战略性新兴产业发展专项项目可行性研究报告(编辑修改稿)

战略性新兴产业发展专项项目可行性研究报告(编辑修改稿)内容摘要：

投入 100 亿日元，主要开发 bFGF 治疗糖尿病和心血管病及胃溃疡，目前日本武田公司 bFGF 外用制剂已经上市；德国、意大利等国也在投入巨资进行 bFGF 药物研究，目前处于临床前和临床研究阶段。 . 国内技术现状和发展趋势 碱性成纤维细胞生长因子作为一种创面修复 的较理想的药物，在国内已经被批准上市销售。 经临床前研究及前期临床试验证实， 碱性成纤维细胞生长因子 是一种多元性因子，可影响上皮细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、神经元细胞等多种细胞趋化和增殖作用，起到组织修复的调理作用。 局部外用未发现明显毒副作用，对人体各器官系统功能无损害。 目前国内自主研发的第一代外用重组牛 碱性成纤维细胞生长因子 冻干制剂已先后在珠海亿胜药业和长春长生基因药业产业化，产生较明显的经济效益。 第 21 页 共 53 页 第二代外用重组人 碱性成纤维细胞生长因子 冻干制剂在南海朗肽制药公司和北京双鹭制药公司进行生产。 第二代外用重组 人碱性成纤维细胞生长因子与第一代 外用重组牛 碱性成纤维细胞生长因子 冻干制剂 相比具有以下优点： （ 1）重组蛋白是人源化的基因表达产物，与人体 100%同源，应用于人体具有免疫原性和致敏性低。 （ 2） 采用大肠杆菌温控表达系统生产，与第一代采用 IPTG 诱导型表达载体相比，大大降低了生产成本，具有极强的市场竞争力。 （ 3）在纯化工艺上肝素亲和层析和凝胶层析，每升发酵产物可得重组人碱性成纤维细胞生长因子约 50mg，纯化收率 70%左右，纯度≥ 98%，比活性可达 1 107，技术达到国际领先水平。 . 项目技术特点以及与现有技术或 工艺比较具有的优势： . 基因来源于东方人血红细胞，采用 RTPCR 方法直接克隆人的 bFGF 基因。 . 鉴于遗传密码有兼并性和大肠杆菌对氨基酸密码子的偏爱与人体细胞的差异，本项目在不改变产物人 bFGF 的氨基酸组成与排列顺序的基础上，选用大肠杆菌偏爱密码子，提高了 bFGF 基因在大肠杆菌中的表达水平。 . 重组蛋白是人源化的基因表达产物，与人体 100%同源，应用于人体具有免疫原性和致敏性低等优点。 . 本项目产品与传统的创面治疗药物相比较均由的优越性 . 作用原理不同 常规用于治疗创伤、溃疡的药物多数是从消炎杀菌、抗伤口感染入手， 利用人体自身的再生育和能力，来达到治疗效果；而重组人碱性成纤维细胞生长因子则是通过促进细胞的生长与增值，主动修复伤口，一般正常愈合需要 7~10 第 22 页 共 53 页 天，而是用重组人碱性成纤维细胞生长因子后则只需要 5~7 天，大大缩短了愈合时间，减少了激发感染机会，节省了治疗费用。 . 对瘢痕形成影响不同 常规药物治疗创伤、溃疡由于是抗感染被动修复过程，因而容易留下瘢痕和色素沉着；而重组人碱性成纤维细胞生长因子质量创伤、溃疡由于是主动修复过程，愈合时间段，因而可有效减少瘢痕形成和色素沉着。 . 对功能恢复的影响不同 常规治疗创伤、溃疡，多半 仅限于伤口愈合，但对受损伤的皮肤附属功能器官，如神经末销、血管、汗腺等的功能恢复不是十分有效；二重组人碱性成纤维细胞生长因子是一种多功能细胞生长因子，对神经元、血管等有保护和修复效果，因而使用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗创伤、溃疡除了有伤口快速愈合之外，更重要的是对受损的皮肤附属供呢个器官，如神经末销、血管、汗腺等的功能恢复有显著疗效，这在目前治疗各种创伤、烧伤的药物中是唯一具有此功能的药物。 5. 项目的技术经济指标 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子产业化的主要技术经济指标和水平 目的蛋白表达率将在 20~30%之间，产量可达每升培养物 80~100mg，目的蛋白收率可达 50%，纯度≥ 98%，比活性≥ 1 106IU/mg；冻干收率达 95%以上，技术水平可达国内先进。 新增项目达产后年平均销售收入 2 亿元，利润总额 6000万元。 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）系列制剂的研究开发的主要技术经济指标和水平 第 23 页 共 53 页 . 建立重组人碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶和滴眼液的稳定生产工艺和质量标准。 . 完成重组人碱性成纤维细胞生长因子滴眼液临床前研究，获得临床试验批件。 . 获得重组人碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶的生产批件。 . 重组人碱性 成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）美容化妆品的主要技术经济指标 . 使重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）在美容化妆品中活性损失率小于 20%，活性稳定性问 24 个月。 . 开发出 10~20 个重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）美容化妆品。 6. 项目发展进度 . 2020 年 10 月至 2020 年 10 月，实现外用重组人碱性成纤维细胞生长因子产业化。 . 2020 年 7 月至 2020 年 7 月，完成重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂的临床试验。 . 2020 年 8 月至 2020 年 12 月，获得重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂的生产批件。 . 2020 年 10 月至 2020 年 12 月，完成重组人碱性成纤维细胞生长因子滴眼液临床前研究。 . 2020 年 12 月至 2020 年 12 月，获得重组人碱性成纤维细胞生长因子滴眼液临床批件。 三、 项目技术路线 第 24 页 共 53 页 1. 技术总路线 从人血细胞提取 mRNA 反转录 PCR bFGF 基因 分子克隆技术 构建基因工程菌株 发酵生产 分离纯化 rhbFGF 原料 保护剂 rhbFGF 外用凝胶、外用溶液、滴眼液 真空冻干 rhbFGF 冻干制剂成品 2. 关键技术及创新点分析 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）产业化 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF） 产业化需要解决的首要问题是原料来源，本项目通过优化发酵工艺和纯化工艺，使得目的蛋白重组人碱性成纤维细胞生长因子的表达量大大提高至 100mg/L，已经达到国内外领先水平，保证了产业化及后续制剂开发的原料来源问题；其次，通过优化冻干工艺，使得重组人碱性成纤维细胞生长因子冻 干制剂的水分在 3%以下，既保证了重组人碱性成纤维细胞生长因子的活性稳定性，又保证了冻干粉的外观形状。 解决上述两个问题之后，为重组人碱性成纤维细胞生长因子及其系列制剂的研究开发及 第 25 页 共 53 页 产业化奠定了结实基础， ，建立解决蛋白类药物普遍存在的“瓶颈”技术平台。 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF） 外用 凝胶 的 关键技术和创新点分析 目前国内外 rhbFGF 只有冻干制剂上市， rhbFGF 凝胶剂完成后将为临床提供基于湿性愈合理论的新药，与冻干制剂比，临床使用频率由每日使用、每日两次该成隔日使用、每日一次，而且减少换药粘连、 提高疗效。 同时，在 rhbFGF凝胶剂基础上，将 rhbFGF 包裹于脂质体中并制备成凝胶剂，充分利用了脂质体与细胞的亲合、缓释作用和水凝胶的屏障及易清洗性，显著地提高了药物稳定性、生物相容性和疗效。 rhbFGF 凝胶剂处方中的卡波姆和透明质酸的合理配比使其兼具缓释和保湿功能 ； 凝胶剂加入可与 bFGF 特异结合的肝素，以增强 bFGF 与受体的结合能力，并增强对酸、碱、热等因素的抗性，加入肝素后，生物学活性提高至少 2倍，提高了产品的质量标准 ； 脂质体主要由天然磷脂和胆固醇组成，进入体内后可被生物降解，不会积累在体内，且免疫 原性小。 重组人 bFGF 包埋在脂质体内，从脂质体中缓慢释放，使药效持续较长时间。 通过细胞内吞和融合作用，脂质体可直接将药物送入细胞内，避免使用高浓度游离药物 ； 凝胶剂作为脂质体局部给药的载体，可在脂质体周围形成一道屏障控制脂质体中药物释放的速率，避免药物的突释效应，同时凝胶剂手感细腻，易清洗。 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF） 外用溶液 的 关键技术和创新点分析 由于冻干制剂的剂型特点，采用了冻干粉与溶媒分开的包装形式，使用时需将溶媒加至冻干粉中以溶解，并倒回溶媒瓶方能使用，操作过程麻烦，且由 第 26 页 共 53 页 于操作过程中 不能保证无菌环境，增加了被污染的可能，不适用于一些严格要求无菌的创面。 