实验动物中心操作规程与管理制度sop-江苏省农科院兽医研究所网站首

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环境中动物实验所需要的无菌衣、各种工器具进行湿热灭菌。 二、 操作规程： 准备 1． 1 气源：启动空气压缩机，使压缩空气储罐内充满额定工作压力。 1． 2 汽源：打开蒸汽阀门，并排放管路冷凝水及确认汽源压力正常。 1． 3 水源：打开进水阀，并确认压力正常。 1． 4 电源：相继打开进线电源开关、控制电源开关。 开门 2． 1 启动面板上人机界面（触摸屏）显示“神农”商标，按商标进入“主控界面”画面，按“前门操作”键，显示“前门操作”画面，按“前门真空”键，门圈真空系统（真空泵、门圈真空阀、真空泵用水阀）启动，抽排门圈内密封用压缩空气。 2． 2 约 15 秒钟以后，按“开前门”键，前门锁紧机构开启，用手拉开前门。 2． 3 装载：将需要灭菌的物品装入灭菌柜，送如灭菌腔。 19 关门：装载完毕，用手把门关上，并按住门 板，同样在“前门操作”画面下，按“关前门”键，前门锁紧机构锁住。 密封：如果此时前后门均为关闭，准备进行灭菌操作，即可将门圈密封。 自控运行：在“主控界面”画面中按“自控界面”键将转入自动控制界面，此时按“启动”操作键，设备将按预设程序自动运行，画面将同时动态显示实时工况： 5． 1 准备：前后门关到位，空压气到位，触摸屏显示“准备”。 5． 2 真空：预热至一定温度，按启动，循环三次真空转入升温。 5． 3 升温：灭菌室压力不断上升至设定压力。 温度持续上升设定值，转入灭菌。 5． 4 灭菌：灭菌压力、温度维持在设定 范围内，到设定灭菌时间，转入干燥。 5． 5 干燥：排气 1 分钟左右，真空泵启动抽湿热蒸汽，其间真空、补气相循环，到设定干燥时间，结束真空干燥，补百级空气。 5． 6 结束：灭菌室压力上升至 OMpa, 结束灯亮，按门真空 15 秒后，开门取物。 6．手控运行： 当有特殊的灭菌需求，或自控程序出现无法满足灭菌需要时，任何时刻均可经“主控界面”画面进入“手控界面”操作，利用手控操作键继续完成 20 灭菌操作。 手控操作是一种非常规范的程序，需要操作者在理解该设备运行原理的基础上，不偏离灭菌的常规原则合理应用该手控操作键，达到预期 结果。 1． 开门取物：“按后门真空” 键，约 15 秒后，按“开后门”键，后门紧锁机构开启，用手拉开后门取物。 2． 故障排除： 9． 1 报警处理：在整个工作运行过程中，针对各工作段可能出现的异常情况，设备会列出详细的报警信息，闪烁于用户界面，操作者应冷静而准确地作出判断，采用相应的处理措施。 9． 2 内室压力异常：在确认短时间内无法排除的情况下，必须立即停止其它一切操作，将柜内压力蒸汽迅速排净，停止自动自动程序的运行，转入手控操作界面，利用“排气”操作键得以实施。 9． 3 真空泵过热：原因是真空泵缺水或阀门开启不良引 起。 3． 维护与保养 10． 1 每次灭菌结束，需对灭菌室进行清理，除去柜内、滤物网上的污物。 10． 2 每天灭菌结束，在手控操作界面排放柜底存水，对灭菌室进行清洗。 10． 