常用培养基制备、灭菌与消毒-微生物分离、纯化及培养技术(编辑修改稿)

常用培养基制备、灭菌与消毒-微生物分离、纯化及培养技术(编辑修改稿)内容摘要：

挑菌落：转至斜面，检查是否一致，保存。 平板划线法： 倒平板 ， 标记培养基名称 ， 编号和实验日期。 划线方法 稀释混合平板法 ： 先加菌 倒平板时注意培养基温度 混合均匀 微生物培养技术 斜面接种 液体培养基接种 穿刺接种 将已接种的斜面、半固体和液体培养 基放置培养箱中培养 将生长好的菌种用牛皮纸包好，置 4℃冰箱中保存。 实验三、菌种保藏 几种常用的保藏方法： 传代培养法 保藏的菌种通过斜面、穿刺或疱肉培养基（用于厌氧细菌）培养好后，置 4C˚冰箱中存放，定期进行传代培养、再存放。 可用胶塞代替棉塞或在斜面上覆盖一层无菌液体石蜡来进一步延长保存期。 载体法 使生长合适的微生物吸附在一定的载体上进行干燥。 常用的载体有土壤、砂土、硅胶、明胶、麸皮、磁珠和滤纸片等。 悬液法 将细菌、酵母菌细胞悬浮在一定的溶液中保存。 溶液包括蒸馏水、糖溶液、磷酸缓冲液、食盐水等。 冷冻法 使菌种始终存放在低温环境下的保藏方法。 包括低温法和液氮法。 此法关键是要克服细胞的冷冻损伤。 注意控制降温速率及保护剂的使用。 真空干燥法 这类方法包括冷冻真空干燥法和 L－干燥法。 冷冻真空干燥法是将要保藏的微生物样品先经低温预冻，然后在低温状态下进行减压干燥。 L干燥法则不需要低温预冻样品，只是使样品维持在 10－20C˚范围内进行真空干燥。 操作方法 斜面保藏法 将菌种转接在适宜固体斜面培养基上，待其充分生长后，用牛皮纸将棉塞部分包扎好（棉塞换成胶塞效果更好），置 4C˚冰箱中包藏。 保藏时间依微生物的种类而定。 霉菌、放线菌及芽孢菌保存 2－ 4个月移种一次，酵母菌间隔两个月，普通细菌一个月，假单胞菌两周传代一次。 此法优点是操作简单、使用方便，缺点是保藏时间短、易被污染。 液体石蜡保藏法 将无菌石蜡加在已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端 1CM为准，使菌种与空气隔绝。 将试管直立，置低温或室温下保存。 此法实用且效果较好。 霉菌、放线菌、芽孢菌可保藏两年以上，酵母菌可保藏 1－ 2年，普通细菌也可保藏 1年左右。 穿刺保藏法 按穿刺接种方式培养菌种，菌种长好后用胶塞封严，置 4℃ 冰箱存放。