降解丙烯酰胺菌的筛选及应用_本科毕业论文(编辑修改稿)

降解丙烯酰胺菌的筛选及应用_本科毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

Measure the degradation performance of strains, get a strain which has better degradation performance, Finally, physiological and biochemical preliminary identified as saprophytic staphylococcus. The optimal primary degradation conditions on mixed of the strain were as follows: optimal growth temperature is 33 ℃ , optimum pH , 2%amount of inoculation, 12h of best degradation time， CODcr degradation rate is 66%， the removal rate of AM is %. Key words: acrylamide, degrade, strains, screening, identification 3 1 前言 丙烯酰胺的应用 丙烯酰胺 (Acrylamide，简称 AM)是一种无气味的白色晶体，在工业上主要用于合成聚丙烯酰胺 (PAM)。 PAM 由于具有特殊的物理化学性质，因而广泛应用于石油开采、污水处理、造纸、矿产、医药、农业、纺织等行业，享有“百业助剂”之称。 丙烯酰胺具有神经毒性，可损伤周围神经系统和中枢神经系统，常人每天允许的最大暴露量不超过 [1]。 化工 医药行业的废水中常含有丙烯酰胺，对环境造成污染，危害人类健康。 利用微生物的生命活动对废水中的污染物进行处理是目前最重要，最有发展前途，也是最常用的废水处理方法 [2]。 丙烯酰胺菌的危害 急性毒性 ： 急性毒性试验结果表明，大鼠、小鼠、豚鼠和兔的丙烯酰胺经口 LD50为 150180 mg/kg，属中等毒性物质。 神经毒性和生殖发育毒性 ： 大量的动物试验研究表明丙烯酰胺主要引起神经毒性；此外，为生殖、发育毒性。 神经毒性作用主要为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变；生殖毒性作用 表现为雄性大鼠精子数目和活力下降及形态改变和生育能力下降。 大鼠 90 天喂养试验，以神经系统形态改变为终点，最大未观察到有害作用的剂量（ NOAEL）为 mg/kg 天。 大鼠生殖和发育毒性试验的 NOAEL 为 2 mg/kg 天。 遗传毒性 ： 丙烯酰胺在体内和体外试验均表现有致突变作用，可引起哺乳动物体细胞和生殖细胞的基因突变和染色体异常，如微核形成、姐妹染色单体交换、多倍体、非整倍体和其他有丝分裂异常等，显性致死试验阳性。 并证明丙烯酰胺的代谢产物环氧丙酰胺是其主要致突变活性物质。 致癌性 ： 动物试验研究发现，丙烯 酰胺可致大鼠多种器官肿瘤，包括乳腺、甲状腺、睾丸、肾上腺、中枢神经、口腔、子宫、脑下垂体等。 国际癌症研究机构（ IARC）1994 年对其致癌性进行了评价，将丙烯酰胺列为 2 类致癌物（ 2A）即人类可能致癌物，其主要依据为丙烯酰胺在动物和人体均可代谢转化为其致癌活性代谢产物环氧丙酰胺。 由于煎炸食品是我国居民主要的食物，为减少丙烯酰胺对健康的危害，我国应 4 加强膳食中丙烯酰胺的监测与控制，开展我国人群丙烯酰胺的暴露评估，并研究减少加工食品中丙烯酰胺形成的可能方法。 对于广大消费者，专家建议： 尽量避免过度烹饪食品（如 温度过高或加热时间太长），但应保证做熟，以确保杀灭食品中的微生物，避免导致食源性疾病。 2 提倡平衡膳食，减少油炸和高脂肪食品的摄入，多吃水果和蔬菜。 建议食品生产加工企业，改进食品加工工艺和条件，研究减少食品中丙烯酰胺的可能途径，探讨优化我国工业生产、家庭食品制作中食品配料、加工烹饪条件，探索降低乃至可能消除食品中丙烯酰胺的方法。 