感冒清胶囊微生物限度检查方法验证毕业论文(编辑修改稿)

感冒清胶囊微生物限度检查方法验证毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

然界中，对人和动物植物均可造成危害。 [12]目前，因为其污染药品引起药源性疾病和医疗事故的例子时有发生，所以加强对该菌的控制是必要的。 与金黄色葡萄球菌相似，中国药典规定局部给药制剂都需控制该菌。 本菌除在硝酸盐培养基以外都是专性好氧。 梭菌 梭菌属是在自然界分布广泛的一类微生物，主要存在于土壤、海水和淡水的沉积物中。 人和家畜及昆虫的肠道内亦存在该类微生物，可随粪便排泄，污染土壤和水源。 本菌多数为腐物寄生菌，对环境的抵抗力极强 [13]。 其芽孢体可耐高温及干燥，有些菌的芽孢体 可在土壤中存活数十年。 本菌为革兰氏染色阳性菌，大多数为专性厌氧。 所以，培养时应注意严格控制环境中的含氧量。 中国药典对用于阴道和尿道的制剂进行梭菌检查时，采用生孢梭菌作为阳性对照菌。 微生物限度检查的方法 微生物限度检查方法按其研究内容的不同，方法也不尽相同。 细菌数的检查方法有多种，如平皿法、薄膜过滤法、涂抹法、 MPN 法。 由于药品细菌数测定是活菌计数，所以最常用的是平皿法。 霉菌和酵母菌计数也采取相同的检查方法。 控制菌则根据所需检查菌种的不同而采取不同的检查方法。 然而无论具体的操作步骤有什么不同，对于含抑菌成分的原料或制剂，最先需要处理的是消除其抑菌作用。 这是由于药品本身可能含有抑菌作用的组成及防腐剂等组分，一般认为，这些组分在一定浓度下对微生物具有抑制或杀灭的作用，被抑制的微生物将因受到不同程度的损伤而可能影响检查的准确性[14]。 但在适合的 pH、营养充足等合适的条件下，微生物可能复苏，从而危害人体健康。 微生物检测时，首先要进行供试品溶液的制备。 不同特性的供试品溶液，应采取不同的制备方法。 如水溶性供试品可直接加入稀释剂；不溶于水的固体制剂采用匀浆或加陕西科技大学毕业论文 6 6 混悬剂制成均匀的混悬液；非水溶性油剂或软膏剂加入乳化剂 使之成为均匀分散的乳浊液；有抑菌成分的供试品加入消除抑菌成分的中和剂，以及采用离心沉淀和薄膜过滤等消除抑菌成分的方法等。 《中国药典》 2020 年版规定，细菌、霉菌和酵母菌计数除另有规定外均采用平板菌落计数法 (平皿法 )。 该方法测定结果只反映在规定的条件下所生长的细菌 (嗜中温、需氧和兼性厌氧 )、霉菌和酵母菌的菌落数，不包括对营养、氧气、温度、 pH 值和其他因素有特殊要求的细菌、霉菌和酵母菌。 平板菌落计数法是活菌计数的方法之一，也是目前国内外微生物限度检查中最常用的方法。 它是用一定培养基在规定条件下培养后在固体平 板上呈现可见菌落，按规定方法计数报告的方法。 其原理主要为：将待测供试品经适当稀释之后，其中的微牛物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液至平皿中，再加入一定量的培养基，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原供试品中的一个单细胞。 统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出供试品中的含菌数。 但是，由于待测供试品往往不易全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自供试品中的 2~3或更多个细胞。 因此平板菌落计数的结果往往偏低。 为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向 使用茵落形成单位 (cfu)，而不以绝对菌落数来表示供试品的活菌含量。 由于供试品本身的性质、所采用的辅料、赋形剂以及剂型的不同，所使用的微生物限度检查法也不尽相同。 例如：某些药品供试品本身具有抑菌活性的成分、酊剂中有所含乙醇、合剂中所含的防腐剂山梨醇甲脂等，若使用简单的常规法，很可能会出现假阴性的情况，这对于药物安全性的控制是不利的。 针对本论文药品采用常规法，现对常规法介绍如下： 常规法是微生物限度检查中最重要也是最基本的方法。 它主要的特征是将制各好的供试品溶液 lml加入培养皿后，直接加入相应培养基进行培 养。 微生物限度检查方法验证的内容 微生物的生长受许多因素的影响，特别是药品污染中的微生物尤为如此。 所以，药品中微生物检验时，只有在各检测条件均适宜，即在该检验条件下的样品浓度不足以抑陕西科技大学毕业论文 7 7 制污染微生物的生长，使供试品中污染的微生物状况得以真实的反映，从而才能保证检验结果的科学性和准确性。 而为了保证检验结果的科学性和准确性，微牛物限度检查法需要经过验证。 药品中微生物的检验主要有三大类型：包括无菌试验、菌落计数和控制菌的检查。 其中，菌落计数和控制菌检查属于微生物限度检查的内容。 菌落计数方法的验证通过验证个菌 株的回收率来确认，而控制菌的检查则通过阳性对照和阴性对照的生长情况来确定。 在菌落计数方法学验证中，选取大肠埃希菌 (Escherichiacoli)[CMCC(B)441 02]、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26 003]、枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)[CMCC(B)63 501]、白色念珠菌 (Candida albicans， [CMCC(F)98001]、黑曲霉 (Aspergillus niger， [CMCC(F)98 003]五种菌作 为验证菌株。 其中金黄色葡萄球菌代表革兰氏阳性菌，大肠埃希菌代表革兰氏阴性菌，枯草芽孢杆菌代表芽孢菌，白色念珠菌代表酵母菌，黑曲霉代表霉菌。 大肠埃希菌 (Escherichiacoli)[CMCC(B)44 1 02] 前面控制菌检查中已经提及，所以不再赘述。 大肠埃希菌通常作为革兰氏阴性菌的代表。 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26 003] 前面控制菌检查中亦已经提及，所以也不再赘述。 金黄色葡萄球菌通常作为革兰氏阳性菌的代表。 枯草 芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)[CMCC(B)63 50 1] 枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种，广泛分布在土壤及腐败的有机物中，因易在枯草浸汁中繁殖而得名。 该菌在孢子状态下稳定性好，能耐氧化、耐挤压、耐高温 (能长期耐 600C 高温，在 1200C 温度下能存活 20 分钟 )和耐酸碱，在酸性胃环境中能保持活性，可以耐唾液和胆汁的攻击，在适当的条件下能快速繁殖。 枯草芽孢杆菌通常作为芽孢菌的代表 . 黑曲霉 (Aspergillus niger， [CMCC(F)98 003] 黑曲霉属半知菌亚门真菌。 菌落初白色，后变黑。 分生孢子头褐黑色呈放射状；分生孢子梗长短不一，顶囊球形，双层小梗；分生孢子褐色球形。 生长适温 37℃，最低相对湿度为 88％，能引致水分较高的粮食霉变。 陕西科技大学毕业论文 8 8。