野生三叶青驯化栽培、种质筛选及开发利用项目可行性研究报告(编辑修改稿)

野生三叶青驯化栽培、种质筛选及开发利用项目可行性研究报告(编辑修改稿)内容摘要：

态栽培技术：不使用化学合成的肥料、农药、生长调节剂、添加剂、色素等，也不采用基因工程和离子辐射技术，而是遵循三叶青的自然生长规律，培肥、除草、防治病虫害、采收和初加工，形成三叶青药材及其产物安全生产体系。 （二）应用和产业 化前景 目前三叶青高效栽培技术已经成为三叶青产业可持续发展的最大障碍，通过本项目的研究，获取三叶青优质种质利用技术、三叶青快速繁殖技术、三叶青容器栽培技术及三叶青套种生态栽培技术，使三叶青产业化生产成为可能，从而满足市场对三叶青的需求，同时可减少对其野生资源和环境的破坏，并且可获得可观的经济效益，因而具有广泛的应用前景。 （三）预期获取自主知识产权 获取自主知识产权的三叶青繁殖和栽培技术方面专利1 项； 在核心期刊发表论文 3 篇以上。 五、项目现有技术基础和条件 （一）现有工作基础 项目组对三叶青开展了 大量前期研究工作，近四年来已对三叶青种质筛选及高效栽培方面进行前期研究，通过物候观察，包括萌芽期、生长期、开花期、结果期以及块根发育期等；植物学特性观察，包括芽、叶、花、块根习性等；抗性、耐贮性等。 此外，还开展了田间栽培试验，如培养土配制试验，间套种试验及育苗技术等。 通过观察和试验，初步明确了三叶青能在山地不同海拔高度驯化栽培，而且随着海拔的提高，夏季凉爽而春季回暖迟，有利于三叶青种块根发育，田间生 育期明显延长，为争取培育大块根创造了有利条件；也明确了三叶青培育需要较大的荫蔽度，需在荫棚内栽培或与乔木木混 作，适合套种和间混种。 （二）研究支撑条件 研究队伍 课题组成员共有 6 人，其中高级职称有 3 人，中级职称 3人（专职试验员 1 人），对三叶青的种质采集与鉴定、影响三叶青生长与块根发育的试验、组织扩繁及相关栽培实验都能自行完成。 项目组成员 表 姓 名 其他信息 任全进 职务（职称） 讲师 出生年月 19690613 从事专业 园艺 工作单位 杭州鸿越生态农业科技有限公 司 在本项目中的分工 引种驯化与品种筛选、生产管理 夏更寿 职 务（职称） 高级工程师 出生年月 19660516 从事专业 园艺 工作单位 杭州鸿越生态农业生态有限公 司 在本项目中的分工 生态栽培研究、田间试验 何国强 职务（职称） 总经理 出生年月 19750618 从事专业 园艺 工作单位 杭州鸿越生态农业科技有限公 司 在本项目中的分工 示范基地建设、产品试验示范 朱岩 职务（职称） 教授 出生年月 19620620 从事专业 化学分析 工作单位 浙江大学 在本项目中的分工 化学检验与品质评价 徐明仙 职务（职称） 副教授 出生年月 19660316 从事专业 环境分析 工作单位 杭州职业技术学院 在本项目中的分工 生物产品试验、水土环境分析 研究实验条件 本单位具有以下实验设备： 拥有面积达 5000m2栽培实验基地。 植物生理实验室和组培实验室各一个。 生物倒置显微镜 XD101 一台。 人工气候箱 SPX250LC 三台。 垂直超净工作台 SWCT2FD 四台。 立方式高压灭菌锅 LDZX401 二台。 电子精密天平 BS110S 二台。 冰箱 205L 三台。 生化 培养箱 SPX2501 二台。 普通显微镜五十台。 调温调湿箱 DR302 二台。 培养皿、锥形瓶等玻璃器皿若干。 本单位具有以下试验条件： 公司始 2020 年，前后总投资 300 余万元，进行基地建设，其中按 GMP 要求建设 20 亩的三叶青生产专用基地，搭建钢架大棚 60 个，连栋大棚 8000 平方米，基地水、电、路配套。 20 亩三叶青基地大棚全部安装地喷、雾喷、肥、水管网，进行人工智能控制。 公司建有 500 平方米的组培工厂一座，按年生产能力 80 万瓶设计，目前年生产组培苗 20 万瓶左右。 