草果gc-ms指纹图谱研究毕业论文(编辑修改稿)

草果gc-ms指纹图谱研究毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

进行适当的发展，形成了现在各地不同的草果炮制方法，使草果的炮制更具操作性。 不同 炮制方法的草果，其临床疗效 、 药性有所不同，主要表现在化学成分的差异上 [11]。 草果 的炮制方法，自古至今有很多种，论文只列举出典型的五 种， 对 不同 炮制方法的草果的指纹图谱 和 化学成分进行研究。 红河学院本科毕业论文（设计） 3 表 11 草 果的炮制方法 实验的 分析方法 相似度 分析 在中药指纹图谱研究中 ，如何运用指纹图谱所提供的信息是一个非常重要的环节。 现在常用的方法是通过评价中药指纹图谱之间的相似度来判断中药的质量是否稳定合格。 以相似度判断中药的质量，关键在于中药中各成分含量发生变化计算的相似度结果是否发生相应的改变。 中药指纹图谱是表征中药复杂成分与其质量关系的重要手段。 在表征过程中，相似度评价起着关键作用。 目前常用的相似度评价方法主要有峰重叠率法（ Nei 系数法），相关系数法，距离系数法，向量夹角余弦法与峰重叠率和共有峰强度结合法（改进的 Nei 系数法）。 论文文采用“ 中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2020A 版 ”软件对其指纹图谱进行相似度计算，了解各 样品之间的差异和变化规律 [17]。 聚类分析 聚类分析可以将一组数据按照本身的内在规律较合理地分为几类， 通过比较各事物之间的性质，将性质相近的归为一类，性质差别较大的归入不同类，缩小主观判断所造成的误差，具有较好的科学性和客观性 [18]。 它适用于事先并不知道对象类别的面貌，甚至连共有几个类别也不能确定的情况，符合中医认识疾病的思维方法，故目前，聚类分析在中医药研究中被逐步采用，是中医药客观化、炮制 方法 文献 记载 文献 出处 净制 除去外壳，搓散，筛去膜质的假种皮 [12]。 《四川省中药饮片炮制规范》 炒制 取原药材放入锅内，用文火炒至外表黑褐，发泡，有香气时取出， 放冷，筛去灰屑，用时捣碎 [13]。 《云南省中药咀片炮制规范》 盐制 取草果，除去硬壳后，将仁搓散，放入锅中， 用文火加热，炒香后，喷放盐水，继续炒干， 取出，晾凉。 每草果 100Kg，用食盐 2Kg[14]。 《贵州中药饮片炮制规范》 姜制 取净草果仁，加姜汁拌匀，置锅内用文火炒干，取出，晾干。 用时捣碎。 每草果仁 100Kg，用生姜 10Kg或干姜 3Kg[15]。 《中华人民共和国药典》 2020 年版 醋制 醋煮 [16] 《嵩崖尊生全书》 1 引 言 4 标准化研究中的一种新的思路。 论文采用 软件 对指纹图谱进行聚类分析， 了解样品之间的差异和成分的变化规律。 主成分 分析 主成份分析是一种常用的多元统计方法，它在社会经济、企业管理及地质、生化、医药等各个领域中都有着广泛的应用，如服装行业的服装定型、企业的经济效益分析、新开发项目目标的制订等问题 [19]。 主成份分析的目标 ,就是要对多变量的高维系统进行最佳简化。 也就是说，要在力保数据信息丢失最少的原则下，对高维变量空间进行降维处理。 论文采用 软件对指纹图谱进行主成分分析，了解 样品的 综合性、深层次特征。 论文研究的现状 草果 的 研究 进展 目前，研究者 对草果的研究主要集中在 基源植物、栽培技术研究、生药材鉴定（性状鉴定、显微鉴定、中药化学鉴定、 GCMS 指纹图谱鉴别、气相定量测定 ） 、中药化学成分、炮制的研究、药理作用 (镇痛、抗胃溃疡、抗乙肝病毒 )、临床用药（治疗乙型肝炎、治疗牛瘤胃鼓气、治疗腹部手术后腹胀）、生理功能研究等 方面 [20]。 