云南师范大学大学生科研训练基金项目中期检查报告书【最新】

云南师范大学大学生科研训练基金项目中期检查报告书【最新】内容摘要：

冷却至 58℃，过滤于棕色试剂瓶，冷却至 26℃，加入 10ml1mol/L HCl和 （ Na2S2O5），振摇使其溶解混均，密封瓶口，置黑暗低温（ 10℃）处， 4— 12 小时检查，待溶液透明无色或呈淡茶色即可使用。 如果发现仍有不同程度的红色未褪尽，可加入 性炭不断振摇后，在黑暗低温（ 4℃）处静置过夜，过滤后可以使用。 通常经活性炭处理后的试剂着色力会减弱，所以最好不要用活性炭处理，关键的问题在于偏重亚硫酸钠的质量，好的偏重亚硫酸钠打开瓶盖即有明显的 SO2气味 （ 李懋学，张敦芳， 1991）。 漂洗液： 5ml 1mol/L HCl+5ml 10% Na2S2O5 +100ml H2O。 材料处理和染色程序 ： 1）固定材料经 50%酒精转入蒸馏水； 2）将材料浸入事先预热至 60177。 1℃的 1mol/L HCl保温 5— 15分钟； 3）冷 1mol/L HCl洗一次； 4）浸入 Schiff试剂染色（ 10℃黑暗条件） 1— 2小时； 5）漂洗液漂 洗三次，每次 5分钟； 6）蒸馏水洗 5— 10分钟； 7） 45%乙酸压片。 压片操作及制作永久封片 1） 压片准备和操作 植物染色体压片法是目前国内外最普遍采用的方法。 这是一种手工技术，因此，具体的操作方法和使用的工具并无一定之规。 但目的只有一个，那就是使分生组织中期分裂相细胞染色体分散开来，使我们在显微镜下可清晰地辨别每一染色体的形态结构 （ 李懋学，张敦芳， 11 1991）。 但影响染色体分散效果的因素很多。 内因包括具体植物细胞壁的成分性质、细胞质的粘滞度和染色体的大小；外因包括前处理和解离的适 当与否和操作者技术的掌握。 工具包括不锈钢尖镊子、一支铅笔、载玻片和盖玻片若干。 此外，还需酒精灯、双面刮胡刀片和滤纸等。 国产载玻片和盖玻片都不是很干净，如果想得到好的结果，建议认真清洗之。 方法是煮沸一锅（锅要干净）蒸馏水，加入适量无酶洗衣粉，而后将载玻片一片一片放入水中浸泡半个工作日，再一片一片取出，同时用干净纱布两侧擦洗，放自来水下流水冲洗掉洗衣粉泡沫，转入蒸馏水浸泡，最后放入标本缸，加入 70%酒精储存备用。 用之前取出，用新纱布擦干放入干净盒子中即可使用。 染色体压片用盖玻片为 20179。 20mm2至 24179。 24mm2。 很薄不能像 载玻片一样清洗，一般是直接放入 70%酒精中浸泡适当时间，用前纱布擦干即可。 操作之前应注意环境的洁净。 在压片时注意不能划片，并进行敲片（是染色体尽量分散），操作过 程因人而异，熟能生巧。 掌握两个过程，首先是细胞分散（但不破裂）， 其次是染色体分散。 2）制作永久封片 a) 冰冻揭盖片：现在一般使用液氮，用双面刀片撬起盖片，保留载片； b) 干燥：载片放入温箱（不超过 60℃）烘干 24 小时； c) 树胶封片：生物学制片专用胶，化学试剂公司有售，滴加树胶，加盖新的盖玻片； d) 干燥封固：室温或 3045℃温箱 （ 尤瑞麟， 2020）。 酶解去壁低渗法简介 如果感觉以上步骤之后镜检效果不是很理想可以考虑进行低渗，起作用是帮助细胞的解离，使细胞中染色体更易分散 （ 李国珍， 1985；刘祖洞， 1987）。 1）前低渗 经预处理的材料，倾去预处理液，直接加入 ， 25℃左右处理30分钟。 2）酶解去壁 吸除低渗液，加入 %的纤维素酶和果胶酶（ 1： 1）混合液， 37℃消化 10分钟。 3）后低渗 用同温蒸馏水将材料轻轻清洗 2— 3次去酶，然后在双蒸水中停留 10— 30分钟。 参考文献： [1] 李懋学，张敦芳 .植物染色体研究技术， 1991 [2] 刘祖洞《遗传学》上、下册，高教出版社， 1990 [3] 周云龙主编 . 植物生物学（第 2版） . 北京：高等教育出版社 , 2020 [4] 杨 继主编 . 植物生物学（第 2版） . 北京 : 高等教育出版社 , 2020 [5] 杨汉民 .细胞生物学实验，高等教育出版社， 1997 [6] 李树贤 .植物染色体与遗传育种，科学教育出版 [7] 尤瑞麟 .植物学实验技术教程 —— 组织培养、细胞化学和染色体技术 .北京大学出版社，2020 [8] 李国珍 .染色体及其研究方法，科学出版社。 ， 1985 [9] 李博主编 . 生态学 .高等教育出版社 ,2020 [10] 刘祖洞 .遗传学实验，高教出版社， 1987 [11] 洪德元 .植物细胞分类学，科学出版社， 1990 [12] 刘永安 ,冯海生 ,陈志国等 .植物染色体核型分析常用方法概述 [J].贵州农业科学 ,2020, 34(1):98～ 102 12 （ 二 ）成果情况 通过以上比较深入的理论学习，以及在我们实验过程中的实践论证，经过几周的不断改良，我们初步确定了能染上很好效果的染液配方，这样的配方配出的染液不仅可对 菊 科 风毛菊 属 的材料有良好的效果，对其他材料比如豆科 冬麻豆、膀胱豆、黄花木、银合欢， 桔梗科蓝钟花 、菊科 风毛菊 的种子都有良好的效果， 染色体着色深，细胞质着色浅，对比鲜明，有利于核型分析中染色体的计数与测量，对进一步开展实验有很好的保障。 具体配方如下： 1 卡宝品红配制方法 1) 原液 A：称 3g碱性品红溶于 100ml70%酒精（此液可无限期储存，不会变质）。 2) 原液 B：取 10ml原液 A与 90ml 5%苯酚水溶液混合，置 37℃温箱溶解 2— 4 小时（此液不稳定，限 2周之内使用）。 3) 原液 C：取原液 B 55ml与冰乙酸、甲醛各 6ml混合均匀 （此液也称为苯酚品红，也可进行染色，不过效果不好，染染得过深）。 4) 染色液：取原液 C 20ml，加入 80ml 45%冰 乙酸和 g山梨醇混合溶解 （此液也称为改良苯酚品红，两周后染色效果很好）。 该染色液配制后为淡品红色，如果立即使用染色较淡，放置 2 周后染色能力明显增强，而且放置的时间越久染色效果越好。 此液可在常温下存放 2年保持稳定不变质。 染色时采用滴染方法，在 应用该染色液 时 ，染色的效果与盐酸解离有密切关系。 2 地衣红 先配制 500ml 45%的醋酸水溶液，在电驴上加热煮沸 ，移去火源，缓缓 （切忌缓慢，否则喷溅危险） 加入 ，搅动溶解 ,待全部投入后再煮 12min，并加入一颗生锈的铁钉， 1min后取出。 此染液染上的细胞呈淡红色，染色体呈深红色，对比很良好，便于观察。 注意 地衣红易溶于酒精，制片不可用酒精脱水封片。 通过前期的实验准备及展开实验，比较相邻属的实验方法，进行梯度试验，不断总结，得到了以下处理菊科风毛菊属种子及 核型染色体研究的操作方案： 鉴于在实验室的现有条件和空间，不能对植株进行直接栽种培养，所以取材不能采用植株的芽尖、茎尖等分生区旺盛的部位，而是对种子进行萌发培养 ，这也是为了避免在同一植株上做该物种的核型研究，所用的种子来自同种不同居群，保证了得出的结论的代表性和科学性。 首先将 待测种子放入培养皿中两 层滤纸上，加水 至种子处于湿润的环境，保障种子发芽时所需的水环境。 然后将培养皿 置 于 2226℃ 的恒温箱中萌发 培养， 风毛菊属种子的萌发周期一般为 57 天， 810 天后根的长度就可达到实验取材时所需的长度 ，然后将长度适宜的幼根 取下 ，置于处理用的瓶子内， 室温下 用 8羟 基喹啉处理 45 小时， 此过程要严格避光，确保预处理的效果。 预处理之后再将材料用蒸馏 水冲洗三次， 于 4℃冰箱中卡诺氏固定液（无水乙醇： 冰 醋酸 =3： 1，现配现用 ）固定 1224 小时 ，因固定液易挥发，在处理时要换固定液 12 次。 固定好之后将材料用蒸馏水冲洗三次， 用 1mol/L 的 HCl 在 60℃下 水浴解离 1015min，解离时间的长短非常重要，直接影响着染色的效果和敲片后染色 体在细胞中的形态，所以严格控制好时间，时间一到马上进行下一步的处理。 解离好之后需用蒸馏水冲洗 6 次，目的是为了把残留在根尖上的盐酸清洗干净，染色时才不会受盐酸的影响，冲洗好之后用卡宝品红染色 812小时，就可进行压片镜检了，在 光学显微镜下观察， 低倍镜下找到细胞，再换至高倍镜下观察，找到中期细胞， 在 100 倍油镜下挑选分裂相清晰、染色体收缩长短适中、着丝粒明显的细胞进行拍照，保存细胞图片，其中间期、前期、中期、后 13 期、末期的细胞图都要有，以便进行接下来的核型分析。 并对 染色体分散良好、形态清晰 、中期细胞多 的片子 用树脂胶片封片制成永久封片在冰箱里保存。 同时 ，在 整个 实验进行中各个步骤所处理的时间是严格保证的，所以处理好一步之后就要做好下一步的准备，通常是设一个闹钟以提醒自己下一步的处理时间到了。 