禽流感的流行、诊断与防治内容摘要:
不仅是发病禽的确切诊断方法,而且是免疫禽群的主要监手段。 病料的采集 可以从活体或尸体进行病原的分离和鉴定。 用棉拭子法常可从活体的气管和泄殖腔中分离到病毒 ,特别是从泄殖腔中分离到病毒的机会较多,为此可用不同大小的棉拭子擦取气管或泄殖腔, 尽量使棉拭子擦到深部 ,并能刮取泄殖腔粘膜表面的滤泡,以获得足量的材料。 病料的采取时间很重要,一般在感染初期或发病急性期采取。 如转为后期则因机体已形成足够的抗体而不易分离到病毒。 死禽采集气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。 小珍禽用拭子取样易造成损伤,可取而代之以采集新鲜粪便。 病料的保存 病料应放在含有抗菌素的 pH值 ~ 渗 PBS内(无 PBS可用 25%~ 50%的甘油盐水),若短时间内不能处理可于低温条件下冻存。 琼脂扩散( AGP)试验 AGP试验用抗原是用所有 A型禽流感病毒共有的核蛋白( NP)抗原制成的,可以用来检测所有 A型流感病毒(目前有 15种血凝素亚型)产生的抗体。 该方法只适用于未免疫鸡群禽流感抗体的监测 ,方法简单、操作方便,但敏感性稍差。 注意: 该方法不适用于水禽血清抗体的检测,水禽禽流感抗体检测应该用 HI试验。 配琼脂时应先将琼脂充分溶化后再放入盐,否则琼脂不易溶解。 AGP试验结果 1 2 3 4 5 6 7 血凝( HA) — 血凝抑制( HI)试验 该方法适用于禽流感病毒血凝素亚型的鉴定以及感染或免疫后血清中抗体的检测,敏感性比 AGP试验高,但只有当抗原和抗体的血凝素亚型完全一致时才会出现 HI现象。 进行禽流感的监测时,当 HI抗体在判定标准的可疑范围之内时,需一周后再采血进行检测。 对于免疫鸡,可以采集发病期及发病 23周后的血清作对比检查,测其抗体水平,如果康复期的血清抗体较发病初期升高 4倍以上,可以认为是禽流感发生。 进行血清学检测时首先要了解该鸡群的免疫状况,避免简单地将疫苗抗体误认为是感染抗体。 注意: 反应温度不能太高,若在 37℃ (如温箱)下进行,会影响检测结果,应在 25 ℃ 以下的室温或在 4℃ 冰箱中作用。 NASBA、 RT PCR诊断技术 NABSA方法可用来进行 H5禽流感病原的快速检测,香港在 1997年发生 H5禽流感感染人事件后,加强了对该病的监测,在世界上率先使用这一方法,在全国兽医界,浙江率先使用。 RTPCR灵敏度相对较差,从病料中的检出率较低,但检测尿囊液有足够的灵敏度,并且可以通过对 HA裂解位点的序列分析对毒株的致病性做出初步判断,以便争取时间在短时间内采取措施。 同时,对 PCR产物进行序列分析,可以进行禽流感病毒分子遗传变异的比较。 禽流感的预防和控制 ★ 疫苗免疫 ★ 疫情监测及检疫 ★ 及时发现和扑灭疫情 ★ 综合防治 ★ 疫苗免疫 ●概述 疫苗免疫是预防和控制禽流感最经济、最有效的途径。 禽流感病毒抗原具有多样性,各亚型之间的抗原性存在一定的差异,亚型间缺乏坚强的交叉保护作用。 我国主要流行的是 H5和 H9亚型禽流感,目前必须(而且只需)做好 H9和 H5亚型禽流感的预防工作。 对鸡群进行大范围的免疫、增强对外来病毒侵袭的抵抗能力的同时,必须做好水禽 H5亚型禽流感的防疫工作,不仅可以减少水禽本身的发病率和死亡率,而且可以减少带毒水禽对环境的污染及对鸡的传播。 出口肉禽原则上是不能进行禽流感疫苗免疫的 (香港除外 )。 所用疫苗必须是经 农业部批准使用的禽流感疫苗( HH9),由省级动物防疫监督机构统一组织供应。 ● 影响疫苗免疫效果的因素。禽流感的流行、诊断与防治
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