百分率 ，缩短到达终点时间 ， 并能促进小鼠脑内核酸及蛋白质的合成 ， 调节小鼠脑内单胺类神经递质水平 [13]。 动物实验也证明 ， 如果在食物中加入富含 α 亚麻酸饲料进行子鼠二代培养 ， 可提高子代小鼠的学习记忆能力 ， 使子代小鼠视网膜中的 DHA 增加 ， 视网膜反射能增强 [14]。 以上研究表明紫苏子促进学习记忆能力作用的机制可能是与其富含的 α 亚麻酸有关。 （三） 止咳、平喘作用 紫苏子提取的脂肪油有明显的止咳和平喘作用。 王氏等 [15]报道小鼠腹腔注射5gkg 1 紫苏子油后 ， 对喷雾组织胺和乙酰胆碱所致的支气管哮喘 ， 能明显 延长出现喘息性抽搐的潜伏期 ， 与对照组比较有非常显著差异 (P),其作用与 kg 1氦茶碱相似。 小鼠灌服 5gkg 1和 kg 1紫苏子油后 ， 咳嗽潜伏期显著延长 ， 咳嗽次数显著减少 ， 与对照组比较均有非常显著差异 (P)， 其作用与 kg 1咳必清相似。 （四） 抗衰老作用 现代医学认为 ， 自由基是导致衰老的重要因素之一 ， 其代谢产物之一 MDA(过氧化产物 )的含量可反映细胞被氧化程度 ，而 SOD(过氧 6 化物歧化酶 )通过对氧离子起歧化作用合成 H2O2， 再由其他抗氧化酶连续代谢 变成水 ， 清除自由基 ,从而保护细胞不受毒性氧自由基的损害 ， 而达到减缓衰老的作用。 韩氏等 [16]报道紫苏油可明显降低脑及肝中 MDA 含量 ， 对脑的作用优于肝 ， 还可显著提高红细胞中 SOD 活力。 因此认为紫苏油具有很好的抗衰老作用。 紫苏子有效成分的提取分离 6 （五） 抗过敏作用 通过比较用紫苏子油组 (富含亚麻酸 )和红花油组 (富含亚油酸 )饲养的小鼠对抗原诱发的过敏性休克的死亡率 ， 结果发现紫苏子油组比红花油组明显降低。 紫苏子之所以具有抗过敏作用机理 ， 是因为其所含有的 α 亚麻酸在体内代谢过程中 ,通过竞争酶系统 ， 能抑制亚油酸向花生四烯酸 (AA)转化 ,降低 体内 AA水平。 同时 α 亚麻酸转化的 EPA和 DHA， 可直接抑制 AA 向二十碳物质 (致敏物质 )的代谢 [17]。 （六） 其它作用 还有文献报道从紫苏子中提取的紫苏子油具有抑制结肠癌、肾脏肿瘤的作用 ， 其种皮具有防止油脂及其它食用物品氧化的作用 [18]。 第三章 紫苏子有效成分的提取 紫苏子属于中药产品， 中药 所含的化学成份十分复杂，既含有多种有效成份，又有无效成份，也包含有毒成份。 由 此可知 ，其有效成分的提取过程比较复杂。 因此中药有效成分的提取技术成为中药研究领域中的一项重要内容。 中药提取是应用一些可行的技术对其有效成分进行最大程度的提取，其提取过程使得中药制剂的内在质过程中非常重要的环节 ， 提取的方法 、 流程 、 操作设备等都关系到中药能否发挥它的最大或最好治疗效果 ，这对于中药的临床应用十分重要。 传统的提取方法例如 ， 板框过滤法 、 离心法、树脂吸附法 、 醇沉法等工艺对中药提取液的澄清和提纯精制等操作存在较多问题。 除此之外， 过滤操作比较困难容易堵塞、树脂孔堵塞、溶剂消耗大 、 生产提取的废水量大、容易造 成环保负担等问题。 从中药材中提取活性成分的方法有溶剂法、水蒸气蒸馏法、及升华法等。 由于水蒸气蒸馏法及升华法的应用范围有限，所以常采用溶剂法对中药有效成分进行提取。 溶剂提取法系根据药材的性质选择适当的溶剂将其中的化学成分从药材中提取出来。 一般情况下，药材须经干燥并适当粉碎，这样有利于增大药材与溶剂的接触面积，提高萃取效率。 紫苏子成分中脂肪油等油脂性化合物因为极性较小，易溶于氯仿、乙醚等亲脂性溶剂中，因此在进行提取实验时选择石油醚对其成分中的脂肪油进行提取；而糖苷、氨基酸等类成分则极性较大，易溶于水及含水醇中 ；酸性、碱性及两性化合物，存在状态随紫苏子有效成分的提取分离 7 溶液 PH 的改变而改变，故溶解度也随 PH 的改变而改变。 但是从药材中提取活性成分时，由于存在多种成分间的相互助溶作用，情况要复杂得多。 因此，从药材中提取活性成分很难有一个固定的模式。 通常需根据提取要求、目的成分及杂质的性质差别以及溶剂的溶解能力来确定。 一般，可将固体药材按提取用的溶剂的极性递增方式，用不同溶剂，如石油醚或汽油（可提出油脂、蜡、叶绿素、挥发油、游离甾体及三萜类化合物）、氯仿或乙酸乙酯（可提出游离生物碱、有机酸及黄酮、香豆素的苷元等中等极性化合物）、丙酮或乙醇、甲 醇（可提出苷类、生物碱盐以及鞣质等极性化合物）及水（可提出氨基酸、糖类、无机盐等水溶性成分 ） 依次进行提取。 得到的各个部分经活性测试确定有效部位后再做进一步分离。 