降解丙烯酰胺菌的研究意义 丙烯酰胺既是化学试剂也是一种重要的工业原料，可以用它来聚合一种新型有机高分子絮凝剂，用于可产生较少污泥的污水处理中，但在丙烯酰胺的共聚物产 品中，由于反应率不是 100%,有少量的丙烯酰胺的单体（原料）残存在产品中，在制造应用丙烯酰胺聚合体的工业中，都会排出含有丙烯酰胺单体的废水，丙烯酰胺单体难于分解，且具有毒性，为避免环境污染，就需要寻找去除丙烯酰胺单体的方法。 目前，降解有机污染物的处理技术中，应用具有特殊分解能力的微生物的投菌法具有广阔的前景。 本研究就是从从自然界中分离筛选降解丙烯酰胺的微生物菌种，并达到了试验预期的目标。 2. 材料与仪器 菌种来源 从江西昌九农科化工有限公司厌氧池废水中筛选分离得到能够降解丙烯酰胺单体的菌株 主要药品和试剂 实验中使用 的药品和 试剂如表 1 表 1 使用试剂名称，规格及厂家 Table 1 Chemical reagents consumed in experiment 5 名称 规格 生产厂家 磷酸氢二钾 分析纯 成都市科龙化工试剂厂 浓氨水 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心 氯化铵 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心 硝酸银 分析纯 天津市福晨化学试剂厂 硫酸亚铁 分析纯 天津市福晨化学试剂厂 氯化钠 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心 重铬酸钾 分析纯 广东西陇化工厂 硫酸亚铁铵 分 析纯 天津市永大化学试剂开发中心 盐酸 分析纯 南昌鑫光精细化工有限公司 浓硫酸 分析纯 南昌鑫光精细化工有限公司 蛋白胨 生化试剂 北京奥博星技术有限责任公司 肌酸 生化试剂 上海蓝季科技发展有限公司 甲基红 生化试剂 上海蓝季科技发展有限公司 琼脂粉 生化试剂 上海蓝季科技发展有限公司 牛肉膏 生化试剂 北京奥博星技术有限责任公司 营养琼脂粉 生化试剂 上海蓝季科技发展有限公司 氢氧化钠 分析纯 天津市恒兴化学试剂制造有限公司 葡萄糖 分析纯 成都市科龙化工试剂厂 无水乙醇 分析纯 天津市福晨化学试剂厂 实验仪器 实验中所使用的仪器如表 2 表 2 使用仪器名称，规格及厂家 Table 2 Equipments used in experiment 名称 规格型号 生产厂家 隔水式电热恒温培养箱 GSM350BSⅡ 上海新苗医疗器械制造有限公司 电热恒温鼓风干燥箱 PHG9240A 上海精密实验设备有限公司 电子天平 MP502B 上海精科天平 分析天平 JA5003N 上海精密科学仪器有限公司 不锈钢手提式灭菌锅 DSX280A 上海申实医疗器械厂 全自动 高压灭菌锅 HVE50 日本 洁净工作台 SWCJIF 苏州安泰空气技术有限公司 6 可见分光光度计 WFJ7200 型 龙尼柯（上海）仪器有限公司 pH 酸度计 pHS25 型 上海雷磁仪器厂 恒温培养摇床 HWY100B 上海智城分析仪器制造有限公司 冰箱 BCD216YH 海尔冰箱 培养基 选择性培养基 表 3 培养基的配制 Table 3 Medium pound 葡萄糖 10g/l CaCl2 K2HPO4 FeCl3 g/l MgSO4 NaCl g/l 丙烯酰胺 PH 控制在 葡萄糖氧化发酵培养基 表 4 培养基的配制 Table 4 Medium pound 蛋白胨 10 g/l NaCl 5 g/l K2HPO4 g/l 葡萄糖 10 g/l 琼脂 6 g/l 1%溴甲酚紫 3ml 蒸馏水 1000ml 用氢氧化钠调 ，分装试管， 115℃蒸汽灭菌 20min。 7 甲基红试验和 VP 试验培养基 表 5 培养基 的配制 Table 5 Medium pound 蛋白胨 5 g/l 葡萄糖 5 g/l NaCl 5 g/l 蒸馏水 1000ml 调 ， 115℃灭菌 30min。 降解丙烯酰胺菌筛选流程 菌株的富集 实验样品采自江西昌九农科化工有限公司厌氧池带污泥废水，将所采集的带污泥废水 1ml 接入 50ml 已灭菌的富集液体培养基中，在 30℃旋转式摇床（转速 150r/min ）培养。