论文资料-谷氨酸发酵工艺流程1word可编辑

论文资料-谷氨酸发酵工艺流程1word可编辑内容摘要：

l％，氯化钠 ％，琼脂 2％，。 ：葡萄糖 ％，玉米浆 ％；，尿素 ％，磷酸氢二钾 0． 12％，硫酸镁 ％，。 ：葡萄糖 12％，玉米浆 ％，磷酸二氢钾 ％，硫酸镁％，。 摇瓶复筛发酵培养基：葡萄糖 18％，玉米浆 ％，甘蔗糖蜜 ％，磷酸二氢钾 ％，硫酸镁 ％．。 培养方法 斜面菌种： 32～ 33℃ 培养， 22h。 一级种子： 32—33℃ 培养，往复式摇床，冲程 76mm，转速 100r／ min， 9h。 摇瓶发酵：往复式摇床，冲程 80mm。 装量： 20ml／ 500ml 三角瓶。 接种量： 5％。 生物工程 课程论文 6 转速：前期 100r／ min，第一次加尿后 125rJmin。 温度：前期 32～ 33℃ ，后期 34～ 350C。 转速：前期 100r／ min，后期 125dmin。 pH： 40％尿素控制。 分析方法及分析仪器 谷氨酸： YSI 一 2700 生物传感器。 谷氨酸菌种的分离 挑一环生产斜面到装有生理盐水，、小玻璃珠三角瓶中，振荡摇匀，稀释， 10。 5～ 10。 6 涂平板 _挑选 30 个单菌落移接到生产斜面上 (每个菌落接 2 支斜面 )培养 48h_其中 30 支斜面存人超低温冰箱保存，另外相同顺序编号的 30 支斜面则进行摇瓶产酸试验。 初筛 每株两瓶分三批进行初筛。 发酵周期 24h。 放瓶后，测定谷氨酸含量。 从中选出产酸较高的 6 株。 复筛 经初筛选出 6 株，继续进行摇瓶复筛试验。 发酵周期 46h，以生产菌作为对照，共进行了 3 次对比实验。 并选出产酸最高的两株。 现在微生物广泛应用于工农业生产、医药卫生及国防事业，但微生物 的世代时期一般是很短的，在传代过程中易发生变异甚至死亡，因此常常造成工业生产菌种的退化，并有可能使优良菌种丢失。 所以。 菌种是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料，特别是利用微生物进行生产。 所以菌种保藏是入行微生物研究和微生物育种工作的重要组成部分。 其任务首先是使菌种不死亡。 同时还要尽可能设法把菌种的优良性状保持下来而不致向坏的方面转化。 研究菌种保藏就是要采用最合适的保存方法 ，使菌种的变异和死亡减少到最低限度。 菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点。 使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。 一般可通过保持培养基营养成分在最低水平、缺氧状态、干燥和低温，使菌种处于 “休眠 ”状态，抑制其繁殖能力。 菌种的保藏方法很多一般有一面几种： 生物工程 课程论文 7 斜面保藏是一种短期、过度的保藏方法。 用新鲜斜面接种后在最适条件下培养得到菌体或孢子 生长丰满后，放在 4度冰箱保存。 一般存期为三到六个月。 适合于产孢子或芽孢的微生物。 先将沙与土洗净烘干过筛后。 将沙与土按（ 1~2）： 1混合均匀。 分装于小试管中，装料高度大约为 1cm左右。 121度间歇灭菌 3次，灭菌实验合格后烘干备用。 一般沙用 80目过筛，土用 80~100目过筛。 其次，将斜面孢子制成孢子悬浮液接入沙土中或将斜面豹子刮下直接与沙土混合置干燥器中用真空泵抽干 ,放在冰箱内保存 .一般保存期为 1年左右 . 法 对于不产孢子或芽孢的微生物，一般不用沙土管保藏。 为了方便，可以采用甘油菌丝速冻法。 由于该法的保藏温度为 20℃ ，为了避免微生物受损伤致死。 需要甘油作为保护剂。 先配置浓度为 50%的甘油溶液。 121℃ 灭菌；再制备浓度为 108 ~ 810 个 /mL的菌悬液；最后将菌悬液和甘油溶液以等体积混合均匀后，置于 20℃ 保藏。 向培养成熟的菌种斜面上倒渗入渗出一层灭过菌的石蜡油，用量要高出斜面 1cm，然后保存在冰箱中。 此法可适用于不能利用石蜡油作碳 源的细菌、霉菌、酵母等微生物的保存。 保存期约一年左右。 真空冷冻干燥保藏法是目前常用的较理想的一种方法。 其基本原理是在较低的温度下（ 18℃ ），快速的将细胞冻结，并且保持细胞完整。 然后在真空中使水分生华。 在这样的环境中，微生物的生长和代谢暂时停止，不易发生变异。 因此，菌种可以保藏很长时间，一般五年左右。 这种保藏方法虽然需要一定的设备，要求亦比较严格。 但由于该方法保藏效果好，对各种微生物都适用，所以国内外都普遍适用。 此法是适用范围最广的微生物保藏法。 尤其是不产孢子的菌丝体用其他保存方法不当可用此法保存效果较好保存期最长。 用液氮能长期保存菌种，这是因为液氮的温度可达 196℃ ，远遥低于其新陈代谢温度（ 130℃ ），所以此时菌种的代谢活动已停止，化学作用亦随之消失。 液氮超低温保藏法简便易行，关键是要有液氮灌、冰箱设备。 该法要点是：将要保藏的生物工程 课程论文 8 菌种置于 10%甘油中，密封与安剖内，先将菌液降至 0℃ ，再以每分钟降低 1℃ 的速度，一直将至 35℃ ，然后将安剖放入液氮罐中保存。 法 适用于一些难于用常规方法保藏的动植物病原体和病毒。 化学法 化学药品灭菌法。