高良姜解酒保肝的实验研究毕业论文(编辑修改稿)内容摘要:
高良 姜提取物有较强的抗脂质过氧化作用,其中二苯基庚烷类化合物抗氧化效果显著,对自由基生成的抑制率达 96. 99% [1]。 Lee等 [2]研究发现,高良姜提取液能减轻氧化剂 H202对 V79— 4细胞繁殖的抑制作用,用高良姜提取液 (100ug/ mL)处理过的细胞比未处理过的成活率提高了 48%,并推测高良姜中主要的抗氧化活性物质是黄酮醇类化合物,如山奈素一 4一甲醚、高良姜素以及二芳基庚烷类化合物。 降血糖作用 Akhtar[3]等的研究表明,高良姜提取物具有明显的降血糖作用。 研究人员在正常雄性新西兰家 兔的降血糖实验中,发现口服高良姜粉末 3g/ kg时能明显降低血糖,甲醇提取液和水提取液的降血糖作用更明显,当口服剂量为 4 g/ kg时, 8 h血糖显著降低,推测其降血糖作用可能是通过促进体内胰腺分泌胰岛素而实现的 [4]。 抗促癌作用 Moon[5]等报道高良姜素能有效降低甲基亚硝基脲, (MNU)对小鼠肺细胞染色体的致畸作用,高良姜提取物能抑制 7, 12二甲基苯并蒽引起的小鼠细胞畸变作用,抑制率为 57. 1%。 陈南岳 [6]等 研究了高良姜对蛋白激酶 C ( proteinkinase C, PKC)抑制 剂存在下对鼻咽癌细胞生长的影响。 PKC抑制剂 staurosp0rine(sT)或 sphingosine(SS),能抑制人低分化鼻咽癌细胞 CNE一 2Z的生长,高良姜本身不影响 CNE一 2Z细胞的生长,但明显协同 ss抑制 CNE一 2Z细胞生长,提示高良姜本身可能也参与了改变某些与 PKC激活途径有关的环节 (如钙离子、作用底物、膜脂代谢等。 高良姜的甲醇提取物对 TPA诱发水肿的抑制率为 70%,提取物对 DMBA— TPA二阶段致癌过程有抑制作用。 促进渗透性 沈琦 [7]等研究了高良姜 水煎液 、化合物 (高良姜油 和桉叶素 )对 5一氟尿嘧啶 (5一 Fu)透皮吸收影响,研究结果表明,高良姜 水煎液 有一定的促渗作用,而高良姜油和桉叶素具有极强的促渗作用。 1%和 3%的高良姜油能使 5一 Fu渗透分别提高 108. 26倍, 2%的桉叶素也可提高 67. 54倍。 对消化系统作用 Borrelli[8]等通过小鼠镇痛和家鸽止呕药效指标模型,对高良姜不同化学部位(即水提液、醇提液、挥发油、水提乙酸乙酯萃取物、醇提乙酸乙酯萃取物 )进行了筛选,结果显示各部位均具有镇痛、止呕双重药理作用,而且 水煎液 的活性强于水提物。 陈 佃广州中医药大 学中药学院 2020 届本科毕业论文 6 [9]等研究发现高良姜水提物和 水煎液 对硫酸铜致家鸽呕吐,均能明显延长其呕吐潜伏期和减少呕吐次数, 水煎液 活性强于水提物。 高良姜还具有很好的抗腹泻作用,对于蓖麻油引起的小鼠腹泻,高良姜 水煎液 和水提物都能明显减少其腹泻次数 [9]。 对番泻叶引起的小鼠腹泻,高良姜水提物能明显减少其腹泻次数。 胃肠运动受神经和体液因素共同调节。 其中胆碱能神经对平滑肌运动起重要作用,主要是通过释放乙酰胆碱 (Ach),刺激肠壁和肌问神经丛 M受体,通过细胞膜信号传导系统,使胞内 ca2+ 升高,引起平滑肌收缩。 研究表明,高良姜黄酮类具有明显的 胃肠解痉作用,可抑制 Ach致平滑肌张力升高,因而具有止呕抗腹泻作用 [10]。 抗菌作用 高良姜 水煎液 在 10 mg/ mL和 1 mg/ mL时对白色念珠菌、威克海姆原藻和啤酒酵母都有很强的抑制作用 [12],而且高良姜 水煎液 对晚疫病菌 (phytophthora infestans)能达到 1 00%的抑制。 同时,高良姜 水煎液 具有抑制引起龋齿的链球菌活性的作用 [13]。 与抗生素类药物引起的副作用和抗药性相比,高良姜可能是研究开发新的抗菌药物的理想资源,但目前有关研究较少,并且还仅仅处于对粗提物的研究阶段,为 明确其中的活性成分,有待进一步深入研究。 抗溃疡作用 吴清和 [14]等探讨了高良姜超临界萃取物对应激性胃溃疡模型大鼠溃疡形成及血清表皮生长因子 (EGF)和白介素一 2(IL一 2)的影响。 研究小组以束缚一水浸应激性胃溃疡大鼠为对象,观察了高良姜萃取物对大鼠溃疡指数及血清 EGF和 IL一 2水平的影响。 研究结果表明,高良姜萃取物能降低束缚一水浸应激型溃疡大鼠的溃疡指数,并可使该模型大鼠血清 IL一 2和 EGF水平明显回升接近正常水平。 