公司已形成一个以三叶青为重点，其他中药材种植为辅的特色农业生产基地和中草药生产的科技型企业。 另外，合作单位的分析测试中心具有许多现代化的仪器设备，能在实验室和栽培基地完成所需的各项研究。 六、实施方案（包括技术路线、进度安排） 通过严谨、先进的实验手段和方法，获得可靠的实验数据，筛选出三叶青无菌培养的最佳培养基和环境条件；运用生态栽培技术手段进行三叶青高效栽培，探讨三叶青快速繁殖与生态栽培的环境条件和栽培基质；建立三叶青安全生产及品质保证的技术体系。 本项目以三叶青种质筛选、快速繁殖、生态栽培及活性成分分析为主线，按以下技术路线进行研究。 课题研究采用产学研结合，实施课题制管理，在课题责任人负责的基础上，分“课题 子课题”两级管理，由课题责任人负责签订课题分级合同，并报归口部门备案。 子课题由课题组成员分工研究。 课题分解： 三叶青种质资源收集与优质种质筛选； 三叶青扩繁与容器栽培关键技术； 三叶青复种高效生态栽培关键技术及不同栽培条件下活性成分分析。 六、计划进度安排 本项目按照生产要求设计生产工艺，实行规范化操作，严格，按照科学选种、科学培育、科学用药、科学管理等工艺技术方案，确保项目提供的三叶青品种好、质量高、 效益三叶青种质收集 种质筛选并鉴定 三叶青快速育苗技术研究 三叶青高效复种技术研究 三叶青生态栽培模式 三叶青安全高效栽培体系与示范 总结及推广应用 三叶青活性成分分析与对比 好。 — 进行优良种质选育。 开展种源与无性系选择，并筛选可大力推广的高品质优良三叶青种苗。 项目采用野生种子，筛选原原种，采集种子和外植体进行人工仿野生条件下驯化栽培。 采集种子或外植体进行组织培养，筛选用 2— 3 个培养基进行。 观察后选定最佳培养基进行愈伤组织培养、扩繁。 中药材 GAP 种植准备：选择周围无污染源土地，进行大气、水质、土壤的检测，达到环保标准。 （浙江省无公害蔬菜标准） 设计实施三叶青生态种植模式。 — 进行脱离净化 条件下的自然光炼苗。 开展三叶青种植方法和肥水管理的研究。 人工栽培三叶青与野生三叶青活性成分分析研究，确定优质三叶青生产和质量控制指标。 — 进行大田栽培，培育管理。 开展三叶青培养土配比、适应的有机肥料和病虫害防治的研究。 利用优质三叶青质控指标，于花前、花期和花后等分 别测定质量变化，使采收更合理。 三叶青生态栽培光温湿度控制研究，确保三叶青最适生长环境。 喷滴灌系统设施安装，保证供水及时、安全、节能。 测土配方施肥。 通过设计理想的配 方肥 (包括专用复合肥、系列专用复合肥 )，实现养分的平衡。 进行重金属、农药残留量与微生物检测。 三叶青优质品系栽培生理与光合生理研究，三叶青高产优质栽培技术体系研究。 项目验收，课题总结。 七、项目预算（包括经费来源及用途） 项目经费预算如下：杭州市科技局经费 20 万元，经费主要用于购买试验材料、试验外协、资料印刷、会议、调研、人员劳务、管理等。 附表： 市级科技计划项目经费概算表 项目名称： 金额单位： 万元 序 号 概算科目名称 合计 市财政拨款 经费 地方部门配套经费 自筹经费 （ 1） （ 2） （ 3） （ 4） （ 5） 1 一、经费支出（合计） 20 20 2 设备费 0 3 （ 1）购置设备费 4 （ 2）试制设备费 5 （ 3）设备租赁费 6 材料费 7 测试化验加工费 8 燃料动力费 9 差旅费 10 会议费 11 合作、协作研究与交流费 12 出版 /文献 /信息传播 /知识产权事务费 13 人员劳务费 14 专家咨询费 15 1管理费 16 1其他开支 1 二、经费来源（合计） 20 2 申请市财政经费 20 3 地方、部门配套拨款 4 自筹经费 5 （ 1）单位自有货币资金 6 （ 2）其他资金 八、申请单位概况 项目主持单位 是一家集科研、生产、销售、技术服务 于一体的规模化专业型 农业科技企业。 公司组建有一批技术力量雄厚，管理科学，人才精锐的活力团队，公司把握 现代农业 产业发展方向，加快科技成果产业化进程， 努力使 产品技术处于同行前列。 