穿心莲内酯的提取工艺研究_毕业论文(编辑修改稿)

穿心莲内酯的提取工艺研究_毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

% 3,5二硝基苯甲酸 的制备：用电子天平精确称取 ,5二硝基苯甲酸 ，溶解于适量蒸馏水中，用玻璃棒转移到容量瓶中， 定容至 100mL，摇匀后备用。 ⑶ 60%的乙醇溶液：取实验室的无水乙醇 60mL，放入 100 mL容量瓶中，向容量瓶中加水至刻度线，摇匀后备用。 ⑷ 75%的乙醇溶液：取实验室的无水乙醇 75 mL，放入 100 mL 容量瓶中，向容量瓶中加水至刻度线，摇匀后备用。 湖州师范学院学士学位论文 4 3． 实验方法 实验原理 单因素试验设计 单因素试验设计是指试验中只考虑单一因素的影响，虽然实际试验中影响因素可能比较多，但我们需要先孤立其中一个因素进行研究。 他包括完全随机的实验设计、随机区组设计和拉丁方的实验设计。 正交试验设计 试验设计法是在 1920 年有英国著名统计学家费歇（ ）发展起来。 但是采用这种方式进行试验是，当因素与位级增加时，试验次数急剧增加。 20 世纪 50 年代初，日本电讯研究所田口玄一博士在此基础上开发了正交试验设计技术。 此试验 应用一套正规化的正交表来安排实验和用一种程序化的计算方法来分 析试验结果，由于这种方法的试验次数少、分析方法简便、重复性好、可靠性高并适用面广，因而在世界范围内迅速普及，成为试验设计的重要工具。 正交试验法的原理，我们 以 23 型全面试验为例进行说明。 23 型全面试验， 即因素为 A、 B、 C各取 2 水平， 共需进行 23=8 次 ，如表 31 所示。 正交试验法对于全面试验来说只实施了一部分，但对于其中任意两个因素来说，却是带有等重复的全面试验。 表 31 23 型全面试验表 实验号 因素 A B C 1 1 1 1 2 1 1 2 3 1 2 1 4 1 2 2 5 2 1 1 6 2 1 2 7 2 2 1 8 2 2 2 紫外 可见吸收光谱 紫外 可见 吸收 光谱（ UVVis） [15]是研究物质在紫外 见光波区 (190nm～ 1100nm) 的分子吸收光谱的一种常用分析方法。 某些物质的分子在吸收光能后由稳定状态的基态分子月前到不稳定的高能态从未形成光谱。 利用这一特性可以对无机化合物、有机化合物及生物 大分子进行定性和定量分析，继而出出现了紫外 可见分光光度计。 紫外 可见光谱的基本原理是光的吸收定湖州师范学院学士学位论文 5 律，即朗伯 比尔定律（ LambertBeer）。 比尔 —朗伯定 律数学表达式 ： A=log(1/T)=Kbc （ 31） A：吸光度； T：透射比，是透射光强度 (I0)比上入射光强度 (It)； K:摩尔吸收系数 ； b：吸收层厚度，一般以 cm为单位； c： 吸光物质的浓度。 穿心莲内酯为不吸收可见光的无色物质，与 3,5二硝基苯甲酸 的碱性实际发生显色反应，反应液呈紫红色，故可用分光光度计来测量穿心莲内酯含量。 但是为了提高测定的灵敏度，需要准确控制显色时间和显色剂用量 [16]。 活性炭脱色 活性炭 是一种黑色粉状，粒状或丸状的无定形具有多孔的碳，主要成分为碳，含少量氧、氢、硫、氮、氯。 具有较大的表面积，有很强的吸附性能，能在它的表面上吸附气体、液体或胶状固体，常用于气体的吸附、分离和提纯，溶剂的回收和油脂、甘油、药物的脱色剂。 活性炭 在水中 脱色效果最强，有机溶剂中较弱。 一般加 ~3%（ w/v），脱色时间一般为 30~60min，使用温度在 75~80℃比较好。 要注意不可在沸腾的溶液中加入活性炭，会产生暴沸的可能。 另外，有色杂质虽可溶于沸腾的溶剂中，但当冷却析出结晶体时部分杂质又会被结晶 吸附，使得结晶带色，所以用活性炭脱色要等固体物质完全溶解后再加。 实验步骤 含量测定方法 ⑴ 对穿心莲内酯对照品溶液 (配制方法见 )进行最大吸收波长扫描，后得出穿心莲内酯的最大吸收波长在 226nm 处， 与参考文献比较后结果相 近 ， 所以选择此波长为穿心莲内酯的测试波长。 结果见图 31。 图 31 穿心莲内酯吸收光谱图 ⑵ 此处采用比色法测定穿心莲内酯浓度。 