hbvdna定量检测内容摘要:
Ct值 , C代表 Cycle, t代表 threshold, Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。 Ct值分析实际上就是低浓度的荧光值分析。 由于是低浓度 , 影响因素小 , 所以具有良好的重现性。 研究表明 , 每个模板的 Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系 , 起始拷贝数越多 , Ct值越小。 利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线 , 其中横坐标代表起始拷贝数的对数 ,纵坐标代 Ct值。 因此 , 只要获得未知样品的 Ct值 , 即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。 荧光信号的检测方法: DNA结合染料技术 水解探针技术( TaqMan probe)技术 杂交探针技术 分子信标 The biggest disadvantage of SYBR is that it binds to any dsDNA。 the specific product, nonspecific products and primer dimers are detected equally well. The LightCycler Instrument allows melting curve analysis Once the melting point of the product has been determined the LightCycler Instrument39。 s flexible programming allows the user to acquire fluorescence above the melting temperature of the primer dimers, but below the melting。hbvdna定量检测
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