肿瘤药理实验方法与技术内容摘要:

T0 T T0 杀死 50%细胞所需的药物浓度 (LC50)= 100% T0 (二 ) 在体试验法 小鼠白血病 L1210 系用甲基胆蒽诱发 DBA/2小鼠而得。 取接种于 DBA/2小鼠第 6~7 天之腹水,制成细胞悬液,每只小鼠( DBF1 或 CDF1)腹腔接种活细胞 1 105,观察体重变化,计算平均存活时间 T/C( T治疗组存活时间, C对 照组存活时间)。 T/C大于 125%,并可重复,认为有抗癌活性, T/C大于 150%,并可重复,认为具有显著活性。 大鼠 Walker256瘤 本瘤细胞接种在皮下或肌肉成为实体瘤,接种于腹腔则成为腹水瘤。 取 Walker256瘤体制成瘤细胞悬液,按 106个细胞接种于大鼠大腿肌肉。 计算瘤重和T/C。 重复实验 T/C ≤ 42%,认为有活性。 Lewis 肺癌 是一个在 C57BL/6小鼠上发现的自发性肺内未分化的上皮样癌。 该癌细胞恶性程度高,皮下、肌肉接种对药物的 敏感性低,但可向肺转移,静脉接种可在肺形成瘤集落。 方法是取接种于 C57BL/6小鼠肌肉或腋窝皮下的 13~ 15天的 Lewis肺癌,制成细胞悬液接种 2 106个细胞于 BDF1小鼠皮下或腹腔内, 12天后处死动物,作皮下接种者直接摘取肿瘤称重,作腹腔接种者,将双侧后肢从髋关节处剪下,荷瘤肢重减去正常肢重即为瘤重。 重复实验 T/C≤ 42%为有活性。 二、抗癌作用机制研究 (一)药物作用周期特异性研究 进行药物作用细胞周期性实验必须首先制备同步化的细胞,常用的体外培养细胞同步化的方法有机械振荡法、双胸苷同步法、含羞草氨酸 俘获法和离心洗脱法。 机械振荡法 机械振荡法分离同步化细胞是基于单层贴壁生长的细胞在进入有丝分裂期时 , 胞形变圆,松散地附在支持物上,利用摇晃或拍击培养瓶可以剥离出这些细胞,利用此方法可以得到较纯的 M 期细胞。 双胸苷同步法的原理是先以高浓度的 TdR处理细胞,使细胞内的 dTTP升高,后者抑制 CDP 向 dCDP的转变, DNA复制受阻, S期细胞停滞在S 期,其它期细胞积聚在 G1/S边界;撤 TdR,让原处于 S期的细胞完全越过 S期,再给予TdR,让越过 S期的细胞进入 G1/S边。
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