综上所述，经过改良的卡宝品红可以使风毛菊属 的材料染上很好的效果，以及经过实验探索得出的各个试验操作方法，可以得到预期的实验效果，拍到良好的核型分析图片，对接下来的实验有很好的指导作用。 二、 存在的问题和困难 1. 时间比较紧，周末从呈贡到本部实验室来回花费在车上的时间长，且公交比较难挤； 2. 染液效果不佳，改良试剂花 费周期较长，主要原因是试剂比较陈旧，有些已发生变质，造成 实验效果 无预期的好。 三 、有何建议和要求 1. 如果可能的话尽早将实验室搬至呈贡校区； 2. 重新购置一批新的药品 （比如国外产的地衣红）。 四 、学院意见 主管领导签名（盖章）： 年 月 日 14 以下是附加文档，不需要 的朋友下载后删除，谢谢 顶岗实习总结专题 13 篇 第一篇 :顶岗实习总结 为了进一步巩固理论知识，将理论与实践有机地结合起来，按照学校的计划要求，本人进行了为期个月的顶岗实习。 这个月里的时间里，经过我个人的实践和努力学习，在同事们的指导和帮助下，对村的概况和村委会有了一定的了解，对村村委会的日常工作及内部制度有了初步的认识，同时，在与其他工作人员交谈过程中学到了许多难能可贵经验和知识。 通过这次实践，使我 对村委会实务有所了解，也为我今后的顺利工作打下了良好的基础。 一、实习工作情况 村是一个（此处可添加一些你实习的那个村和村委会的介绍）我到村村委会后，先了解了村的发展史以及村委会各个机构的设置情况，村委会的规模、人员数量等，做一些力所能及的工作，帮忙清理卫生，做一些后勤工作；再了解村的文化历史，认识了一些同事，村委会给我安排了一个特定的指导人；然后在村委会学习了解其他人员工作情况，实习期间我努力将自己在学校所学的理论知识向实践方面 15 转化，尽量做到理论与实践相结合。 在实习期间我遵守了工作纪律，不迟到、不早退，认 真完成领导交办的工作。 我在村委会主要是负责管理日常信件的工作，这个工作看似轻松，却是责任重大，来不得办点马虎。 一封信件没有及时收发，很有可能造成工作的失误、严重的甚至会造成巨大的经济损失。 很感谢村委会对我这个实习生的信任，委派了如此重要的工作给我。 在实习过程中，在信件收发管理上，我一直亲力亲为，片刻都不敢马虎。 为了做好信件的管理工作，我请教村委会的老同事、上网查阅相关资料，整理出了一套信函管理的具体方法。 每次邮递员送来的信件，我都要亲自检查有无开封、损坏的函件，如果发现有损坏的函件，我马上联络接收人亲自 来查收。 需要到邮局领取的函件，我都亲自到邮局领取，并把信函分别发放到每个收件人的手里。 对于收到的所有信函，我都分门别类的登记，标注好收发人的单位、姓名还有来函日期等等。 我对工作的认真负责，受到了村委会领导和同事们的一致好评，在他们的鼓励下，我的工作干劲更足了。 在工作之余，我还经常去村民家里，帮助他们做一些我力所能及的事情，也让我收获了很多知识，学会了许多技能。 我学会了一些常见农作物的生长特征，也学会了怎么给农作物施肥，洒药。 这些，都将是我今后人生道路上的宝贵财富。 短短个月的实习生活很快就过去了，这次实习 是我从学校踏入社会的第一步。 在这里，我感受到了村民们的纯朴，也体会到了农村生 16 活的不易，更加深刻的认识到了作为当代大学生身上肩负的使命。 在这次实习生活中，村委会的叔叔、阿姨们对我十分的照顾，在工作中，在生活上都给予了我很多的帮助，也对我寄予了很高的期望。 通过这次实习，锻炼了我的做事能力，养成了对人对事的责任心，也坚定了我加强学习，提升自我价值的信心。 二、发现的问题和建议 在此次在村村委会顶岗实习的工作中，确实让我学到了不少书本以外的知识，同时我也发现了不少问题。 第一，该村村委会的工作人员文化水平相对偏低， 在村务工作的处理上，方式方法比较粗放。 第二，村委会工作人员思想比较守旧，缺乏对新事物、新观念的学习和认识。 第三，村委会的现代化办公水平还比较低，虽然配备了电脑等现代化办公工具，但是实际的利用程度很低。 第四，村委会人员由于不是国家编制，工作人员的工作热情和工作态度不是很积极。 三、实习的心得体会 刚开始去村村委会实习的时候，我的心情充满了激动、兴奋、期盼、喜悦。 我相信，只要我认真学习，好好把握，做好每一件事，实习肯定会有成绩。 但后来很多东西看似简单，其实要做好它很不容易。 17 通过实践我深有感触，实习期虽然很 短，却使我懂得了很。