20xx新编病理技术专业知识

20xx新编病理技术专业知识内容摘要：

绿色 ① ② ③④⑤⑥ 染色方法 胶原纤维，网状纤维 软骨，粘液，淀粉样 神经胶质纤维，肌纤维 髓鞘，红细胞 结 缔 组 织 染 色 Mallory 三色 蓝 淡蓝 红 黄 Masson 三色 绿 红 黄 显示胶原纤维，网状纤维，弹性纤维三联染色 胶原纤维 网状纤维 弹性纤维 肌肉和红细胞 红 黑 绿 黄 胶原 纤维 染色 胶原纤维 细胞核和血细胞 肌肉 显示胶原纤维，细胞，肌肉的染色法 红 绿 黄 天狼星红苦味酸染色法 红 绿 黄 网状 纤维 染色 网状纤维 胶原纤维 背景 Gomori 银染色法 黑 红 黄 James 染色法 黑 红 淡黄 弹性 纤维 染色 弹力纤维 细胞核 粘液 背景 维多利亚蓝染色 蓝 红 Gomori 醛复红染色 深紫 紫 显示弹性，胶原纤维的双重组合染色 蓝绿色 胶原纤维 红色 淡黄色 横纹肌 组织 染色 横纹肌 胶原纤维，网状纤维 心肌（缺血缺氧） Mallory 磷钨酸苏木精染色法（ PTAH） 蓝 黄色或玫瑰红色 紫蓝色或棕黄色 早 期 心肌 病 变组 织 染色 缺氧心肌，红细胞 正常心肌 细胞核 其他 Nagar— Olsen 红 黄或黄棕色 蓝 Poley 缺氧心肌染色法 红 紫 绿 糖类 染色 糖原及其他 PAS 反应阳性物质 细胞核 过碘酸 Schiff(PAS) 红 蓝 粘液物质（ 粘 多糖）染色 中性粘液物 酸性粘液物 混合性粘液物 Mowry 阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ ABPAS） 红 蓝 紫红 Schiff 阿尔辛蓝地衣红 棕 蓝 黑色素 染色 黑色素及嗜银细胞颗粒 胶原纤维 背景 肌纤维 Masson— Fontana 浸银染色 黑 红 浅黄 Lillie 亚铁染色 暗绿色 浅绿 黄 含铁血黄素染色 含铁血黄素 其他 Perls blue(普鲁士南 ) 蓝 浅红 胆色素 胆色素 其他 不适用的固定液： Helly，Zenker等含铬固定液 三氯醋酸染色方法 绿 红 或 黄 纤维 蛋白 染色 纤维蛋白 陈旧性纤维蛋白 细胞核 红细胞 背景 MSB 染色法（马休黄猩红蓝法） 红 紫 蓝 黄 Gram甲紫染色法 蓝黑 红 淀粉样 物质 染色 淀粉样物质 细胞核 刚果红染色法 红 蓝 Jurgens 甲紫染色法 红或紫红色 蓝 真菌 染色 菌丝和孢子 背 景 细胞核 红细胞 Grocott 六胺银染色 黑褐 淡绿 红 高碘酸复红染色法 紫红 浅黄色 细菌 染色 幽门菌 抗酸杆菌 G+ G— 背景 Gram 碱性复红结晶紫染色法 蓝 红 Ziehl— Neelsen 抗酸杆菌染色法 红 灰蓝色 Warthin— starry 胃幽门螺杆菌染色法 棕黑或黑 淡黄色 染色方法 项 目 螺旋体 染色 螺旋体 细菌 细胞质 红细胞 Giemsa 染色法 蓝 到淡紫色 蓝 橘黄色 HBsAg 染色 HBsAg 颗粒 细胞核 红细胞 结缔组织 Shikata 地衣红染色 棕色 醛复红改良染色法 紫色 黄 红 维多利亚蓝染色法 蓝绿色 红 神 经 细胞 尼 氏 小体染色法 尼氏小体 核 背景 胶质细胞 焦油紫染色法 紫 无色 淡紫 Einarson 棓酸青蓝 黑蓝 — 紫色 蓝 浅灰色 甲苯胺蓝染色法 深蓝色 淡蓝 无色 神经纤维染色方法 神经纤维 背景 老年斑扣结 Holmes 神经纤维 黑 灰紫 