3 长时间不用，需将腔内擦洗干净，保持干燥清洁，并将双门关闭。 10． 4 安全阀： 是保证设备在设计压力安全运行的重要部件，每月应反复提拉数次，保证其灵活状态。 10． 5 管路各滤网没天清洗，确保畅通，压力表、测温探头每年校验一次，每 21 天排放压缩空气管路分水过滤器内存水，密封圈表面保持清洁，及时消除异物，如有残损及时更换，锁紧机构应每月检查一次 ，发现松动、卡住现象及时调整。 第二章 实验动物饲养规范与操作规程 22 11． 清洁 级大 、 小鼠的饲养管理与操作规程 1. 清洁 级 大小鼠要求生活在屏障环境中，严格控制各种环境因素。 2. 根据营养需要设计饲料配方，蛋白质、能量和维生素等各种营养成分应全面、充分。 每天饲喂颗粒饲料应定时定量。 3. 饲养清洁级大小鼠的笼、盒等都必须能耐酸、耐碱、耐高温。 4. 繁殖种鼠一般是生产五胎后应予以淘汰，留种率为 10— 15%。 5. 补充种子时，应按品系要求进行选种，封闭群要选留父母双亲的生产性能高的后代。 仔鼠应个体健壮，被毛光泽，肌肉丰满，皮肤富有弹性而不松弛，运动灵活，活泼有力。 尾部血管清晰，头颈、四肢、躯体发育匀称，眼耳口鼻无异物，呼吸均匀，食欲旺盛。 6. 操作中对动物的捕捉方法要正确，尽量避免其受惊，减少恐慌。 7. 工作人员每天进入动物室后，都要认真观察温湿度变化情况、动物的精神状态、采食情况、粪便性状等，并作好记录。 8. 动物的发出应以领单为准，严格按照实验人员要求发给，不得由其入内自行挑选。 9. 饲养人员在遇节假日休息或病、事假时，必须先请假，做好交接手续后方可离开。 10. 严禁外单位人员、笼具、动物等进入饲育区。 23 12． 裸鼠的饲养管理与操作规程 1. 裸鼠可在清洁级设施条件下层流柜内饲养，饲养 笼盒应带有过滤帽。 2. 饲养裸鼠的环境昼夜都不得停电，因短时停电应及时采取应急措施。 3. 裸鼠对温度要求稍高于其它鼠，范围在 25~27℃，温度在 40~60%。 4. 裸鼠对能量的要求稍高于其它小鼠，所以在作饲料配方时应考虑给予补充。 饮水采用酸化水。 5. 在生产繁殖上，一般是采用雄性裸鼠和雌性半裸鼠交配的方式。 6. 仔鼠在出生后 3 天，根据裸鼠胡须少而卷曲的特点将裸鼠与半裸鼠分开。 7. 哺乳 25 天进行离乳，按雌雄分盒饲养。 8. 进入饲养室的一切物品，饲料、垫料、笼盒等都必须经过消毒灭菌。 9. 饲养人员有病时 (如皮肤病，痢疾、感冒、发热 )时不得进 入饲养区。 10. 个人的手表、饰物等都不得带入饲养区。 11. 每次进入饲育室时开关门要迅速，每扇门关闭后，才能再开 下一扇门，以防空气对流。 24 13． 地鼠的饲养管理 与 操作规程 1. 饲养地鼠的笼盒要牢固，因地鼠牙齿十分坚硬，可咬断细铁丝。 2. 地鼠喜爱温度较高、湿度较大的环境，一般温度在 22~28℃，温度在 60~70%。 3. 每天饲喂颗粒料二次，保证清洁的饮水。 另外，补充新鲜的蔬菜和瓜果类。 4. 地鼠有二侧颊囊，用于贮存食物，故应经常检查，防止霉变。 5. 地鼠好斗，难于成群饲养，宜采取单笼饲养，配种时将雄鼠放入雌鼠笼内。 25 14． 豚鼠的饲养管理 与 操作规程 1. 进入豚鼠室时应小声、轻动，不要大声喧哗。 