综合性设计性实验-3(编辑修改稿)

综合性设计性实验-3(编辑修改稿)内容摘要：

、 αβ、 γ球蛋白各管的光密度。 6. 计算： 光密度总和 T ＝ A+α1+α2+β+γ 白蛋白％＝ A/T 100% α1球蛋白％＝ α1/T 100% α2球蛋白％＝ α2/T 100% β球蛋白％＝ β/T 100% γ球蛋白％＝ γ/T 100% 临床意义  正常值： 白蛋白： 57～ 72% α1球蛋白： 2～ 5% α2球蛋白： 4～ 9% β球蛋白： ～ 12% γ球蛋白： 12～ 20%  急性肝炎：发病早期蛋白质电泳无变化，发病两周后白蛋白、 α2及 β球蛋白减少， γ球蛋白增高。  慢性肝炎： γ球蛋白升高，白蛋白下降较急性肝炎显著。  肝硬化：白蛋白、 α α2球蛋白均明显下降， γ球蛋白极度升高，甚至 A/G比值倒置。  肾病综合征时，白蛋白降低， α2 、 β球蛋白升高。 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 实验目的  学习等电聚焦电泳分离血清蛋白的原理  学习聚丙烯酰胺作为电泳介质的优点及用途  了解等电聚焦电泳和普通聚丙烯酰胺电泳的异同 以聚丙烯酰胺作为支持物，两性载体电解质在支持物内形成稳定的 pH梯度，当蛋白质在电场力的作用下，便会在支持物中运动到相当与自身 pI的位置中聚合成一狭窄的区带而停留下来。 实验原理 聚丙烯酰胺凝胶  聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。 聚丙烯酰胺凝胶是由单体的丙烯酰（ Acrylamide,Acr）和甲叉双丙烯酰胺（ N,Nmethylenebisacrylamide,Bis）在催化剂作用下聚合而成。  聚丙烯酰胺凝胶的特点：机械弹度好、弹性大、透明、化学稳定性高及无电渗等。  聚丙烯酰胺凝胶兼有电泳和分子筛的双重作用，分辨率高。 等电聚焦电泳  蛋白质是带有电荷的两性生物大分子 ， 其正负电荷的数量随所处环境酸碱度的变化而变化。 在电场存在下的一定 pH溶液中 ， 带正电的蛋白分子将向负极移动而带负电的蛋白分子将向正极移动 ， 在某一 pH时 ， 蛋白分子在电场中不再移动 ， 此时的 pH值即为该蛋白质的等电点。  等电聚焦 (IEF） 电泳就是在凝胶中加入两性电解质从而构成从正极到负极 pH逐渐增加的pH梯度 ， 处在其中的蛋白分子在电场的作用下运动 ， 最后各自停留在其等电点的位置上 ，测出蛋白分子聚焦位。