如何从海洋中运用生物技术方法寻找新的酶刘明明内容摘要:
学的研究过程 基因提取 纯化特定 DNA进行克隆 插入载体 导入宿主细胞 序列和功能筛选 宏基因组学的技术方法 DNA的提取及基因或基因组 DNA 的富集 原位裂解法 原位裂解法主要是通过去污剂处理、酶解法、机械破碎法、以及高温或冻融法等直接破碎样品中的微生物细胞而使 DNA得以释放。 此法操作简单,成本低, DNA提取率高。 异位裂解法 先从样品中分离出细胞,再对细胞进行裂解,此法处理条件温和,所得 DNA纯度较高,但操作繁琐,成本高, DNA提取率低。 2. 载体 宏基因组文库的构建需要适宜的克隆载体 通常用于 DNA克隆的载体主要包括质粒 (Dlasmid)、粘粒 (cosmid)和细菌人工染色体 (BAC)等。 质粒一般用于克隆小于 10 kh的 DNA片段,适用于单基因的克隆与表达。 粘粒 (大部分是用。如何从海洋中运用生物技术方法寻找新的酶刘明明
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