Bielschowsky 神经 黑 紫 Von Braunmubl 神经纤维，扣结，老年 黑 浅灰色 黑 Eager退变神经纤维 黑色 浅棕色 神经 髓鞘 染色 方法 髓鞘 背景 核仁 尼氏小体 Weigert 髓鞘染色方 黑紫 淡灰 Weil 髓鞘染色方法 蓝黑 淡灰 Kultshitzky 髓鞘染 蓝黑 淡黄 Luol fast blue 蓝 紫 紫 髓鞘 脱髓鞘纤 背景 轴索间质 变色酸 2R亮绿髓鞘 深红 不着色 绿 色 Marchi 退变髓鞘染色方法 黑色（退变） 浅棕色 锇酸α — 萘胺 黑色（变性） 红色（正常） 红细胞（淡红） 结缔组织 （蓝色） 神经胶质细胞染色方法 原浆形及纤维 性星形细胞 神 经胶 质细胞少突胶质 背景 小胶质 细胞 Cajal 星形细胞（冷冻） 紫黑色 改良的 Cajal 染色 紫黑色 粉红 Weil 及 Davenport 小胶质细胞及少胶质细胞 黑色 黄棕 Naou menko 及 Feigin 小胶质细胞 灰 黑色 神经内分泌细胞染色 亲（嗜）细胞 颗粒 细胞核 背景 胞质 亲银反应 lillie — Masson 二胺银 黑 红 淡灰黄 GomoriBurtner 六胺银法 黑 浅红 嗜银反应 De Grandi 改良硝酸银反应 棕黑色 红 碱性重氮反应 橘红色至红色 蓝色 黄色 嗜铬细胞染色 嗜铬细胞 皮质细胞 红细胞 细胞核 Giemsa 改良 红色至紫红色 蓝 粉红 Wiesel 染色方法 黄绿色 蓝（其他） 红色 肥大 细胞 染色 肥大细胞 细胞核 红细胞 其 他 甲苯胺蓝改良 红紫色 蓝色 醛复红法 深紫色 橘黄 黄 DNA 染色 DNA 细胞质 Feulgen 法 紫红色 绿色 免疫细胞化学技术 标记物应具有以下的特点： ① 能与抗体形成比较牢固的共价键结合 ② 不影响抗体与抗原的结合 ③ 放大的效益高 ④ 发光火显色反应要在抗原与抗体结合的原位并且鲜明，有良好的对比。 理想的标记酶： ① 酶的活性高并且稳定 ② 终产物稳定，不扩散，有良好的定位 ③ 酶与抗体和结合不影响 Ag— Ab 的特异性反应 ④ 在组织与体液 中不存在内源性的酶 底物 效果好又应用最多的是辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶 异硫氰酸荧光素： 为明亮的黄绿色荧光 四甲基异硫氰酸罗丹明： 为橙红色荧光 免疫组织化学主要染色方法的原理 （一）直接法 （又称一步法） 特异性高，敏感性低 原理：用已知的特异性抗体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的抗原反应。 特点：将荧光素或酶标记在第一抗体上 （二）间接法 （又称夹心法） 原理： 第一步：以未标记的特异性抗体（第一抗体）与组织或细胞中的抗原反应， 洗去未与抗原结合的第一抗体后 ， 第二步：再以荧光素或酶标记 的第二抗体与第一抗体结合，如何进行显色或荧光检查。 特点：将荧光素或酶标记在第二抗体上 优点： ① 不用标记第一抗体 ② 第一抗体的工作稀释度高 ③ 敏感性增强 ④ 应用范围更广 ⑤ 特异性低于直接法 （三）未标记抗体法 1 酶桥法 酶桥法使用的三种抗体中的 第 1，第 3 两种抗体为同种动物所产生。 在染色的关键是第 2 抗体（桥抗体）必须以较高的浓度过量使用 优点：提高了反应的敏感性，缺点：背景染色较重。 2 PAP 法 将游离酶和抗酶抗体在使用前先制成稳定的酶 — 抗 酶抗体复合物，在稀释后使用。 