因豚鼠胆小易惊。 2. 每天饲喂颗粒饮料的同时，注意补充维生素 C，或禾木科嫩草。 饲喂时应定时定量。 3. 豚鼠对温度的变化较敏感室内温度应保持在 18~24℃，湿度以 45~55%。 4. 在饲养过程中应避免用抗菌素，因为豚鼠对抗菌素极敏感。 5. 保持笼具和食具的卫生，每天清除笼底板里的积粪，保持清洁的饮水。 6. 繁殖豚鼠以♀ :♂ =6:1 长期同居法。 夏季 15 天，冬季 20 天后离乳，离乳后的豚鼠应根据雌雄、大小、强弱分群饲养。 7. 发现动物有异常情况应及时隔离饲养，并向技术 人员汇报。 8. 下班前检查水、电、门窗，再拖地一遍。 26 15． 实验兔的饲养管理 与 操作规程 1. 兔喜欢独居，应单笼饲养。 2. 兔胆小怕惊，喜欢安静，清洁。 故禁止在兔舍内吸烟，进食、随地吐痰、大声喧哗。 3. 每天饲喂二次颗粒饮料，饲喂时应定时定量、同时适当补充维生素 C 或青饲料，霉变饲料不得饲喂。 4. 选择健壮、营养良好，被毛紧披有光泽，眼睛明亮有神，全身清洁，无疾病，无畸形，母兔要求母性好者进行留种繁殖。 5. 为保证受胎率，在母兔配种之后隔 10— 12 小时再交配一次。 6. 兔的妊娠期为 30 天，产仔前有拉毛现象，故在产仔前要准备好产箱。 7. 45 天离乳。 离乳后的仔兔应按体质的强弱，雌雄进行分笼饲养。 8. 每年在春、秋二季进行二次疫苗的预防接种工作。 9. 在整个操作过程中，应认真观察动物的活动情况，粪便性状，毛色状况，饮食、饮水、发现异常，及时隔离汇报。 10. 领发动物必须凭领单，由工作人员根据实验人员的要求进行发放，实验人员不得进入自由挑选。 11. 下班前检查水、电等，关好门窗。 27 16． 实验猪的 饲养 管理 与 操作规程 1 猪的生活习性 猪的嗅觉和听觉灵敏，视觉不发达。 猪的合群性强，并形成群居位次。 猪在群饲时，相互之间有很强的模仿性、争食性和竞争习性。 猪 喜干燥，爱好清洁。 猪通常不在吃睡的地方排泄粪尿，而选择阴暗潮湿或污浊、有粪尿气味处排粪尿。 2 饲养环境要求 为避免发生疾病，在进猪之前有必要对猪舍、圈栏、用具等进行彻底的消毒。 要彻底清扫猪舍走道、猪栏内的粪便、垫草等污物，用水洗刷干净后再进行消毒。 猪栏、走道、墙壁可用 2％～ 3％的苛性钠（火碱）水溶液喷洒消毒，停半天或１天后再用清水冲洗、晾干。 墙壁也可用 20％石灰粉刷。 应提前消毒饲槽、饲喂用具、车辆等，消毒后洗刷干净备用。 日常可定期用对猪安全的消毒液进行带猪消毒。 温度 在适宜温度下，猪的增重快，饲料利用率高。 适宜温度随猪只体重的不同而不同。 一般猪舍的适宜温度，哺乳仔猪为 25~30℃、育成猪 20~23℃、成年猪 15~18℃。 湿度 实践证明，当温度适宜时，相对湿度从 45％上升到 75％都不会影响猪的采食量、增重和饲料利用率。 猪舍空气相对湿度以 40％ 75％为宜。 光照 从猪的生物学特性看，猪对光也是不敏感的。 因此肉猪舍的光照只要不影响操作和猪的采食就可以了。 强烈的光照会影响肉猪的休息和睡眠，从而影响其生长发育。 28 猪舍的通风 加强通风的措 施有：在自然通风猪舍设置地脚窗、大窗、通风屋脊等；应使进气口均匀布置，使各处猪均能享受到凉爽的气流；缩小猪舍跨度，使舍内易形成穿堂风。 