毕业论文中英文文献翻译生物技术专业毕业论文

毕业论文中英文文献翻译生物技术专业毕业论文内容摘要：

SspI, StuI, StyI and XbaI)消化双亲型 LDN(DIC6B) 和 LDN 的基因，并用 Southern 印迹映射组成 DNA 的RFLP。 比较绘图 使用下面的方法，鉴定了来自 64kb 共线性水稻序列的水稻基因和他们的小麦纯合子，预测开放阅读框 (ORFs)，从 TIGR automatic annotation ( 和 Gramene ( //内含子界限。 通过使用蛋白和 DNA 数据库， EST 数据库，使用 BLASTN, BLASTX, BLASTNP 对预测编码区的可能进行了测验。 在 TIGR 和 TREP 数据库中研究 BAC AP005647 的水稻阅读框预测小麦纯合体序列，消除预测蛋白的重复元素。 物理图谱 RSL65,四倍体小麦 BAC 文库的 28 个高密度过滤器，通过使用 GpcB1 杂交探针，发现其上面 30cm的 DIC 6SBS 染色体片段包含了高 GPC 基因 (Cenci et al., 2020)。 通过 PCR 和 southern 印迹验证了正向的 BAC 克隆。 为了建立 BAC 克隆的基因位点区域，用基因特异性引物对 N6AT6B 和 N6BT6A 试验。 用 SNapshot labeling kit 试剂盒和毛细管电泳法辨别了 BAC 的正向克隆。 沈阳农业大学学士学位论文外文翻译 4 BAC 的末端排序 BAC 的末端排序使用参照 DNA walking SpeedUP kit 说明书方法进行 ，载体的引物根据pIndigoBAC536 BAC 载体序列设计。 包括 Outer T7end 5′ GTTTTCCCAGTCACGACGTT3′ , Inner T7end 5′ ACGACTCACTATAGGGCGAAT3′ , Outer SP6end 5′ TGTGGAATTGTGAGCGGATA3′ , and Inner SP6 end 5′ CGCCAAGCTATTTAGGTGACA3′ .依据试剂盒的提供的 ACP 去捕获未知的目标序列位点。 使用这种方法，我们能扩增 4005000bp 的片段， 这些产物进琼脂糖凝胶纯化，用 pGEMT 试剂盒克隆，并测序。 结果 坚 定了来自水稻低拷贝数量的候选基因 来自 2 号染色体的 64kb 染色体片段与小麦 的 GpcB1 区域呈共线性 (Distelfeldet al., 2020),包括 11 个推测的基因，其中 4 个在 TREP 数据库或 TIGR 数据库未知转座子元件有重要相似性，其中的 2 个与别的蛋白或是植物中的任何 EST 无重大的相关性。 通过 (Table 1).揭示了五种水稻和小麦的重要相似性。 设计的基因引物成功的扩增出了来自 LDN 的基因 DNA 的 4 个 ESTs。 4 个 ESTs 的 PCR产物作为探针 ,在 southern 印迹法中杂交用限制性内切酶消化的双亲型 DNA。 EST BQ609014 杂交结果出现多条带表明该基因是一个多基因家族，而其余三个 ESTs 出现一条带或两条带，表明是单拷贝或是多拷贝基因。 尽管大量的限制性内切酶被筛选，在双亲线中没有发现多态性。 因此， PCR 标记比ESTs 标记更成熟。 PCR 标记在 BQ789353, BE444066 和 AL826407 中的应用 BQ789353 引物扩增出 466bp 产物， 通过 466bp UHW83 探针发现了 8 个确定的 BAC 克隆，只有一 个属于 B 基因组。 用 HindIII 酶切包含 BAC 的 BAC 770E02 出一个 5500kb 的片段，并测序。 通过 CAPS标记找到了一个单核苷酸多态性 SNP。 用限制新内切酶 HaeIII得到 LDN(DIC6B)的 307bp和 106bp 片段， LDN 的 413bp 片段。 这种多态性被用于 Xuhw83 作图。 BE444066 按（表 1）使用设计的引物从 LDN 从得到了 750bp 片段，用限制性酶 StyI酶切 DIC 得到 432bp 和 117bp 片段， StyI 酶切 LDN 得到 549bp 片段，这些与 GpcB1 位点重要联系多态性被用于 Xuhw83 作图。 AL826407 使用 HindIII 消化 AL826407。