实验八sds-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质内容摘要：
(b)缓冲体系离子成分及 pH值的不连续性； 在 前导离子或快离子： HC1解离出的氯根 (C1) 尾随离子 (trailing ion)或慢离子：甘氨酸根 mclclmppmGG(Cl代表氯根 ， P代表蛋白质 ， G代表甘氨酸根 )有效迁移率 =m， m为迁移率 ， 为解离度 ) 当进入 ， 甘氨酸解离度增加 ， 其有效迁移率超过蛋白质； （ c)电位梯度的不连续性： (2)分子筛效应 (3)电荷效应 图 4 电泳过程示意图 A为电泳前 3层凝胶排列顺序， 3层胶中均有快离子，慢离子 B显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。 C显示蛋白质样品分离成数个区带。 图 5 不连续系统浓缩效应示意图 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 （ SDSPAGE） ：蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳时 ， 它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。 如果在丙烯酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称 SDS)， 则蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量 ， 而与所带电荷和形状无关。 因此可以利用 SDSPAGE测定蛋白质分子量。 三、试剂与器材 试剂： 10%SDS、 凝胶贮液（ 30％ %Bis)、分离胶缓冲液（ mol/L － HCl 缓冲液）、 浓缩胶缓冲液（ mol/L － HCl 缓冲液）、 10%过硫酸铵、 10%TEMED、 、 1%琼脂糖溶液、 ％考马斯亮兰 R250 、 7%醋酸 器材：垂直板电泳槽、稳压稳流电泳仪 、脱色摇床 五 、 操作方法 夹心式垂直板电泳槽 (1)装上贮槽和固定螺丝销钉 ， 仰放在桌面上。 (2)将长 、 短玻璃板分别插到凵形硅橡框的凹形槽中 ，注意勿用手接触灌胶。阅读剩余 0%
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