本次试验主要从采用溶剂法提取中的回流提取法，下面依次介绍溶剂法提取的原理、回流提取法以及其他几种溶剂提取法。 一、 溶剂提取法 溶剂提取法是中草药提取操作过程中应用最广泛的方法，主要是根据中草药中各种有效成分溶解度的差异，在提取过程中选用对所需成分的溶解度较大而对杂质溶解度较小的溶剂对药材有效成分进行提取。 中草药经粉碎加入溶剂后 ，溶剂扩散并渗入到药材的细胞内，将可溶性物质进行溶解，从而细胞内外产生浓度差，细胞内的液体不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，最终细胞内外溶液浓度达到动态平衡 ，溶液达到饱和。 将饱和溶液过滤收集并加入新溶剂，从而把有效成分最大程度的提取出来。 二、 溶剂提取法的原理 溶剂法提取的原理是“相似者相溶”。 提取过程是根据药材的性质选择合适的溶剂对其有效成分进行提取。 化合物亲水性和亲脂性程度的大小与其分子结构有关，一般来说，两种基本母核相同的成分，其分子中的官能团的极性越大或极性官能团数目越多，则整个分子的极性就越大，表现亲水性越 强，而亲脂性越弱。 其分子非极性部分越大或碳链越长，则极性越小，亲脂性越强，而亲水性越弱。 紫苏子成分中脂肪油等油脂性化合物因为极性较小，易溶于氯仿、乙醚等亲脂性溶剂中，因此在进行提取实验时选择石油醚对其成分中的脂肪油进行提取；而糖苷、氨基酸等类成分则极性较大，易溶于水及含水醇中；酸性、碱性及两性化合物，存在状态随溶液 PH的改变而改变，故溶解度也随 PH的改变而改变。 常见溶剂的极性强弱顺序可表示如下：石油醚（低沸点 — 高沸点）紫苏子有效成分的提取分离 8 ＜二硫化碳＜四氯化碳＜三氯乙烯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜水＜吡啶＜ 乙酸。 从药材中提取活性成分时，由于存在多种成分间的相互助溶作用，情况要复杂得多。 因此，从药材中提取活性成分很难有一个固定的模式。 三、 提取实验 （一） 回流提取法 回流提取法是用乙醇等易挥发的有机溶剂来将原料的的有效成分提取 ，提取过程中 将浸出液加热蒸馏，则挥发性的有机溶剂会馏出 ， 后又被冷却，重复此操作，直至有效成分被最大程度的回流提取的方法。 蒸馏过程时间较长，故此方法不适用于受热易遭破坏的原料成分的提取。 有机溶剂加热提取时，应采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。 如果是在实验室进行小量操作，可用连有回流 冷凝管的圆底烧瓶。 水浴加热，浸取溶剂一般浸过药材表面约 1～ 2cm，一般在沸腾状态下回流约 1小时后放冷过滤，再在药渣中加入溶剂，进行第二次加热回流，重复此操作，每次约半小时，直到有效成分基本全部被提取出来为止。 此法提取效率较冷浸法高，但只适用于小量生产，且受热易破坏的成分不宜用此法，且溶剂消耗量大，操作麻烦。 （二） 实验操作过程 提取：取 200g 紫苏子药材粉碎后用加入 10倍量的石油醚（ 6090℃）回流 3次，每次 2h,得到黄色透明溶液，合并，过滤，减压浓缩蒸发至干，得到黄色油状液体， g,(查文献 )即石油 醚提取物（主要成分为脂肪油）。 将残渣晾干后，加入 10 倍量的 75%乙醇，回流 2次，每次 2h, 得到深黄色溶液，合并每次所得溶液，过滤，减压浓缩至干，得浸膏 ，即紫苏子醇提取物。 （主要成分是黄酮）。 表 31 实验所用仪器与设备 仪器名称 生产厂家 RE52 型旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂 FA2204B 电子分析天平 上海精科公司 SHBB95A循环水真空水泵 郑州长城科工贸有限公司 CLF06C 中药粉碎机 浙江温岭市创立药材器械厂 紫苏子有效成分的提取分离 9 KQ500DE 型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司 ZF20D 暗式紫外分析仪 上海顾村电光仪器厂 海利 AC09601 静音水泵 中山市绿资园艺发展有限公司 表 32 原料与试剂 药品名称 生产厂家 95%乙醇 (AR) 天津市富宇精细化工有限公司 石油醚 (AR) 天津市富宇精细化工有限公司 醋酸 (AR) 天津市科密欧化学试剂有限公司 葡聚糖凝胶 (Sephadex LH20) 北京绿百草科技发展有限公司 丙酮 (AR) 天津市科密欧化学试剂有限公司 正己烷 (AR) 天津市科密欧化学试剂有限公司 乙酸乙酯 (AR) 天津市科密欧化学试剂有限公司 甲苯 (AR) 天津市科密欧。