事先 配制 好需要测 吸光度 的提取液 10mL：稀释好的穿心莲内酯提取液 1mL，加入 1%3,5二硝基苯甲酸 2 mL， ,60%乙醇溶液 4 mL，静置 15s 后用 60%乙醇定容至 10 mL，摇匀，在紫外 可见分光光度仪上 226nm湖州师范学院学士学位论文 6 出比色，测定吸光度。 标准曲线的绘制 ⑴ 标准液的配备：精密称取穿心莲内酯对照品（在 105℃ 下干燥至恒重） 20mg，加 95%乙醇完全溶解，转移到容量瓶中并定容至 100mL，得到浓度为。 ⑵ 测量：精密量取标准液 0、 、 、 、 、 、 ,分别加入 10mL 容量瓶中，依次标号 7。 各加入 60%乙醇 2 mL， 1%3,5二硝基苯甲酸 2 mL， KOH 溶液 2mL，摇匀，静置 15后以 60%乙醇定容至刻度，摇匀。 以 1 号管为对照，分别在分光光度计上 226nm 处测量吸光度，并绘制标准曲线。 曲线以穿心莲内酯浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。 单因素试验 取穿心莲的干燥茎干为原料，挑去杂质，粉碎后备用。 ⑴ 以超声震荡时间为单因素变量 精确称取 5g穿心莲粉 6份，分别加入 250mL 锥形瓶，再各加入 50mL75%乙醇，置于超声波清洗器中，设置温度为 40℃，超声功率 100W， 分别在 60、 80、 100、 120min 时取出，依次用真空抽滤， 再加入活性炭 ， 30℃ 水浴 10min 脱色，抽滤 ， 将滤液标号 并 用 75%乙醇定容至 250mL。 按照 中方法测定吸光度， 计算穿心莲内酯的相对含量。 ⑵ 以超声功率为单因素变量 精确称取 5g穿心莲粉 6份，分别加入 250mL 锥形瓶，再各加入 50mL75%乙醇，设置反应温度为 40℃ ， 分别在 80、 100、 1 1 160、 180 瓦的功率下震荡 20min。 震荡结束后依次抽滤，再加入活性炭 30℃ 水浴 10min 脱色，抽滤，取滤液标号，将所有滤液用 75%乙醇定容至250mL。 按照 中方法测定吸光度， 计算穿心莲内酯的相对含量。 ⑶ 以料液比为单因素变量 精确称取 5g穿心莲粉 6份，分别加入 250mL 锥形瓶，在各瓶中加入 25mL、 50mL、 75mL、100mL、 125ml、 150ml75%乙醇 ，设置超声功率 100 瓦，超声温度 40℃，然后放置于超声波清洗器中震荡 20min。 震荡结束后依次抽滤，再加入活性碳 30℃ 水浴 10min 脱色， 抽滤， 取滤液标号，将所有滤液用 75%乙醇定容至 250mL。 按照 中方法测定吸光度， 计算穿心莲内酯的相对含量。 ⑷ 以不同溶剂为单因素变量 精确称取 5g 穿心莲粉 4 份，分别加入 250mL 锥形瓶，再依次加入水、 75%乙醇、乙酸乙酯、石油醚各 50mL， 设置超声功率 100w，超声温度 40℃，然后放置于超声波清洗器中震荡 20min。 震荡结束后依次抽滤，再加入活性碳 30℃ 水浴 10min 脱色， 抽滤， 取滤液标号，将所有滤液用75%乙醇定容至 250mL。 按照 中方法测定吸光度， 计算穿心莲内酯的相对含量。 ⑸ 以反应温度为单因素变量 精确称取 5g穿心莲粉 6份，分别加入 250mL 锥形瓶，再加入 50mL 75%乙醇，设置超声功湖州师范学院学士学位论文 7 率 100 瓦，温度设置为 4 50、 5 60、 65℃ ，置于超声波清洗器中震荡 20min， 震荡结束后依次抽滤，再加入活性碳 30℃ 水浴 10min 脱色， 抽滤， 取滤液标号，将所有滤液用 75%乙醇定容至 250mL。 按照 中方法测定吸光度， 计算穿心莲内酯的相对含量。 正交试验 在以上单因素试验结果的基础上，选择对穿心莲内酯提取浓度影响较大的各主要因素进行正交试验。 以反应温度 45℃ 时，对超声震荡时间、超声功率、料液比、提取溶剂这 4个因素进行 3 水平 4 因素 L9(34)正交试验，所得滤液用 75%乙醇定容至 250mL，在最大吸收波长 226nm处测吸光度，找出穿心莲内酯提取的最佳工艺条件。 表 32 正交试验因子水平表 因素 Factors 水平 A超声震荡 时间 /min B 超声功率 /w C 料液比 /mL D 提取溶剂 1 40 100 1:20 75%乙醇 2 60 120 1:25 乙酸乙酯 3 80 140 1。