在自然通风不足时，应增设机械通风。 3 常见猪的种类 我国的地方猪种有民猪、两广小花猪、滇南小耳猪、金华猪、华中两头乌猪、太湖猪、姜曲海猪、内江猪、荣昌猪、藏猪等。 国外引入猪种主要有大约克夏、长白猪、杜洛克猪、汉普夏猪、皮特兰猪等。 驱虫 幼猪转入后 710 天，用 2%敌百虫溶液体表喷雾驱虫。 卫生与消毒 每天清扫舍内走廊 、床面和清除粪便 2次。 每周舍内及走廊用有效消毒液带猪喷雾消毒 2次，人员出入圈舍必须经过门前消毒槽脚踏消毒。 舍内温度控制在 1618℃，相对湿度 5070%，保持空气新鲜。 饲养员要随时观察猪群精神状态、采食情况、粪便变化。 发现异常立即报告，技术人员及时处理。 预防咬尾、耳等不良习惯。 在饲喂全价饲料，温湿度合适的情况下，仍可能有互咬现象，这也是仔猪的一种天性。 在圈舍吊上橡胶环、铁链及塑料瓶等让它们玩耍，可分散注意力，减少互咬现象。 29 5 疫病防治手段 防疫设施 建防疫墙 猪厂四周建成墙，墙高 米。 挖防疫沟，距防疫墙外 5米，挖防疫沟，沟上口宽 8米，底宽 4 米，深 2 米，沟内贮水。 消毒池 猪厂正门入口、出口、设三道消毒池，池内放入 2%苛性钠溶液。 消毒药经常更换保持有效浓度，室外消毒池在冬季改用生石灰消毒。 消毒室 设可供厂内工作人员出入厂更衣用的更衣柜并安装 2537 埃紫外线灯 6盏，消毒时照射 15 分钟，凡进厂人员，必须通过消毒室更衣、换鞋、消毒后方可进厂。 消毒设备 各车间均配备压缩式喷雾器 24 台，供圈舍消毒用。 备有高压机动喷雾器 2 台，供厂区消毒用。 预防猪的传染病措施 贯彻自繁自养。 更新血液，外引种猪时，须从非疫区（厂）购入，必须经过检疫后方能引入。 引入后进行两个月隔离饲养，经观察确认健康无病时，方许引入实验猪场。 实验猪场谢绝参观。 经特殊批准进场人员，须执行更衣、换鞋消毒规定，方准进场。 猪群发生传染病或发生可疑传染病时，要及时迅速做出诊断以便采取相应措施。 如遇疑难病情不能确诊时，应及时送检病料或请专家协 助确诊。 扑灭传染病要本着早、快、严、小的原则，一旦发生应立即隔离，封锁发病圈舍或全场进行封锁，并全厂紧急大消毒，如猪场周围地区发生猪的传染病，猪厂受到威胁时，也可进行自卫封锁。 扑杀的传染病猪或病死猪，不准擅自剖检，一律火化处理，如需诊断、检验剖检必须由兽医人员执行，但出入火化间应彻底消毒。 30 6 捕捉方法 站立保定法 用一根筷子粗的纱绳 ,在一端打个活结。 保定时 ,一人抓住猪的两耳并向上提 ,在猪嚎叫时 ,把绳的活结立即套入猪的上领并抽紧 ,然后把绳头扣在圈栏或木柱上 ,此时猪常后退 ,当猪 退至被绳拉紧时 ,便站住不动。 解脱时 ,只需把活结的绳头一抽便可。 此法适用于检查和肌肉注射。 6..2 提举保定法 抓住猪的两耳 ,迅速提起 ,使前肢腾空 ,同时用膝部夹住胸或腰腹部 ,使猪的腹部朝前 ,此法适用于灌药或肌肉注射。 倒卧保定法 一手抓住猪的一个后肢并提起 ,另一手紧抓该肢同侧膝前皱褶，顺势将猪横卧于地，随后两手分别抓住前后肢，助手用绳缚紧四肢而固定。 倒立保定法 用两手握住猪两后肢飞节 ,头。