外用溶液是在加入可与 FGF 特异结合的肝素，以增强 FGF 与受体的结合能力，并增强对酸、碱、热等因素的抗性，同时，加入生物活性保护剂海藻糖，从而实现 FGF 的液体保存状态，减少了复溶过程可能的污染，成本更低，使用更安全。 另外， 通过此项研究，筛选出一批既能保护蛋白质活性又便于使用的辅料组合，建立了若干混合成分中特异蛋白质活性的检测方法。 . 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF） 滴眼液 的 关键技术和创新点分析 眼表疾病是我国最主要和最 常见的致盲眼病之一，该病病因复杂，治疗棘手，常因诊治延误导致愈合延迟或者不愈合，甚至致盲。 重组人碱性成纤维细胞生长因子（ rhbFGF）作用于眼表病变部位，可激活调控与修复有关细胞的增殖、移行，促进细胞代谢、改善营养，主动促进修复，加速愈合。 蛋白质 类滴眼液的研制，关键是解决这类药物的稳定性问题，在一定溶液条件下， rhbFGF 分子中 Met、 Cys、 His、 Trp 及 Tyr 的某些基团与各种活泼氧具有很高的反应性易受到氧化，从而导致蛋白质的活性下降，容易发生水不溶性聚集而沉淀。 本 项目 研究人员经过大量试验， 筛选出 rhbFGF 保护剂配方，该配方可以保证 rhbFGF在水溶液状态下稳定保存 18 个月以上。 另外，本项目在国内率先建立动物角膜上皮激光损伤模型并建立定量评价角膜上皮恢复指标： 角膜上皮损伤修复，难于进行定量评价，因此很难科学评价一个药物对角膜上皮细胞的修复程度。 通常的定量评价指标仅限于用荧光素钠染色，检测角膜损伤斑面积的大小。 鉴于角膜损伤修复后透光率的大小间接反 第 27 页 共 53 页 应角膜的修复情况，损伤修复后角膜上皮细胞数量反应角膜细胞的再生水平，本项目药效学评价中建立了三个科学可行的定量评价指标：角膜透光率 OD 值，MTT 方法检测角膜上 皮细胞数量，角膜损伤斑面积。 四、 现有研发及生产条件 1. 项目承担单位基本条件 南海朗肽制药有限公司是由南海能兴（控股）集团有限公司和暨南大学（医药生物技术研究开发中心）合作兴建的有限责任公司。 能兴集团以房地产、商业、陶瓷等产业为主营业务，是年纳税超亿元的中国 500 强企业，暨南大学是具有百年历史的岭南名校，在生物工程、企业管理等领域具有传统优势。 公司拥有近 3000 m2 的生产车间和附属设施，可生产冻干制剂，喷雾剂和小容量注射剂等，公司于 2020 年 10 月取得国家食品药品监督管理局的药品 GMP认证证书， 2020 年被列 为国家高新技术产业化示范基地，同年被广东省列为 “ 省十大重点工程高新技术产业工程项目 ” ， rhbFGF 冻干粉一类新药还被列入 2020年 “ 国家重点新产品计划 ”。 截止至 2020 年 6 月 30 日，公司已生产外用重组人碱性成纤维细胞生长因子 80 万支，生产工艺稳定，成品一次检验合格率达100%，原液一次检验合格率为 99%，据正在进行考察的稳定性数据显示产品稳定性良好。 在小规模生产取得经验与成功的基础上，公司目前已投资 亿元建立了一个符合 GMP 标准的生产基地，以实现此项目的产业化并打入国际市场。 此生产基地包括生产车间 5000m2，质检研发中心 1000 m2，综合楼 6000m2，及库房与公用辅助用房 2200m2。 目前 ， 该 生产基地 已 建设完成，已经通过消防、环保验收，并已经通过国家食品药品监督管理局 GMP 认证。 新生产基地 可进行 多种 生 第 28 页 共 53 页 物原料的生产和多种剂型的制造，如冻干制剂，喷雾剂，凝胶剂，滴眼剂，膜剂 和小容量注射剂等，总产量可达年产 800 万支外用重组成纤维细胞生长因子及相关系列产品。 另外，暨南大学作为百年名校，在生物医药领域具有雄厚的研发实力，承载着包括上述基因工程药物国家工程研究中心以及广东省生物制药重点试验室、教育 部基因组药物工程中心等高水平研发平台，拥有华侨医院等 5 家三甲附属医院。 温州医学院通过近 10 年的锐意进取，在生物制药领域同样具备了较为雄厚的研发实力，目前， 已建立了一个符合 GLP 要求的药物开发研究室和符合 GMP 要求的药物中试研究基地，总面积超过了 3000 平方米，设备总投资超过2020 万元，同时建有浙江省生物技术制药工程重点实验室、国家新药开发工程研究中心制剂工程研究基地 、浙江省遗传学重点实验室等科研平台，拥有 1 个SPF 级动物实验中心和 7 家附属三甲医院，建立了 2 个国家 GCP 临床研究基地。 2. 人才团队等软件条件 项 目承担单位和 参与单位拥有强大的专业技术和管理队伍，目前已经形成了一支学术水平高、战斗力强的人才队伍，中青年研究人员占比大，科研人。