第十章化学发光免疫分析技术内容摘要:
电化学发光剂,它和电子供体三丙胺( TPA)在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。 三联吡啶钌 电化学发光剂反应原理 ㈡ 酶促反应发光剂: 是利用标记酶的催化作用,使发光剂(底 物)发光,这一类需酶催化后发光的发光剂 称为酶促反应发光剂。 1.鲁米诺及其衍生物 2. AMPPD 1.鲁米诺 鲁米诺发光原理 鲁米诺增强发光反应原理 2. AMPPD 〔 3(2‘螺旋金刚烷 )4甲氧基 4(3“磷酰氧基 )苯 1,2二氧杂环丁烷 〕〕 1. 碳二亚胺( EDC)缩合法 二、发光剂的标记技术 2. 过碘酸钠氧化法 3.重氮盐偶联法 4. N羟基琥珀酰亚胺活化法 1.发光剂的选择 2.被标记蛋白质的性质 3.标记方法的选择 4.原料比 5.标记率 6.温度 7.纯化与保存 影响标记的因素 第三节 化学发光免疫分析的类型 用吖啶酯直接标记抗体 (抗原 ),与待测标本中相应的抗原 (抗体 )发生免疫反应后,形成固相包被抗体 待测抗原 吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂( H2O2)和NaOH使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光。 由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。 一、直接化学发光免疫分析 发光 磁微粒 被测抗原 + 抗体 + 带丫啶酯标记物抗体 冲洗后 夹心法 ( 1) 加入 H2O2 ( pH10) ( 2) 加入碱 ( pH10) 直接化学发光的机理 磁 微粒 模式图 Y 特点 – 抗原和抗体结 合与未 结合部分 的 易 分离 磁微粒 技术 化学发光酶免疫分析 ( chemilumi。第十章化学发光免疫分析技术
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