药物分析与检验技术实训指导书

药物分析与检验技术实训指导书内容摘要：

加入管中。 自“加 10%氯化钾溶液„„”起同 制备。 检查 供试管与阳性对照管比较，记录结果。 亚硝酸盐 供试管的制备 用量筒取本品 10 ml，置纳氏比色管中，用移液管取 1 ml 对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（ 1→ 100）及 1 ml 盐酸萘乙二胺溶液（ → 100）加入管中，摇匀。 标准亚硝酸盐溶液制备 在万分之一天平上称取亚硝酸钠 g（按干燥品计算），置 100 ml 容量瓶中，加水溶解，并稀释至刻度，摇匀；用移液管取 1 ml，置另一 100 ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；再从第二个容量瓶中用移液管取取 1 ml，置另一 50 ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1 ml 相当于 1 μ gNO2）。 阳性对照的制备 用吸量管取标准亚硝酸盐溶液 ml，置纳氏比色管中，再用吸量管取 ml 无亚硝酸盐的水加入纳氏比色管中。 自“加对氨基苯磺酰 胺的„„”起同 制备。 检查 供试管与阳性对照管比较，记录结果。 氨 供试管的制备 用量筒取本品 50 ml，置纳氏比色管中，再用吸量管取 2 ml 碱性碘化汞钾试液加入管中，摇匀，放置 15 分钟。 氯化铵溶液制备 在万分之一天平上称取氯化铵 ㎎，置 1000 ml 容量瓶中，加无氨水适量使溶解并稀释成刻度。 阳性对照的制备 用吸量管取氯化铵溶液 ml，置纳氏比色管中，再用量筒取无氨水 48 ml 加入管中，再用吸量管 取 2 ml 碱性碘化汞钾试液加入管中，放置 15 分钟。 检查 供试管不显色，如果显色，与对照管比较，记录结果。 9 二氧化碳 用量筒取本品 25 ml，置 50 ml 具塞量筒中，用量筒取氢氧化钙试液 25 ml 加入具塞量筒中，密塞振摇、放置 1 小时，记录结果。 易氧化物 用量筒取本品 100 ml，置 250 ml 烧杯中，用量筒取稀硫酸 10 ml 加入烧杯，煮沸后，用吸量管取 ml 高锰酸钾滴定液（ mol/L）加入烧杯中，再煮沸 10 分钟，记录结果。 不挥发物 用量筒取本品 100 ml，置 105℃干燥至恒重的蒸发皿（用万分之一天平精密称定重量）中，在水浴上蒸干，并在 105 ℃干燥至恒重，记录遗留残渣重量。 重金属 供试管的制备 用量筒取本品 40 ml，置纳氏比色管中，用吸量管取 2 ml 醋酸盐缓冲液（ pH 为 ）与 2 ml硫代乙酰胺试液，加入管中，摇匀，放置 2 分钟。 阳性对照管的制备 用移液管取标准铅溶液 ml，置纳氏比色管中，用量筒取水 38 ml 加入管中，用吸量管取2 ml 醋酸盐缓冲液（ pH 为 ）与 2 ml 硫代乙酰胺试液，加入管中，摇匀，放置 2 分钟。 检查 供试管与阳性对照管应同时制备，供试管与阳性对照管比较，记录结果。 4. 整理原始记录，发出检验报告书。 四、注意事项 检查氯化物、硫酸盐与钙盐等，观察其是否显浑浊时，可另取一相同的试管，盛同体积的纯化水作空白对照观察。 检查二氧化碳所用的氢氧化钙试液，临用前必须检查是否澄清，因试液贮存久后，能吸收空气中的二氧化碳而显浑浊。 必要时可过滤后再使用。 比色时应将两支比色管同置白色衬底（观察 白色混浊时用黑色衬底）上，于光线充足处自上而下观察。 五、思考题 纯化水酸碱度检查的原理是什么。 氯化物、硫酸盐与钙盐检查采用了什么方法。 为什么不使用阳性对照。 与对照法相比哪个限度要求更高。 易氧化物检查的原理是什么。 实训八 药物的特殊杂质检查 一、实训目标 通过本实训，要求掌握药物特殊杂质检查的检测方法。 二、相关理论知识 讲解各代表药物的特殊杂质检查的原理、方法，复习薄层色谱法，介绍高效液相色谱法操作。 多媒体演示测定操作并提供移动媒体文件以便 自学。 三、标准操作规程 1. 依据：《中国药典》 2020 版二部正文 28 580、 64 691 页。 如未作说明，所有试液配制、检验方法等的标准操作依据《中国药品检验标准操作规程》 2020 版。 10 2. 操作 阿司匹林中游离水杨酸的检查 盐酸溶液 (9→ 100)溶液配制 用吸量管取盐酸 9 ml，置 100 ml 容量瓶中，加水稀释到刻度，即得。 