超声辅助提取川木通总黄酮的工艺研究毕业论文(编辑修改稿)内容摘要:

川木通在中国药用历史上已有千年之久,在《证类本草》、《本草纲目》、《天宝本草》等书中均有记载。 川木通主要含有三萜皂苷类、黄酮类、木脂素、多糖等活性成分。 魏志奇 [1]表示,目前已经报道的川木通中所含的黄酮类为二氢黄酮。 川木通药理作用 ( 1)利尿作用 川木通作为利尿药使用已有几千年历史,是极为传统的药用植物。 张雪松 [2]的兔慢性利尿试验表明川木通有显著利尿效果。 他们的试验方法是连续 5 天给兔的腹腔给以木通醇浸膏,从而得到该结果。 ( 2)抗炎镇痛作用 川木通中含有丰富的皂苷类化合物以及有机酸成分,具有抗炎镇痛的作用。 由刘岩庭 [3]等的研究可知川木通有抗炎效果。 运用小鼠腹腔毛细血管通透法和小鼠耳肿胀法可得到,川木通中常春藤皂苷元对抗炎最有效,齐墩果酸也可以 显著抑制二甲苯的致炎反应。 ( 3)抗菌作用 川木通同时还具有抗菌作用,其作用机理是它具有一定的杀菌作用。 唐远 [4]乌兰其其格 [5]的研究均表明表明川木通可杀灭金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌等细菌。 黄酮 黄酮类化合物泛指由中央三碳将 2 个苯环联结起来的一系列化合物( C6C3C6)。 因 这类化合物多呈黄色或淡黄色而称黄酮。 自然界中广泛存在着黄酮类化合物,植物组织中的糖能与很多黄酮类化合物结合,其大多数存在的形式是黄酮苷,少部分是游离态。 它们有助于植物抵御异物的侵入,也有助于植物生长、发育、开花、结果。 黄酮 是天然酚类化合物之首 [6]。 目前已超过 4 000 种 2 的黄酮类类化合物被分离出来 ,国内外广泛关注其生理活性的多样性,研究进展迅速。 黄酮类化合物的分子结构 黄酮类化合物的基本骨架(如图 )。 根据三碳链氧化程度的不同、 B 环连接位置的不同以及三碳链的环化程度等特点 ,可被分为黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类等不同类型。 图 黄酮类化合物的基本化学结构 Chemical constitution of flavonoids 黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物大多数为结晶固体,少数为无定型粉末,多数呈黄色或淡黄色,可以测定熔点。 结构和存在状态的不同在很大程度上影响着其溶解度,有以下一般规律:游离苷元易溶于稀碱和有机溶剂(如:乙醇、乙醚、乙酸乙酯等),几乎不溶于水;水、甲醇、乙醇等强极性的溶剂易于溶解黄酮苷类化合物,而苯、氯仿、石醚等有机溶剂难于溶解。 此外,黄酮类化合物还能与部分试剂在一定条件下发生独特的显色反应,在早期,化学显色反应常在研究工作中被用来判断黄酮类化合物是否存在以及以何种类型存在。 黄酮类化合物的药理作用 黄酮类 化合物能治疗多种人类疾病,具有抗炎、抗癌等诸多药理作用。 ( 1)黄酮类化合物的抗炎免疫作用 黄酮类化合物能影响细胞有丝分裂,影响细胞细胞间的相互作用,因此具有抗炎免疫作用。 王晓梅等 [7]研究表明,黄酮类化合物可抑制 NO、 MDA 和 PGE2 3 等 的合成。 同时通过他们的研究结果表明,黄酮对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀以及大鼠腹腔巨噬细胞 IL1 的生成有抑制作用。 ( 2)黄酮类化合物对脑血管系统的影响 黄酮能修复血管内皮细胞的损伤,能溶解血栓,也能促进脑组织纤溶系统改善功能,黄酮类化合物有协同保护脑组织 的作用。 曹珊 [8]等研究表明:黄酮对脑缺血炎症及内皮血管的损伤有很好的疗效。 ( 3)黄酮类化合物的抗癌作用 黄酮类化合物的抗癌作用主要与其雌激素样作用、抑制酶的活性、诱导细胞凋亡等作用有关。 