如何选择hplc溶剂内容摘要:
, 用于分析组分数目多 、 性质差异较大的复杂样品。 采用梯度洗脱可以缩短分析时间 , 提高分离度 , 改善峰形 , 提高检测灵敏度 ① 溶剂的互溶性 , 不相混溶的溶剂不能作为梯度洗脱的流动相。 当有机溶剂和缓冲液混合时 , 可能析出盐的晶体 , 尤其使用磷酸盐时需特別小心 ② 纯度要求更高 , 以保证良好的重现性。 进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱 , 以辨认溶剂杂质峰 , 因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。 用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气 , 以防止混合时产生气泡。 ③ 防止压力过大。 混合溶剂的粘度常隨组成而变化 , 因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。 例如甲醇 和水 粘度都 较小 , 当 二者 以相近 比例 混合 时粘 度增大 很多。 SpectrumHPLC溶剂特点 ※ 超越 ACS标准 ※ 低紫外吸收背景 ※ 低水分,低蒸发残渣 ※ 提供良好的梯度性能 ※ 不同批次产品的质量稳定 ※ 随货附全套检测报告 HPLC溶剂的选择 反相液相色谱 (柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种。 适用于非极性 中等极性组分) 固定相:极性小的烷基键合相 C8柱, C18柱 流动相:流动相极性 固定相极性 极性大的甲醇 水或乙腈 水 HPLC溶剂的选择 反相液相的流动相一般用水或缓冲液,常加入 有机改善剂 ,如:甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、异丙醇等与水互溶的有机溶剂以调整保留时间,也常加入 离子对试剂 使 被測組分与反离子形成中性离子对以改善分离。 分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用 50mmol/L磷酸盐缓冲液和 1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和 30mmol/L三乙胺溶液。 * 能够作为液相色谱流动相使用的溶剂有 100多种,但实用的溶剂只有少数几种。 *一般情況下, 甲醇 水系统 可以满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小,价格低,是反相色谱最常用的流动相。 乙腈性能优于甲醇。 *在实验室中有了 甲醇、乙腈、水、四氢呋喃、正己烷、异丙醇、二氯甲烷 ,就能够解決 9O%以上的色谱分离问题。 SpectrumHPLC溶剂 SpectrumHPLC溶剂 Spectrum HPLC缓冲试剂 Spectrum HPLC Buffer。如何选择hplc溶剂
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