PAP 法的关键在于 ① PAP 复合物中的抗酶抗体必须与第一抗体为同种动物所产生。 ② 第 2 抗体（桥抗体）必须过量 （四）亲和素 — 生物素方法 1 亲和素 — 生物素 — 过氧化物酶复合物技术（ ABC） 通过 ABC 复合物中亲和素桥梁的作用，将 ABC 复合物与生物素化的抗体结合在一起 ，达到检测抗原的目的。 与 PAP 法比较， ABC 法最大的优点是敏感性高，是 PAP 法的 2040 倍 其次是背景清晰。 SP 法与 ABC 法比较，特异性更高 2 酶标亲和素 — 生物素技术（ BA LAB） 制备生物素化抗体和酶标亲和素，利用生物素 — 亲和素的亲和作用，将酶标亲和素连接到抗原抗体复合物上，以显示被检测的抗原。 3 桥联亲和素 — 生物素技术（ BAB， BRAB） 是用生物素分别标记抗体和酶，然后以亲和素为桥，将两者连接在一起 对照 常用的对照方法包括： 阳性对照，阴性对照，阻断实验， 空白对照， 替代对照， 自身对照，吸收实验 阳性细胞的染色特征： 阳性细胞染色分布有 3 种类型：胞质，细胞核，细胞膜表面 阳性细胞可分为灶 性和弥漫性 染色强度不一 可定位于单个细胞，且与阴性细胞相互交杂分布。 切片边缘，刀痕或皱褶区域，坏死或挤压的细胞区，胶原结缔组织等表现为相同的染色强度，不能判断为阳性 免疫荧光细胞化学染色方法 荧光抗体法： 用荧光抗体示踪 或检查相应抗原的方法 荧光抗原法： 用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法 对照：抗原对照，抗血清对照，灭活补体对照。 染色结果判读 对照试验： ① 吸收实验：应用尚无文献报道的抗血清 /自己制备的抗血清进行 IHC 染色 时，需用相应的饱和抗原吸收血清后，在孵育标本。 判断 结果的可信性 （结果应为阴性） ② 交叉实验 ③ 替代实验 ④ 置换实验 ⑤ 阳性对照 动物实验技术 实验动物的抓取 一 小鼠 用左手拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，其余三指和手掌心夹住背部皮肤和尾部 小鼠的灌胃针长 45cm,直径 34cm,常用灌胃量 皮内注射量：最多不得超过 . 皮下注射部位：背部 肌内注射：股部 腹腔注射： 静脉注射：多用尾静脉，用温水浸泡尾部或乙醇擦拭，使血管扩张， 4号细针 一次注射量为 ，尽可能从尾端开始向尾根部移动注射， 脑内注射： 注射针垂直刺入 23mm, 二 大鼠 大鼠 捉持方法与小鼠相似。 大鼠容易被激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套。 另一种方法：张开左手虎口，迅速将拇指，食指插入大鼠腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身体中端，并使其保持仰卧位，之后调整左手拇指位置，紧抵在下颌骨上。 大 鼠的灌胃针长 68cm,直径 . 插入深度为 46cm,常用灌胃量 14ml 皮内注射量：最多不得超过 . 皮下注射部位：背部 ，左侧下 腹部 肌内注射：股部 腹腔注射： 12ml/100g 静脉注射：多用尾静脉，用温水浸泡尾部或乙醇擦拭，使血管扩张， 4号细针 一次注射量为 ，尽可能从尾端开始向尾根部移动注射， 脑内注射： 注射针垂直刺入 23mm, 三 家兔 一 只手抓住兔颈背部皮肤，将兔轻轻提起，另一只手托住臀部，。