研究表明,黄酮类化合物对乳腺癌、前列腺癌等均有预防和治疗作用 [9]。 黄酮类化合物的其他应用 黄酮类化合物的溶解特性很宽 , 黄酮类化合物既有水溶性的 , 又有脂溶性的。 可据需要选择合适黄酮类化合物作为食品着色剂 [10]。 可在适当条件下黄酮类化合物中的二氢黄酮类化合物转化而成显甜味的二氢查尔酮糖苷,可作为天然的甜 味剂。 同时, 工业上用的染料和抗氧化剂也曾使用过黄酮类化合物。 黄酮提取的原理与方法 随着近十几年黄酮类化合物药用价值的不断提升,它的提取显得尤为重要。 下面简单介绍一下目前报道的黄酮类化合物的提取方法与原理。 溶剂萃取法 仅限于提取黄酮苷类物质时,可用热水进行提取,如:自槐花米中提取芦丁。 极性比较大的多糖黄酮苷,可以直接用沸水提取,但是沸水提取易产生较多易溶于水的杂质,需较复杂的后处理,且提取率也不理想,不常使用。 极性较小的游离黄酮苷元则可用甲醇:水( 1:1)连续萃取 [11]。 碱提取 酸沉淀法 由于黄酮类化合物大多具有酚羟基,易溶于碱水中。 可先用碱性的水或稀醇提取,提取液经酸化后可析出黄酮类化合物沉淀 [11]。 4 酶解法 当一些原料的细胞壁包围着黄酮类物质,使其不易被提取时,可以采用酶法提取。 如山楂中,黄酮被细胞壁所包围 , 且细胞壁间有果胶粘结 , 采用酶提比一般方法提取率高 [12]。 破坏果胶、纤维素等连接细胞壁的物质,使黄酮类物质得到充分释放是酶法提取原理。 超声波提取法 用超声波法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。 它的原理是超声波产生的振动强烈、加速 度高、空化作用强、以及搅拌作用有助于破坏细胞膜,利于释放与溶出黄酮类化合物。 提取液在超声波作用下不断震荡,有利于溶质扩散。 超声的热效应使水温基本在 57℃ ,对原料有水溶作用 [12],超声提取不对提取物的结构、活性产生影响 [13]。 因此,超声波提取法作为一种快速、高效、节能的新型提取工艺,使原料的利用率和有效成分的提取率得到了很大提高,提取时间大大缩短,并且避免了高温对提取成分的影响。 立题依据和研究意义 目前 ,利用超声辅助提取川木通总黄酮的研究报道很少,本文采用正交法优化其条件,为以后川木通总黄酮 的工业化生产提供实验基础。 2 材料与方法 实验材料 实验原料 川木通购自 湖北省金贵中药饮片公司 ,粉碎过 60 目筛,存于阴凉干燥处备用。 实验试剂 试剂名 产地或供应商 芦丁 国药集团 氢氧化钠 天津市风船化学试剂科技有限公司 硝酸铝 天津市福晨化学试剂有限公司 5 亚硝酸钠 天津市福晨化学试剂有限公司 溶液配置 1 mol/L 氢氧化钠 称取 4 g 氢氧化钠于烧杯中,沸腾后冷却的蒸馏水溶解(除二氧化碳),移至 100 mL 容量瓶中,定容至刻度线,摇匀贴上标签,备用, 10%硝酸铝溶液 称取 10 g 硝酸铝置于烧杯中,溶解,移至 100 mL 容量瓶中,定容至刻度线,摇匀,贴上标签,备用 5%亚硝酸钠溶液 称取 5 g 亚硝酸钠,放置于洗净烘干的烧杯中溶解,移至 100 mL 容量瓶中,定容至刻度线,摇匀,贴上标签,备用 30%乙醇溶液 量取 16 mL 的 95%乙醇,放置于 50 mL 容量瓶中定容至刻度线,摇匀,贴上标签,备用 其它浓度乙醇溶液 按 30%乙醇溶液步骤配置,现配现用 实验仪器 TU1810 DSPC 型紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责任公司 FA1004B 电子天平 上海精密科学仪器公 司 TDL802B 型离心 机 上海安亭科学仪器制造厂 JY96II 超声波细胞粉碎机 宁波新芝生物科技股份有限公司 实验方法 芦丁标准曲线的制作。
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