目前 ， 对草果 GCMS 指纹图谱研究，如吴惠勤等采用 PR 混合溶剂超声提取中药材草果的挥发油，运用 GC MS 分析其化学成分及相对含量 ， 建立草果挥发油的 GCMS 指纹图谱，化学成分相对含 量较高，各组分间比例基本保持恒定，可作为草果的特征成分，为鉴别中药草果真实性及评价其质量的指标提供依据[3]；丁艳霞等采用 GCMS 方法建立草果挥发油指纹图谱，探讨 GCMS 联用技术在草果挥发油质量控制方面应用的可行性，不同产地草果油的指纹图谱中各成分均得到了较好的分离，具有特征性和唯一性 ， 作为草果油质量的控制方法 [21]。 在 HSGCMS 优化 条件下， 通过 质谱（ MS）对草果不同部位（ 果 、壳、仁、茎、叶、芽） 挥发性 成分进行测定 ，采用峰面积归一法计算各组分的相对含量，同时建立草果不同部位（果、壳、仁、茎 、叶、芽）、不同产地 （红河 、楚雄、丽江、大理、玉溪、文山）、不同炮制方法（ 炒制 、盐制、 姜制 、净制、醋制）的 挥发性 GCMS 指纹图谱 ，采用“ 中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2020A 版 ”软件对指纹图谱进行相似度计算，采用 SPSS 软件对指纹图谱进行聚类分析、主成分分析 的 文章未见报道。 红河学院本科毕业论文（设计） 5 中药指纹图谱 的 研究 进展 我国中药指纹图谱研究最早可以追踪到 60 年代，目前国内中药指纹图谱的研究还处在初级阶段，但近年来成为中药质量控制的研究热点之一。 国内众多的研究人员正在尝试运用各种方法构建中药指纹图谱应用 于中药材和中成药的质量控制，以寻求一种可行的中药指纹图谱控制质量的法定标准。 由于中药注射液的特殊性，我国决定先采用中药指纹图谱控制中药中注射剂的质量。 由于中药注射液的特殊性，我国决定先采用中药指纹图谱控制中药中注射剂的质量。 国家药品监督管理局要求中药注射剂应固定药材产地，建立药材和制剂的指纹图谱标准”，并颁发了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》（暂行）等相应的指导原则。 我国对中药指纹图谱的研究目前主要为使用各处方法建立中药材及制剂的指纹图谱以及对相应信息进行数字化处理，使其能评价和控制中药材及制剂的质量。 国外对于指纹图谱的研究较国内已达到了较高阶段。 国外有关指纹图谱的报道无一例外地将指纹图谱作为鉴别项，评价草药的真实性以及产品质量的一致性，韩国、日本、德国等，都比较重视对植物药的开发和利用德国用指纹图谱技术控制银杏制剂的质量，在国际上具有很强的竞争力。 美国 FD A 已开始接受指纹图谱，在递交新药成分控制资料时，植物物质和植物产品的质量控制部分的鉴别项应包括指纹图谱。 WTO 在中草药指南中同样对植物制品和最终产品如果有效成分不能鉴别，可提供特征成分或混合成分的指纹图谱鉴别以保证产品质理的一致性。 英国、印度以及 WTO 等药品管理机构，也都采用指纹图谱技术对植物药、草药质量进行评价 [22]。 目前，国外开展的植物制剂指纹图谱研究 , 主要还是针对单味药材提取物而言，在植物制剂的整体性作用和药效相关性方面研究很少。 论文研究的内容 及 意义 论文 以金平县草果为参考样 品 ， 对草果的 GCMS 条件（ 分流比、柱流量、色谱柱 ） 进行优化， 对 静态顶空 （ HS） 进样 条件 （ 超声 提取顶空进样和干粉顶空进样的振荡温度、振荡时间）进行优化，对不同的提取进样方式（ 超声 提取直接进样、超声提取顶空进样、干粉顶空进样） 进行 优化， 在优化 条件下， 通过 质谱 （ MS）对草果不同部位（ 果 、壳、仁、茎、叶、芽） 挥发性 成分进行测定 ，采用峰面积归一法计算各组分的相对含量， 同时建立草果不同部位（果、壳、仁、1 引 言 6 茎、叶、芽）、不同产地 （红河 、楚雄、丽江、大理、玉溪、文山）、不同炮制方法（ 炒制 、盐制、 姜制 、净制、醋制）的 挥发性 GCMS 指纹图谱 ，采用“ 中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2020A 版 ”软件 [23]对指纹图谱进行相似度计算，采用 SPSS 软件对指纹图谱进行聚类分析、主成分分析， 为草果的 快速 鉴别、品质的评价 、 质量的控制 、 生产工艺 提供 参考。 