8味单药提取液体外抑制未孢子化卵囊成熟的研究设计与记录(编辑修改稿)

8味单药提取液体外抑制未孢子化卵囊成熟的研究设计与记录(编辑修改稿)内容摘要：

实验 目的 从感染了柔嫩艾美尔球虫的 鸡 的 粪便中回收 球虫 卵囊 实验材料 洗洁精 ( 5ml ) 生产厂家：广州立白企业集团有限公司 批号： 70140215K70118 乙酸 (5ml)生产厂家：太原溶剂厂 批号： HG310957食盐生产厂家：山西省盐业公司 批号： GF61080210009凉开水 (1桶 ) ： 天平 (HCTP12A20)，玻璃棒（ 4个）、 18目筛（ 1mm）、 80目筛（孔径约 ）、200目筛（孔径约 ）、离心机 3个（ DD5M aida）（ Anke LXJIIB）（ LXJⅡ）、烧杯 15个、 15ml离心管 6支、血球计数板 1个 、麦卡玛斯特计数板 1个、温箱 (XMTD MC12810132)、显微镜（ XSP24N ）、滴管 3个、载玻片若干、盖玻片若干。 配方：含 ％的洗洁精和 %乙酸、灭菌水； 配制过程：取一个 500ml的烧杯按顺序加入 （凉白开水） + +乙酸。 3 实验方法和步骤 ： 将新鲜粪便先用少量生理盐水浸湿，并搅开粪块，然后用 10倍的生理盐水浸泡并不时地搅拌，直到粪便中的卵囊大部分溢出到水中（大约 1 小时）。 先用60目筛过滤，后用 200目筛过滤粪便，过滤三次。 第一次过滤后剩余粪便用 5倍于粪便的生理盐水稀释并搅匀后再过滤，第二次过滤后剩余粪便用 3倍于粪便的生理盐水稀释并搅匀后再过滤。 取盲肠内容物：用剪刀将盲肠纵向剪开，刮取盲肠内容物置于离心管中。 将盲肠置于盛有适量生理盐水的研钵中轻研磨、冲洗（重复三次）。 并将每次的洗液倒入离心管中。 粪便滤液或盲肠内容物悬浮液的处理： 将上述得到的粪便滤液或盲肠内容物悬浮液放到离心管里，加生理盐水到离心管的 3/4，并加入 ％的洗洁精。 20xxr/min离心 10分钟，检上清，无球虫 时弃上清（将上清倒入另外高压过的离心管里进行检测）；于沉渣中加少量生理盐水并将沉渣搅开，再加生理盐水到离心管的 3/4，离心，重复洗 3次。 球虫卵囊的漂浮： 向上述离心所得的沉淀中加 10 倍量饱和盐水（比重 ）（先加少许，混匀后再加其余的）， 1500 转 /分离心 5 分钟，收集上清液；再重复漂浮 1～ 2 次，检查沉渣，当沉渣中没有或仅有少量球虫时，弃掉沉渣。 最后把离心所得饱和食盐水混合。 ： 将上述上清液用生理盐水 7倍稀释， 2500r/min离心 10分钟，检上清，无球虫时弃上清，收集沉淀物（卵 囊）。 第 6 页 共 10 页 卵囊计数 每 ml滤液卵囊数计数方法 ①称取 10ml滤液。 ②取 50ml饱和盐水，加入 10ml滤液中。 ③混匀，用吸管吸取少量混合液体，加入计数室内（液体要充满计数室但不要溢出），放于显微镜载物台上，静置 1～ 2分钟。 ④在低倍镜下（ 10 10）数完两个计数室内见到的全部虫卵，取平均值乘以 40，即为每ml滤液中的虫。