人感染猪链球菌病样品采集运送与实验室检测方案

人感染猪链球菌病样品采集运送与实验室检测方案内容摘要：

验室后立即进行分离。 • 在标本采集过程中，注意安全防护。 使用一次性隔离服、 乳胶手套 、防护口罩 • 采取预防措施，防止针头等 锐器刺伤 • 如发生伤口意外暴露，应及时清洗和消毒，并预防性服药 实验室检测 •猪链球菌检验程序 •推片镜检 •分离鉴定 •检测要点 猪链球菌检验程序 病人检样（脑脊液、血液等） 增菌培养 （脑心肉汤 /牛血清葡萄糖 肉汤 /血培养瓶） 革兰氏染色 触酶试验 推片镜检 猪链球菌检验程序 (续 ) 羊血琼脂平板 （ 37℃ ， 5%CO2， 24h） α 溶血 (偶而也有弱 β 溶血 ) PCR检测 血清学检测 生化鉴定 推片镜检 • 抗凝血或脑脊液可推片革兰氏染色镜检 • 阳性标本可见中性粒细胞内吞噬颗粒，偶尔可见革兰阳性球菌 感染鼠尾血推片 感染兔心脏血推片 分离鉴定 • 血平板直接接种 – 新鲜羊血琼脂平板 /含 8%新生牛血清的营养琼脂平板 – 血或脑脊液等标本 • 直接接种 – 组织标本 • 可直接涂抹平板或剪碎用无菌生理盐水洗涤，洗液接种平板 • 置 37℃ 5% CO2培养箱或者烛缸中培养 24小时 分离鉴定 • 增菌培养 – 待检标本置约 10倍体积脑心肉汤 /含 8%新生牛血清葡萄糖肉汤（附配方 ） /商品化血培养瓶中增菌培养 37℃ 24小时 – 增菌培养物接种新鲜羊血琼脂平板，置37℃ 5% CO2培养箱或者烛缸中培养 24小时 – 如果是 污染标本 ,则要接种于选择增菌培养液（含 15微克 /毫升多粘菌素 B， 30微克 /毫升萘啶酮酸的脑心培养基）进行增菌 附：葡萄糖肉汤（含 8%新生牛血清） 成分： • 酵母浸膏 3克 • 10%葡萄糖溶液 20毫升 • 枸椽酸钠 3克 • 磷酸氢二钾 2克 • 牛肉汤 900毫升 • %硫酸镁 20毫升 • %对氨苯甲酸 5毫升 • 新生牛血清 80毫升 附：葡萄糖肉汤（含 8%新生牛血清）。