实验九聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点(编辑修改稿)内容摘要:
10%TEMED 蛋白质混合样品 蒸馏水 混匀后置真空干燥器中抽气 10 min 10%过硫酸铵 ( 3)将配好的凝胶溶液用细长头滴管加到预先准备好的玻管中, 至离上端 1 cm处 ,再用注射器缓缓加水 35 mm高。 ( 4)待凝胶聚合 2. 电泳 小心地拔出玻管,并用蒸馏水洗去蔗糖溶液,把管固定到电泳槽上槽的洞中 (安装时要保证凝胶管垂直且橡胶塞孔密封不漏) 在上槽中加入 5%磷酸缓冲液,在下槽中装入 2%氢氧化钠溶液。 避免管下有气泡。 上槽接电泳仪的正极,下槽接负极,打开电源,先调电压至 100 V,待电压稳定后再升到 300 V,电泳 2 h以上至电流降为 0,将电压调至 0,关闭电源。 3. 剥胶 电泳结束后 , 取下凝胶管 , 用蒸馏水充分洗净两端电极液 , 在凝胶条的正极端插一铜丝为标记。 用灌满水的注。实验九聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点(编辑修改稿)
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