菜花、肝脏dna的提取及琼脂糖凝胶检测内容摘要:
含脂高的样品需要做 减少物理因素对 DNA的降解。 动作轻柔缓慢 , 尽可能不要剧烈振荡或搅拌 , 除破碎细胞 , 使 DNA和蛋白分开时 60- 70℃ 水浴外 , 其余操作尽可能在冰浴上进行。 用枪吸核酸时最好用 1ml的枪和枪头 , 枪头必要时可用剪刀剪去一段 , 防止枪头对 DNA造成机械损伤。 加蛋白水解酶 :如提动物组织中的 DNA, 常加蛋白酶 K 三 .实验试剂 1, 5mol/L NaC溶液。 2,。 3, 25% SDS 溶液; 4, 24:1 氯仿-异戊醇混合液; 5, 3mol/L 乙酸钠- ; 6, 95%乙醇; 7, 10 X TBE。 8, EB(溴乙啶)。 9,溴酚蓝指示剂 四 . 实验步骤 (一) DNA提取 1,称取 肝脏或者菜花 5g,用水清洗后,加入石英砂 (半匙 )研磨 ,再加入 14ml EDTA溶液,继续研磨至浆状,分装两管,平衡后对角线放入离心机, 4000 rpm离心10 min,所得沉淀即为核糖核酸粗制品. 2,上述沉淀物加入 EDTA溶液6 ml,再加入 25% SDS ml(分开两管), 60℃ 保温 1。菜花、肝脏dna的提取及琼脂糖凝胶检测
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