第七章工业发酵染菌的防治内容摘要:

空气系统有菌 停电罐压跌零 接种 蒸汽压力不足或蒸汽量不足 管理问题 操作违反规程 种子带菌 原因不明 染菌的原因有多种,对于实际情况如何分析呢。 单罐染菌 不是系统问题,而是该罐本身的问题。 如种子带菌、培养基灭菌不彻底、罐有渗漏、分过滤器失效 多罐染菌 系统问题,如空气过滤系统有问题,特别是总过滤器长期没有检查,可能受潮失效;移种或补料的分配站有渗漏或灭菌不彻底 前期染菌 种子带菌、培养基灭菌不彻底 中后期染菌 补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏,一般不会是种子问题 检查与判断  表观法:  溶氧水平  排气中 CO2  实验法:  镜检法  平皿划线或斜面检查法  肉汤培养法 1)防止种子带菌 4 染菌的预防 种子带菌的原因 ① 灭菌不彻底 (如假压 ); ② 移种污染; ③ 养或保藏过程中污染; ④ 无菌室管理不善; 制备壮、纯、量足的种子是发酵成功的关键,为此: • 强化无菌室的管理 (使用前灭菌 ); • 严格接种、移种的无菌操作; • 在扩培各阶段定时取样做无菌实验; • 严格接种管灭菌,并用无菌空气保压; 无菌状况的检测 环境无菌的检查 尘埃粒子检测 无菌平板检测 无菌室要求  打开紫外灯,照半小时,关灯后 15分钟再接种。  消毒药水擦桌子、拖地,开启超净台的通风,  接种时必须在超净台上操作,保证无菌条件。  接种人员必须穿好无菌服,戴好口罩,手用酒精棉球擦干净。 种子及发酵液无菌状况检测 梭状芽孢杆菌 双球菌 T4噬菌体 细菌 2)防止空气引起的染菌 流程或设备设计的合理性; 过虑介质选用、装填; 过虑介质的灭菌和管理; 从日本工业技术院和上海第四制药厂分析空气带菌而造成的染菌分别为 %和 26%。 空气除菌系统复杂,环节多,偶遇不慎便会导致空气除菌失败。 空气过滤除菌设备流程 空压机 储罐 二级冷却 加热器 空气过滤 粗过滤 空气冷却器的列管穿孔泄露,冷却水会渗入到空气中,造成染菌。 棉花 活性炭过滤器长期使用后变薄的一边失效。 过滤介质受潮失效:过滤器灭菌完毕应立即缓慢通入压缩空气,将水分吹干。 超细纤维纸作过滤介质,灭菌时必须将管道中冷凝水放干净,以免介质受潮失效。 在生产实践中,空气管道大多与其它物料管道相接,要装上止逆阀防止其它物料窜入空气管道污染过滤器,导致过滤介质失效。 3)防止培养基灭菌不彻底 培养基灭菌方法 —— 高压蒸汽灭菌 分批灭菌 121℃ , 30分钟 连续灭菌。
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