红河学院本科毕业论文（设计） 7 2 实验部分 材料、试剂及仪器 主要材料 草果 的不同部位（壳、仁 、果 、茎、叶、芽） 来自 红河州金平县，不同产地的草果分别 来自 红河、楚雄、丽江、大理、玉溪、文山， 红河 的草果来自金平县草果种植户。 表 21 草果样品 的 产地、不同 部位的 颜色 产地 部位 颜色 外观 形状 平均质量（ g） 红河 壳 棕黑色 圆形 仁 黄色 茎 绿色 叶 绿色 芽 红色 楚雄 壳 棕 黄 色、 棕黑色 椭圆形 、圆形 仁 棕红 色 丽江 壳 棕黑 色 椭圆形 仁 棕黄 色 大理 壳 棕黄色 椭圆形 仁 棕红色 玉溪 壳 棕黑色、 棕黄色 椭圆形 、圆形 仁 淡黄色 文山 壳 棕黄 色 椭圆形 仁 棕红色 2 实验部分 8 主要仪器及试剂 表 22 主要 仪器及试剂 仪器 与试剂 型号 与规格 生产 厂家 气相色谱 质谱联用仪（ 配有AOC5000 自动 进样器） GCMSQP 2020 日本岛津公司 超声波清洗器 SK5200HP 上海 科导超声仪器有限公司 高速 万能粉碎机 DFY400 温岭市 林大机械有限公司 电子天平 CP224C 奥豪斯仪器（上海）有限公司 电热 鼓风干燥箱 DHG9070A 上海 恒科学 仪器有限公司 电子 万用 炉 220V， 1kW 浙江省 上虞市通州实验仪器厂 直接 进样针 10uL 日本 岛津公司 静 态顶空进样 针 10uL 美国安捷伦 公司 中药 筛 100 目 温岭市 林大机械有限公司 直接 进样瓶 2mL 北京欣 惠泽奥科技有限公司 静态顶空进样瓶 20mL 广州 市鸿州实验器材科技有限公司 漏斗 直径： 90mm 深圳市鼎鑫宜实验设备有限公司 化学分析滤纸 直径 ： 15cm 上海 敬 智过滤 材料有限公司 色谱柱： Rtx5MS 30m 美国 Restek 公司 色谱柱： DB1701 30m 美国 安捷伦公司 色谱柱： HPFFAP 30m 美国 安捷伦公司 移液管 10mL 深圳 玻璃仪器公司 具 塞三角烧瓶 50mL 深圳 玻璃仪器公司 烧杯 50mL、 100mL 深圳 玻璃仪器公司 自封袋 12 17cm 台州市冠 龙塑业有限公司 正己烷 AR 天津市风船化学试剂科技有限公司 丙酮 AR 重庆 川东化工有限公司 生姜 食醋 糯米 白醋 加 加食品集团股份有限公司 食盐 白象牌 云南 盐 化 股份有限公司 红河学院本科毕业论文（设计） 9 实验 、 仪器条件 表 23 实验 、 仪器条件 超声 条件 超声 时间 30min 料液比 1:15 提取溶剂 正己烷 超声功率 200W GC 条件 柱箱温度 80℃ 进样口温度 220℃ 分流比 20:1 柱流量 总流量 ml/min 吹扫流量 载气 He（纯度≥ %，压力 ： 177。 ，吴江梅塞尔工业气体有限公司 ） 气相毛细管色谱柱 HPFFAP（ 30m ） 程序升温 初始 温度 80℃ ，保持 3min， 以 6℃ /min 速度升至 180℃ ，保持 2min 总运行时间 MS 条件 离子源温度 200℃ 接口温度 220℃ 检测器电压 溶剂延迟时间 2min m/z 351000 直接 进样 条件 Cycle（ 循环） GCInj Syringe（ 针体积 ） 10uL Sample Volume（进样 体积 ） Air Volume（ 空气体积） 0nL Pre cln slv1（ 进样前清洗 溶剂 1） 2 2 实验部分 10 续表 23 直接 进样 条件 Pre cln slv2（ 进样前 清洗 溶剂 2） 2 Pre cln spl（ 进样前清洗 样品） 2 Fill Volume（ 排气体积） Fill Speed（ 针杆速度） 5uL/s Fill Stokes（ 拉杆次数） 5 Pullup Del（ 补偿时间） 300ms Inject to（进样 口 ） GCInj1（ 进样口 1） Inject Speed（ 进样速度） 50uL/s Pre Inj Del（ 进样前补偿时间） 500ms Pst Inj Del（ 进样后补偿时间） 500ms Pst Cln。