近年 来公司一直致力于 药赏兼用植物资源 及其系列产品的研制与开发工作，并应用现代生物工程技术对 三叶青、白背三七等植物 进行驯化和培植 ，逐步 形成产业化规模。 公司已建立了 药赏兼用植物 标准化种植基地，全面开展从育种、人工繁育、仿野生有机栽培、肥料比对、现代炮制工艺等一系列研究，在种子收集、精心育种、克隆组培，到生态有机栽培、性状鉴定、显微鉴定，再到产品研发、质量控制 、有效成分检测等各个方面都取得了突破性的成果，实现 公司 产品培育种植的科学化、标准化、产业化 ，年销售额在 300万以上。 项目合作单位之一 是 全国优秀高等职业技术学院， 是集产学研一体化，为地方经济社会发展提供科技支撑和人才的场所。 近几年来 ,该学院积极承担地方多家企业、科研所等的技术服务、技术指导工作。 拥有 实验实训室 95 个，实训中心 7个，校内生产性实训基地、校外实训基地 100 多个，教学仪器设备 2870 多万元 ；实验室拥有完成本项目研究所需的大型仪器，如 高效液相色谱 仪 、 气 相色谱 仪 、原子吸收分光光度 计、荧光分光光度计 、冷冻高速离心机等 一批先进 检测设备 设施。 项目合作单位之二 是本省的一所省部共建综合性大学，其与本课题相关的条件基础包括：建有浙江省新药创制科技服务平台、浙江省制药科技创新基地（即浙江省重中之重学科－总建设经费 4000万）、国家中药现代化科技产业（浙江）基地－现代中药制剂研究中心、拥有浙江省制药工程重点实验室、制药工程省部共建教育部重点实验室、国家绿色化学重点实验室培育基地（药物绿色合成方向）等良好的学科及科研平台。 拥有“制药工程”、“生物化工”和“环境工程”等 3 个浙江省“重中之重”学科，拥有“生物化工” 、“药物化学”等 3 个博士点。 目前已投入建设经费 2020 万元，现有实验用房 1300 多平方。 拥有系列先进的仪器设备，如傅立叶变换红外光谱仪、液 质联用仪、 400 兆核磁共振仪、高效液相色谱仪、气相色谱仪、旋光光度仪、紫外分光光度计、数字式熔点仪等；拥有较完备的用于中药分离制备和衍生化研究的各种仪器材料，并拥有了各型常规制备色谱、中压制备色谱、各型葡聚糖凝胶色谱（ DEAE、 Sephdex）、反相制备色谱（ RP RP18），高效液相色谱、逆流色谱和组合快速制备色谱；制剂实验室拥有的仪器设备如智能溶出试验仪、片 剂硬度计、粉碎机、片剂脆碎检查仪、湿法混合制粒机、微型颗粒机、单冲压片机、无级变速包衣机等，药理实验室拥有的仪器设备如荧光 酶标仪、 Uv1601 分光光度计、高速离心机、超速离心机、 CO2培养箱、超净工作台等。 九、项目负责人及主要参加人员的简历 课题组成员为 老 中青年学者，年龄结构合理。 其中 高级职称 3 人， 中级 3 人，有丰富的研究经历，对 野生 资源的调查与收集、引种栽培、 种源对比试验，有效成分分析 及推广等 均能自行完成。 项目负责人 ，高级工程师。 从事中药化学研究与生物制 药工作。 主要从事 药用植物中生物活性成分的提取分 离 等基础研究工作。 主持、参加省（部）、市 (厅 )级等科研项目 3项，发表论文 20 余篇，其中在国外杂志上发表论文三篇，被 SCI收录五篇、 EI收录一篇、一级期刊二篇。 项目主要参加人员之一 已经从事 20余年的色谱分离研究工作，已经发表相关的论文一百五十多篇，其中五十余篇被 SCI 收录（ 30 余篇论文影响因子大于 3），大部分是第一作者或通讯作者，研究成果曾获得日本化学会离子色谱成就奖，化工部科技进步三等奖，浙江省科技进步三等奖和浙江省青年科技奖， 2020 年入选“浙江省新世纪 151 人才工程”第二层次，现为中国分析仪器学会常 务理事，离子色谱专业委员会副主任委员、浙江省微量元素与健康研究会副理事长，《色谱》、《生命科学仪器》杂志编委，也是《 Journal of Chromatography A》、《 Talanta》、《 Journal。