硫酸铁铵指示液的配制 称取硫酸铁铵 8 g，置烧杯中，加水 100 ml，用玻棒搅拌使溶解，即得。 稀 硫酸铁铵溶液配制 用移液管分别取盐酸溶液 (9→ 100)溶液 1 ml，硫酸铁铵指示液 2 ml，置 100 ml 容量瓶中，加水稀释到刻度，即得。 供试品溶液制备 称取本品 置小烧杯中，用量筒取乙醇 1 ml 加入烧杯中，用玻棒搅拌溶解后，加冷水适量稀释，转移入 50 ml 纳氏比色管中，补充冷水使成 50 ml，立即用移液管取新制的稀硫酸铁铵溶液 1 ml 加入比色管，摇匀。 对照溶液制备 在万分之一天平上称取水杨酸 ，置容量瓶中，加水溶解后，用量筒取冰醋酸 1 ml 加入容量瓶 中，摇匀，再加水使成 1000 ml，摇匀，用移液管量取 1 ml，置纳氏比色管中，用量筒取乙醇 1 ml、水 48 ml 加入比色管中，再用移液管量取上述新制的稀硫酸铁铵溶液 1 ml 加入比色管 ，摇匀。 检查 供试管如 30 秒钟内如显色，与对照液溶液比较， 记录结果。 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 供试品溶液制备 在万分之一天平上称取本品适量，加乙醇稀释使成每 1 ml 中含盐酸普鲁卡因 的溶液，作为供试品溶液。 对照溶液制备 在 万分之一天平上称取对氨基苯甲酸对照品适量，加乙醇制成每 1 ml 中含 30μ g 的溶液，作为对照品溶液。 对二甲氨基苯甲醛溶液制备 称取 2 g 二甲氨基苯甲醛，至烧杯中，用量筒量取乙醇 100 ml 加入烧杯中，用玻棒搅拌使溶解，再用量筒量取冰醋酸 5 ml 加入烧杯中，搅拌均匀，即得。 操作 照薄层色谱法（附录Ⅴ B）试验，吸取上述两种溶液各 10μ l ，分别点于含有羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｈ薄层板上，用苯－冰醋酸－丙酮－甲醇 (14:1:1:4)为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲 氨基苯甲醛溶液喷雾显色。 供试溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较， 记录结果。 黄体酮中有关物质的检查 11 照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）、 岛津 LC 10A 高效液相色谱仪标准操作规程 测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水 (65:35) 为流动相；检测波长为 254 nm。 理论板数按黄体酮峰计算应不低于 1000，黄体酮峰和内标物质峰的分离度应符合要求。 内标溶液的制备 在万分之一 天平上称取 己烯雌酚约 25mg，置 25 ml 量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 在万分之一天平上称取 本品适量，以甲醇为溶剂，配制成每 1 ml中含 1mg 的溶液 (1)与每 1 ml中含 的溶液 (2)。 测定法 取 5μ l 注入液相色谱仪，调整仪器灵敏度，使主成分峰高度达记录仪的满量程。 再分别取溶液 (1) 和 (2) 各 10μ l，进样。 记录色谱图至主成分峰保留时间的 倍。 记录溶液 (1) 显示的杂质峰数和峰面积，记录溶液 (2) 主峰面 积。 葡萄糖注射液中 5羟甲基糠醛的检查 用移液管精密量取本品适量（约相当于葡萄糖 ），置 100 ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照 752 紫外分光光度计标准操作规程 ，在 284 nm 的波长处测定， 记录 吸收度 结果。 3. 整理原始记录，发出检验报告书。 四、注意事项 苯、甲醇均为有毒的有机溶剂，应该注意通风，避免吸入。 葡萄糖注射液中葡萄糖的百分含量表示是 g/100ml，通过计算量取适量的体积。 五、思考题 比较特殊杂质与一般杂质的区别。 黄体酮有关物质用高 效液相色谱法测定，其中使用了什么检测器。 实训九 阿司匹林肠溶片的含量测定 一、实训目标 通过本实训，要求掌握阿司匹林肠溶片含量测定的原理和计算。 学会一般片剂含量测定的操作技术。 二、相关理论知识 讲解阿司匹林肠溶片的含量测定的原理、方法，强调含量测定的误差控制、精密度要求。 