研究人员认为高良姜萃取物能提高应激大鼠的 TH1免疫应答,增强细胞免疫功能,可能是高良姜抗溃疡机制的一个重要方面。 抗凝血和抗血小板聚集作用 刘应柯 [15]等的研究结果表明,高良姜水提物 100%浓度即有明显抗凝作用, 1 50%浓度可完全抗凝,与 250 ug/ mL肝素抗凝作用相同,明显强于高良姜水提物,其抗凝机理可能与高良姜具有抑制血小板聚集,阻碍凝血活酶的形成等因素有关。 该研究工作的实验还证实,高良姜水提物保护缺血缺氧心肌的 SOD活性,降低 MDA含量的作用与高良姜相似。 高良姜醚提物和水提物能剂量依赖性地预防电刺激颈动脉引起的血栓,药理作用广州中医药大 学中药学院 2020 届本科毕业论文 7 涉及 抗凝血和抗血小板聚集两个方面,可用于预防和阻止休克机体发生弥漫性血管内凝血 (DIC)。 高良姜醚提物和水提物均有抗缺氧作用,机理可能分别为减慢机体耗氧速度和提高机体在缺氧条件下的氧利用能力 [16]。 高良姜的临床用途 高良姜可用于治疗 霍乱吐泻 、 脚气欲吐 、 心脾冷痛(按:即胃痛) 、 养脾温胃,去冷消痰,宽胸下气 、 脾虚寒疟(寒多热少,不思饮食) 、 双目突然红痛 、风牙痛肿。 研究内容 1 实 验材料 药物与试剂 供试品: 高良姜 ( 广州 中医药大学采芝林 ,批号 20200413)。 阳性药: 海王金樽 ( 卫生健 字 ( 2020)第 0396 号 ,批号: 20200921; 深圳市海王健康发展有限公司生产): 联苯双酯滴丸(国药准字 H44023176,批号: 20200907;广州星群股份有限公司生产)。 试剂: GPT 试剂盒 ( 南京建成生物工程研究所 生产 ,批号: 20200429); GOT 试剂盒( 南京建成生物工程研究所 生产,批号: 20200429):考马斯亮兰试剂盒(南京建成生物工程研究所生产 ,批号: 20200429) :二锅头(北京明星酒业有限公司,批号: 20200909)。 实验动物 昆明 小鼠 ,雌雄兼用,体重 1825g,由 广州中医药大学动物实验中心提供。 主要 仪器 与设备 HH6 数显恒温水浴锅 ( 金坛市医疗仪器厂 ) ; 紫外可见光光度器 ( 北京普析通用仪器有限责任公司,型号: T6 新世纪 ) ; EL204 电子分析天平( 梅特勒 托利多仪器(上海)有限公司,型号: JB/T 53741991) ; 电子计重器 ( 中山市金利电子电子衡器有限公司,型号: ACSLT) ; XZC4B 型转棒式疲劳仪(山东省医学科科学院设备站)。 2 实 验方法 与结果 广州中医药大 学中药学院 2020 届本科毕业论文 8 高良姜 水煎液的制备 取高良姜 药材 100g,将其 粉碎成 粗粉 , 用 8—— 12 倍蒸馏水浸泡 ,然后煎煮 1—— ,温度设定为 120 度,过滤,滤渣按同样方法煎煮,合并两次滤液,最后浓缩至 100ml, 并配制成高、中、低剂量组( 、 、 )。 高良姜水煎液对醉酒小鼠 的醉酒潜伏期、 潜伏期、 醉酒率、死亡率的影响; 取 60 只小鼠随机分为 5 组: 高剂量 组、 中剂量 组、 低剂量 组, 阳性对照 组, 模型 组 ( 56 度), 每组 l0 只。 各组小鼠先禁食 12 h, 模型组按照 胃生理盐水;阳性对照组灌胃浓度 , ;高中低 剂量组分别给予提取物 , g/kg, g/kg 灌胃。 30 min 后各组小鼠均灌胃56 度二锅头酒 ,记录小鼠醉酒潜伏期、 持续期, 小鼠 6h 内醉酒率, 24h 内小鼠死亡率。 数据以 一 177。 S 表示,采用 SPSS130 软件作统计学处理结果见表 1 表 1高良姜水煎液对急性酒精中毒的醉酒潜伏期、持续期、醒酒率、死亡率的影响 组别 潜伏期 /min 持续期 /min 醉 酒率 /n(%) 死亡率( 24h) 模型 组 8177。 5 495177。 48 10( 100) 80 阳性药组( 海王金樽组 ) 55177。 20** 215177。 20** 9( 90) 10** 高剂量组 39177。 18** 239177。 61** 8( 90) 20* 中剂量组。高良姜解酒保肝的实验研究毕业论文(编辑修改稿)
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