中国药科大学本科毕业论文金线莲总黄酮测定方法的研究(编辑修改稿)

中国药科大学本科毕业论文金线莲总黄酮测定方法的研究(编辑修改稿)内容摘要：

量为横坐标（ X）、峰面积 为纵坐标（ Y）绘制标准曲线，结果见图 3。 槲皮素、山柰酚、异鼠李素的线性范围分别为： ~。 ~； ~。 图 3 混合对照品标准曲线 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 9 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 10 B 第三章 紫外法测定总黄酮含量 对照品的确定 对续滤液的 NaNO2Al(NO3)3NAOH 的显色处理后颜色比未显色续滤液浅，且发现金线莲相关文献内未有有芦丁的记载，故对槲皮素、山柰酚、异鼠李素进行紫外 200nm800nm 的波长扫描， 60%乙醇作为空白，三者波形相似，在 256nm 左右和 375nm 左右波长有最大吸收峰，处于易获得和低成本的考虑，选用槲皮素作为对照品。 测定波长的选择 精密称取适量的槲皮素对照品， 60%乙醇溶解，作为对照品溶液；精密称取 金线莲粉末，用 60%乙醇 50mL 水浴回流 3 小时，在 205~550nm 波长范围内进行扫描，并导出测定波长的选择，结果见图 5。 图 4 对照品零阶（ A）、一阶（ B）、二阶（ C）导数光谱图 图 5 供试品零阶（ A）、一阶（ B）、二阶（ C）导数光谱图 由图 4 可知，对照品在对照品在 256nm 和 375nm 处零阶图谱有最大值，一阶图谱过零点，二阶图谱分别有过零点和最小值，且振动有规律，得 对照品在 256nm 和 375nm 处有最大吸收波长；由图 5 可知供试品在 256nm 和 375nm 处零阶导数图谱有最大吸收值，一阶导数图谱分别有过零点A C B 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 11 和最小值，二阶图谱都有最小值但 256nm 点无振动规律， 375nm 点振动有规律，且 256nm 波长处检测波不稳定，故选择 375nm 作为最佳吸收波长。 不同提取方法的考察 不同提取方法对含量的影响 精密称取金线莲粉末 ,加 60%乙醇提取，结果见表 1和图 6。 表 1 不同提取方法对含量的影响 方法 索氏提取法 回流法 超声提取法 温浸法 冷浸渍法 取样量 /g WL375 WL256 溶剂含量 60% 60% 60% 60% 60% 提取时间 3 小时 3 小时 小时 6 小时 24 小时 料液比 100 50 50 50 50 提取温度 每秒 23 滴回流 .95176。 C 每秒 23 滴回流 ,95176。 C 20176。 C 60176。 C 20176。 C 图 6 不同提取方法的吸光度比较 由表 1 和图 3可知，在不同提取方法提取条件达到较好的情况下，回流法的提取效果最佳，且从提取时间实际情况考虑，可作为实验室提取金线莲黄酮类成分的首选方法。 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 12 溶剂类型和溶剂含量对吸光度影响的考察 精密称取金线莲粉末 ，置锥形瓶中，加浓度不等的乙醇和甲醇 95176。 C水浴回流2 小时，放冷过滤，取续滤液 3mL在 25mL 容量瓶中， 60%乙醇稀释至刻度线，在紫外375nm 和 256nm 测定吸收值 ,结果见表 图 7和表 图 8。 表 2 乙醇浓度对吸光度影响测试结果 乙醇浓度 /% 0% 20% 40% 60% 80% 100% 取样量 /g 吸光值 375nm 吸光值 256nm 图 7 乙醇浓度对吸光度影响测试结果图 表 3 甲醇浓度对吸光度影响测试结果 甲醇浓度 /% 0% 20% 40% 60% 80% 100% 取样量 /g 吸光度 256nm 吸光度 375nm 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 13 图 8 甲醇浓度对吸光度影响测试结果图 由表 图 4 和表 图 5 可知，甲醇、乙醇浓度对提取液吸光度影响较大，乙醇浓度 060%和甲醇浓度 60100%供试品吸光值基本保持不变， 80%乙醇的最大吸收值和 40%甲醇最大吸收值相近，而乙醇无毒易得，相比较下，乙醇比甲醇更适合作提取溶剂。 料液比对含量影响的考察 精密称取金线莲粉末 ，用 80%乙醇 25mL 水浴 95176。 C回流 2 小时，放冷过滤，取续滤液 3mL 置 25mL 容量瓶中， 80%乙醇定容至刻度线。 375nm 和 256nm 紫外分光光度法测定 ,结果见表 4和图 9。 表 4 料液比对含量影响的测试结果 溶剂体积 /mL 10 20 30 40 50 60 取样量 /g 吸光度 375nm 吸光度 256nm 图 9 料液比对含量影响的测试结果图 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 14 由表 4 和图 6可知，随着料液比的增大，吸光度也在增大。 料液比在 50200 之间，吸光度在逐渐上升，而其在 200300 之间，吸光度保持基本不变。 提取温度对含量的影响 精密称取金线莲粉末 ，用 80%乙醇 25mL 加热回流 2 小时，放冷过滤，取续滤液 3mL 置 25mL 容量瓶中， 80%乙醇定容至刻度线。 375nm 和 256nm 紫外分光光度法测定，结果见表 4 和图 10。 表 4 提取温度对含量影响的测试结果 提取温度 /176。 C 70176。 C 80176。 C 90176。 C 100176。 C 取样量 /g 吸光度 375nm 吸光度 256nm 图 10 提取温度对含量影响的测试结果图 由表 4 和图 7可知，温度从 7080176。 C 呈现下降的趋势，而温度从 80100176。 C 呈现的是上升的趋势， 因此温度在 70176。 C 为四个值中的最佳提取温度。 提取时间对含量的影响 精密称取金线莲粉末 ，加 80%乙醇 25mL 在 100176。 C水浴回流不等时间，在375nm 和 256nm 紫外下检测吸光值，结果见表 5和图 11。 中国药科大学本科生毕业论文（设计） 15 表 5 提取时间对含量影响测试结果 时间 /h 1 2 3 4 取样量 /g 吸光度 375nm 吸光度 256nm 图 11 提取时间对含量影响测试结果图 由表 5 和图 8可知，随着时间的变化 小时吸光值在下降， 值在逐渐上升，在 小时处，为提取值最低点，提取时间和吸光度并未成比例关系。 从表看来，提取时间越久越好，但从实验室的效益和可行性来看， 1小时为最佳提取时间。 对照品的制备 精密称取 槲皮素对照品 置 25mL 量瓶中，用 60%乙醇溶解并定容，得对照品储备液（槲皮素 ）， 精密吸取上述溶液 1mL，置于 25mL 量瓶中，加 60%乙醇至刻度，即得 对照品溶液（ 槲皮素 ）。