多媒体演示测定操作并提供移动媒体文件以便自学。 三、标准操作规程 1. 依据：《中国药典》 2020 版二部正文 283 页。 如未作说明，所有试液配制、检验方法等的标准操作依据《中国药品检验标准操作规程》 2020 版。 2. 操作 滴定样品 取阿司匹林肠溶片 10 片，在万分之一天平上精密称定重量，置研钵中研细，用量筒取中性乙醇 35 ml 分多次加入研钵中，分次研磨，并移入 50 ml 的量瓶中，充分振摇，再用量筒取水适量洗涤研钵数次，洗液并入 50 ml 的量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，用移液管量取续滤液 10 ml (约相当于乙酰水杨酸 )置锥形瓶中，用量筒取中性乙醇 20 ml 加入锥形瓶，12 滴加酚酞指示液 3 滴，用氢氧化钠 ( mol/L)迅速滴定至溶液显粉红色，再通过滴定管精密加氢 氧化钠液 ( mol/L) ml，置水浴上加热 15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸液 ( mol/L)滴定。 滴定空白样品 用移液管量取中性乙醇 10 ml 置锥形瓶中，用量筒取中性乙醇 20 ml 加入锥形瓶，滴加酚酞指示液 3 滴，用氢氧化钠 ( mol/L)迅速滴定至溶液显粉红色，再通过滴定管精密加氢氧化钠液 ( mol/L) ml，置水浴上加热 15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸液 ( mol/L)滴定。 计算阿司 匹林片标示量的百分含量 每 1 ml 氢氧化钠液 ( mol/L)相当于 mg C9H8O4。 根据消耗硫酸滴定液的体积（ 1ml 硫酸滴定液相当于 1 ml 氢氧化钠溶液，滴定样品和空白样消耗的硫酸滴定液的体积差即是氢氧化钠液的体积差），算出阿司匹林片为标示量的百分比。 药典规定本品含阿司匹林（ C9H8O4）应为标示量的 ~％。 %100(%   标示量总 平均每片总量样）空标示量百分含量 W WFTVV 3. 整理原始记录，发出检验报告书。 四、注意事项 滴定样品和滴定空白样品的操作应该平行一致，否则 会引入较大的误差。 本方法需要分两步滴定，并且用回滴定间接测定含量，注意含量计算时 消耗硫酸滴定液的体积和氢氧化钠液滴定度表述的关系 五、思考题 阿司匹林为什么要分两步滴定，为什么要回滴定。 比较百分含量与标示量百分含量的不同。 实训十 盐酸普鲁卡因注射液的含量测定 一、实训目标 通过本实训，要求掌握盐酸普鲁卡因注射液含量测定的原理和计算。 学会一般注射液含量测定的操作技术和含量计算方法。 二、相关理论知识 讲解盐酸普鲁卡因注射液的含量测定的原理、方法，复习永停滴定方法， 适当介绍电化学知识。 多媒体演示测定操作并提供移动媒体文件以便自学。 三、标准操作规程 1. 依据：《中国药典》 2020 版二部正文 580 页。 如未作说明，所有试液配制、检验方法等的标准操作依据《中国药品检验标准操作规程》 2020 版。 2. 操作 用移液管量取盐酸普鲁卡因注射液适量（约相当于盐酸普鲁卡因 ），加入烧杯中，用量筒取水 40 ml 与盐酸溶液（ 1→ 2） 15 ml 加入烧杯中，然后置电磁搅拌器上，加入磁搅拌子，开启磁搅拌器搅拌，再称取 2g 溴化钾，加入烧杯中，插入铂 铂电极后，在 15℃～ 20℃用亚硝酸钠滴定液（ ）迅速滴定。 滴定时将滴定管尖端插入液面下约 2/3 处，随滴随搅拌；至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量水冲洗滴定管尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再复位，即为滴定终点（每 ml NaNO2 滴定液相当于 mg 盐13 酸普鲁卡因）。 计算盐酸普鲁卡因的百分含量 %100%  标示量量取体积 每支容量标示量百分含量 L FTV 3. 整理原始记录，发出检验报告书。 四、注意事项 重氮化反应为分子反应，反应速度较 慢滴定过程中应充分搅拌。 近滴定终点时，盐酸普鲁卡因浓度极小，反应速度减慢，应缓缓滴定，并不断搅拌。 滴定前应根据盐酸普鲁卡因注射液取样量与亚硝酸钠滴定液的浓度，大致计算出应消耗亚硝酸钠滴定液的量（ ml），以便在滴定操作中掌握何时为终点，以提出滴定。