微生物学检验细菌形态学检查法(编辑修改稿)内容摘要:
养基的成分和作用 培养基:是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。 营养物质:蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类 水 凝固剂:琼脂、明胶 抑制剂 指示剂 培养基的种类 ( 按用途分类 ) 基础培养基 :培养营养要求不高的细菌,如普通平板 营养培养基 :能满足营养需求较高细菌的生长,如血平板 鉴别培养基 :含有某些特定的底物,用于鉴别细菌,如克氏双糖培养基( KIA) 选择培养基 :具有选择性抑制作用,用于选择性的培养目的菌,如 SS平板 增菌培养基 :促进目的菌的生长,适用于含菌量较少的标本,如葡萄糖肉汤。 厌氧培养基 :用于培养厌氧菌 培养基的种类 ( 按物理性状分类 ) 液体培养基:不含凝固剂,用于增菌和接种纯种细菌。 半固体培养基:含 %~ %琼脂,用于观察细菌的动力。 固体培养基:含 2%~ %琼脂,多用于细菌的分离培养。 培养基制备的一般程序 调配 溶化 矫正 pH 过滤澄清 分装 灭菌 检定 培养基灭菌 ★ 基础培养基: 121℃ 高压蒸汽灭菌 15分钟 ★ 含糖培养基: 113 ℃ 灭菌 15分钟 ★ 鸡蛋、血清培养基:间歇灭菌 3天 3次 ★ 不耐高温的液体成分:滤过除菌 保存 培养基 pH测定及矫正 材料: 待测培养基、 、 4孔比色架、 %酚红、 氢氧化钠 、 1mol/L) 盐酸(。微生物学检验细菌形态学检查法(编辑修改稿)
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在自然界分布 土壤中的细菌:有芽孢的致病菌引起创伤感染 水中的细菌:水中的病原菌主要引起消化道传染病 水、食品卫生细菌学检测指标: 细菌总数< 100个 /ml;大肠杆菌 3个 /ml 空气中的细菌:空气中的病原菌引起呼吸道传染病;空气中的细菌可引起培养基、生物制品的污染。 细菌在正常人体的分布 有细菌寄居的部位 皮肤、口腔、呼吸道、胃肠道、泌尿生殖道、眼结膜 正常人体无菌的部位 血液、膀胱
★ 培养温度: 35℃ (采用恒温培养箱) ★ 培养时间: 18~ 24h 二氧化碳培养法:烛缸法、二氧化碳培养箱 厌氧培养法:厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等 细菌在 固体 培养基中的生长现象 菌落 ★ 定义:指单个细菌在平板培养基上生长繁殖,形成单一肉眼可见的细菌集团。 ★ 菌落特征:大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 ★ 菌落类型:光滑型(
了细菌 DNA上两侧的基因。 当其转导并整合到受体菌中,使受体菌获得供体菌的某些遗传性状。 所转导的只限于供体菌上个别的基因。 课件制作 陆曙梅 局限性转导 课件制作 陆曙梅 普遍性转导与局限性转导的区别 区别要点 普遍性转导 局限性转导 基因转导发生的时期 裂解期 溶原期 转导的遗传物质 供体菌染色体 DNA任何部位或质粒 噬菌体 DNA及供体菌 DNA的特定部位 转导的后果
,以确定是否为 O1群 确定血清型:与分型诊断血清作玻片凝集,以确定血清型别 确定生物型: 第 Ⅳ 组噬菌体裂解试验 多粘菌素 B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验 课件制作 陆曙梅 副溶血性弧菌-- 生物学性状 革兰阴性杆菌,或微弯,单端鞭毛,无芽孢,无荚膜 营养要求 不高,嗜盐性,最适盐浓度 %NaCl,无盐培养基不生长 TCBS:形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象+
O2 < 30℃ 或> ℃ 不生长 常用培养基和菌落特征 巧克力色培养基 TM培养基(含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素) MTM培养基(改良的 TM) 菌落特征:圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化 生化反应 氧化酶、触酶:+ 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+-- 30% H2O2试验:+ 抵抗力 抵抗力极弱 对温度变化敏感 对干燥敏感 对消毒剂敏感 易形成耐药性 临床意义 致病物质:菌毛、 IgA蛋白酶
染色体外遗传物质 质粒 转位因子 课件制作 陆曙梅 质粒 细菌染色体外的遗传物质,是环状闭合的双链 DNA。 带有遗传性息,能自行复制,随细菌分裂转移到子代细胞,并非细菌生长所必需。 特征 自我复制能力 编码产物赋予细菌某些性状特征 可自行丢失与消除 转移性 相容性和不相容性 课件制作 陆曙梅 几种重要的质粒 致育质粒( F质粒) 耐药质粒 毒力质粒( Vi质粒) 细菌素质粒 代谢质粒 课件制作