第十章吸光光度法absorptionphotometry—基于物质对光

第十章吸光光度法absorptionphotometry—基于物质对光内容摘要：

660 nm （二） 化学因素 ； —有色物离解、 缔合 ....... 18 第三节 吸光光度法及仪器 一、目视法 c4 c3 c2 c1 c1 c2 c3 c4 ：简单、可测微量，复合光，误差大。 观察方向 观察方向 ： 19 二、 光电比色法 通过滤光片得一窄范围的光 (几十 nm) 光电比色计结构示意图 ： （ 滤光片获取单色光 ） A C ：准确度较高（消除人眼的主观因素） 选择性较好（滤光片、参比液可消除干扰） 三、分光光度法 ：同上。 不同点： 光栅或棱镜获取单色光 四、基本构造 由光源、单色器（分光系统）、吸收池（比色皿）、检测系统、信号显示系统五大部分组成。 单色光纯度高（可精选某一波长，准） 测定多组分（利用 A的加和性） 应用范围广（无色、有色） ： 紫外 可见分光光度计组件 光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示系统 氢灯，氘灯， 185 ~ 375 nm； 钨灯， 400 ~ 2500 nm. 基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定 作用：将复合光色散成单色光 棱镜 光栅 玻璃， 360 ~ 3200 nm, 石英， 200 ~ 4000 nm 平面透射光栅， 反射光栅 玻璃，光学玻璃，石英 作用：将光信号转换为电信号，并放大 光电管，光电倍增管，光电二极管，光导摄像管（多道分析器） 表头、记录仪、屏幕、数字显示 第四节 吸光光度法分析条件的选择 （科研初步 ,与时俱进） 一、显色反应及其条件的选择 （一）显色反应和显色剂 [定义 ]： 将被测组分转变为 “ 有色物质 ” 的反应 M无色 + R = MR有色 (主要是络合、氧化还原反应 ） 1. 对显色反应或显色剂的要求： ⅰ 选择性好（最好是特效反应） ⅱ 灵敏度高（ max ﹥ 104L•mol1•cm1） ⅲ 对比度要大， (max)最大吸收 波长相差 60nm以上 ⅳ MR稳定，组成恒定 ⅴ 显色反应的条件要易于控制 广义，有吸收 2. 显色剂 R（ 自学 P289－ P290） （ 二） 显色反应条件的选择 1 1 1 1 2 3 4 5 6 6 ： [H+]一切反应的基础 M的存在状态， [H+] ↘ ， M会水解； [R]及颜色， [H+] ↗ ，影响 [R]（ 大多有机弱酸） 影响颜色（大多酸碱指示剂） MRn组成 （ CR） 为使显色反应完全，一般 R过量（同离子效应），但 R也不能大过头，否则，物极必反。 a. R本身有色，空白 ↗ b. 改变络合比，例： Mo(Ⅴ )与 SCN:      浅红橙红浅红 ,6S C N,5S C N2 ,3 )S C N(Mo)S C N(Mo)S C N(MoCR由实验确定 3. 时间 t A t t 由实验确定。 显色后，至少应保持到测定工作做完。 T 大多显色反应在室温下进行，但也有需要加热才能完成的。 V=f(T) T↗ , V↗。 但 T 太 ↗ ，有色物分解。 合适的 T 由实验确定。 5. 溶剂和表面活性剂 溶剂影响有色络合物的离解度 溶剂影响有色络合物的显色速度 溶剂影响有色络合物的颜色 表面活性剂 a. 胶束增溶 b. 形成三元络合物 －－ 实验确定，有点运气 6. 干扰及消除 干扰物本身有色或与显色剂显色， +干扰 干扰物与 M、 N反应，使显色不完全，－干扰 b. 消除 控制酸度 ，使 M显色，干扰不显色 氧化还原，改变干扰离子价态 掩蔽 校正系数 参比液：可消除显色剂和某些离子的干扰 选择 测 ，可避开干扰的吸收 增加显色剂用量，将干扰灌饱 分离 二、仪器测量误差 光度分析法的误差除了来源于朗伯－比耳定律的偏离以外，仪器测量不准确也是导致误差的原因。 任何光度计都有一定的测量误差。 这些误差可能来源于光源不稳定、实验条件的偶然变动、读数不准确等。 P286页图 10－ 5： 偏离 A=bC 对同一台仪器，读数的波动对 T是确定值， dT=； 但对 A却不确定 )3(Cd。