流行性感冒病毒vero细胞繁殖研究毕业论文(编辑修改稿)

流行性感冒病毒vero细胞繁殖研究毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

DHank’s 液 主要仪器 台式离心机 (centrifuge 5415P,eppendorf) 倒置显微镜 (olympus) 细胞操净台 (苏州净化 ) 二氧化碳培养箱 (Thermoforma) 恒温培养箱 (上海实验仪器厂有限公司 ) 恒 温水浴箱 微量移液器 低温冰柜 超低温冰柜 家用冰箱 刻度吸管 血凝板 加液槽 漩涡振荡器 细胞培养瓶 方法 选择生长良好的单层 Vero 细胞，分组、编号后，弃旧培养液，用 DHank’s液 洗涤细胞面三遍，控净液体，按组接种含 1μ g/ml、 5μ g/ml、 10μ g/ml 的胰酶的流感毒病 液，置 34℃177。 1℃吸附适宜时间后，补加维持液，置 34℃177。 1℃培养3 天，收获细胞培养物，检测其血凝效价。 结果见表 1。 表 1 流感病毒不同胰酶浓度的研究结果 胰蛋白酶浓度 不同 (亚 )型流感病毒 H1N1 H3N2 B 1μg/ml 1:12 1:8 1:2 5μg/ml 1:64 1:128 1:64 10μg/ml 1:4 1:32 1:32 结果 由表 1 可见，当 胰酶浓度为 5μ g/m 时，流感病毒在 Vero 细胞 内的效价最高。 流感病毒最佳感染量的研究 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020。 细胞 Vero 细胞。 其他 MEM 培养基 、 小牛血清 、 胰蛋白酶 、 新霉素 、 谷氨酰胺 、 生理盐水 DHank’s 液 主要仪器 台式离心机 (centrifuge 5415P,eppendorf) 倒置显微镜 (olympus) 细胞操净台 (苏州净化 ) 二氧化碳培养箱 (Thermoforma) 恒温培养箱 (上海实验仪器厂有限公司 ) 恒温水浴箱 微量移液器 低温冰柜 超低温冰柜 家用冰箱 刻度吸管 血凝板 加液槽 漩涡振荡器 细胞培养瓶 方法 选择生长良好的单层 Ve ro 细胞，按试验分组进行编号后，弃旧培养液，用DHank’s 液 洗涤细胞面，控净液体，按组接种经 1:100、 1:1000、 1:10000 稀释的流感毒种， 34℃177。 1℃吸附适宜时间后，补加维持液，置 34℃177。 1℃培养 3 天，收获细胞培养物检测其血凝效价。 结果见表 2。 表 2 流感病毒的接种量研究方法及结果 8 毒种稀释度 不同 (亚 )型流感病毒 H1N1 H3N2 B 1:100 1:8 1:32 1:16 1:1000 1:32 1:12 1:64 1:10000 1:16 1:64 1:32 结果 由表 2 可见，将流感病毒按 1:1000 稀释后接种单层 Vero 细胞，可获取最高的血凝效价。 研究 材料 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020。 细胞 Vero 细胞。 其他 MEM 培养基 、 小牛血清 、 胰蛋白酶 、 新霉素 、 谷氨酰胺 、 生理盐水 DHank’s 液 主要仪器 台式离心机 (centrifuge 5415P,eppendorf) 倒置显微镜 (olympus) 细胞操净台 (苏州净化 ) 二氧化碳培养箱 (Thermoforma) 恒温培养箱 (上海实验仪器厂有限公司 ) 恒温水浴箱 微量移液器 低温冰柜 超低温冰柜 家 用冰箱 刻度吸管 血凝板 加液槽 漩涡振荡器 细胞培养瓶 方法 取流感毒种，按一定比例稀释后接种 Vero 细胞，置 34℃177。 1℃培养不同时间，每天抽样后进行检测。 结果见表 3。 表 3 不同收获时间的流感病毒试验研究结果 培养时间 不同 (亚 )型流感病毒 H1N1 H3N2 B 1 1:4 1:2 — 2 1:96 1:64 1:48 3 1:160 1:128 1:64 4 1:160 1:128 1:96 5 1:160 1:128 1:96 6 1:160 1:128 1:96 7 1:128 1:128 1:96 结果 由表 3 可以看出，甲 1，甲 3 病毒置 34℃177。 1℃培养 3 天、 B 型病毒培养 4 天时流感病毒血凝效价达到最高。 材料 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020 Vero 细胞。 其他 MEM 培养基 、 小牛血清 、 胰蛋白酶 、 新霉素 、 谷氨酰胺 、 生理盐水 、 DHank’s液 主要仪器 台式离心机 (centrifuge 5415P,eppendorf) 倒置显微镜 (olympus) 细胞操净台 (苏州净化 ) 二氧化碳培养箱 (Thermoforma) 恒温培养箱 (上海实验仪器厂有限公司 ) 恒温水浴箱 微量移液器 低温冰柜 对 流感病毒 的 影响 材料 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020。 细胞 Vero 细胞。 其他 MEM 培养基 、 小牛血清 、 胰蛋白酶 、 新霉素 、 谷氨酰胺 、 生理盐水 、 DHank’s液 主要仪器 台式离心机 (centrifuge 5415P,eppendorf) 倒置显微镜 (olympus) 细胞操净台 (苏州净化 ) 二氧化碳培养箱 (Thermoforma) 恒温培养箱 (上海 实验仪器厂有限公司 ) 恒温水浴箱 微量移液器 低温冰柜 超低温冰柜 家用冰箱 刻度吸管 血凝板 加液槽 漩涡振荡器 细胞培养瓶 方法 取流感毒种，按一定比例稀释后接种 Vero 细胞，置 30℃、 34℃、 37℃不同温度培养，三天后收获培养液，用直接血凝法测定其血凝效价，详见表 4. 表 4 不同温度培养流感病毒的试验研究结果 不同（亚）型流感病毒 培养温度 37℃ 34℃ 30℃ H1N1 1:96 1:128 1:16 H3N2 1:48 1:96 1:8 B 1:32 1:80 1:8 结果 由表 4 可见， 34℃是流感病毒于 Vero 细胞内繁殖 的最佳温度。 第三 章 流感病毒在 Vero细胞细胞内的遗传稳定 性 研究 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020。 细胞 Vero 细胞。 其他 MEM 培养基 、 小牛血清 、 胰蛋白酶 、 新霉素 、 谷。