第六章球菌

第六章球菌内容摘要：

第一节 概述 肠杆菌科包括 24个与医学有关的菌属 , G+Cmol％ 3959。 1. 四类引起人类腹泻和肠道感染的细菌：埃 希菌属 、 志贺菌属 、 沙门菌属 、 耶尔森菌 属。 2. 八种与医院感染有关的条件致病菌：枸橼 酸杆菌属 、 克雷伯菌属 、 肠杆菌属 、 多源 菌属 、 沙雷菌属 、 变形杆菌属 、 普罗威登 菌属和摩根菌属； 3. 其中鼠疫耶尔森菌 、 伤寒沙门菌对 人致病性较强。 此外 ， 许多细菌既 是正常菌群 ， 也是条件致病菌。 在 机体抵抗力下降 ， 寄居部位的改变 或菌群失调时能引起机会感染。 二 、 临床意义 占临床分离菌总数的 50％ 和Ｇ 总数的 80％ , 将近 50％ 的败血症 70％ 以上的泌尿 道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科 细菌引起的。 1. 人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外 感染 ， 大肠埃希菌 、 肺炎克雷伯菌 、 产 酸克雷伯菌 、 奇异变形杆菌 、 产气肠杆 菌 、 阴沟肠杆菌 、 粘质沙雷菌等均可引 起泌尿道 、 呼吸道 、 伤口和中枢神经系 统的感染。 且往往为医院感染。 鼠疫耶尔森菌可 引起烈性传染病鼠疫。 2. 人类肠道感染 埃希菌属 、 志贺菌属 、 沙门菌属和耶 尔森菌属。 主要引起各种急 、 慢性肠 道感染 、 食物中毒 、 旅行者腹泻及肠 热症等。 三、共同特性 (1) 1. 形态结构 Ｇ 杆状或球杆状、无芽孢、多数有鞭 毛，能运动。 致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分 ⑴ Ｏ抗原是细胞壁成分脂多糖。 以核 心多糖为中心的三层结构 ， 内侧是脂类 A, 为内毒素的毒性成分。 外侧是由重复 的特异多糖 ， 决定Ｏ抗原的特异性。 ⑵ H抗原是不耐热的蛋白质抗原 ， 氨基酸 序列和空间构型决定 H抗原的特异性。 ⑶ 表面抗原是包绕在Ｏ抗原外侧的多糖抗 原 ， 由多糖结构决定抗原特异性。 大肠 埃希菌称 K抗原 、 伤寒沙门菌称 Vi抗原 和志贺菌称 B抗原等。 O抗原和 H抗原是肠杆菌科血清学分 群和分型的依据。 表面抗原存在时可阻 断。 抗原与相应抗体之间的反应 ， 加热 处理能消除表面抗原的阻断作用。 共同特性 (2) 3. 变异性 ⑴ SR变异是初次分离的细菌 ， 菌体 抗原上都有特异性多糖链 ， 菌落为光滑 型。 在人工培养基中反复传代时 ， 细胞 壁上特异性多糖链消失而核心多糖仍保 留 ， 菌落变为粗糙型。 ⑵ HO变异是有鞭毛的细菌 , 失去鞭 毛 ， 动力也随之消失 ， 称 HO变异 , 有 时见于新分离的菌株中。 4. 培养和生化特性 营养要求不高 ， 在普通培养基上生长 良好；兼性厌氧 ， 主要生化特性包括发 酵葡萄糖 (产酸或产酸产气 )， 触酶阳性 , 氧化酶阴性 ， 可将硝酸盐还原至亚硝酸 盐。 5. 抵抗力 抵抗力不强 ， 加热 60℃ 30min即被杀 死 ， 不耐干燥 ， 对一般化学消毒剂均敏 感。 对低温有耐受力。 能耐胆盐 ， 能抵 抗染料的抑菌作用。 四 、 微生物检验 1. 标本采集 ① 肠外标本 :采自不同的感染部位如血液 、 体液 、 呼吸道 、 伤口 、 尿液及其他各 种标本。 ② 肠道标本 :疾病早期留取新鲜粪便 ， 挑 取粘液脓血部分进行培养。 应在 2h内进 行 ， 以利志贺菌等检出。 如不能及时培 养应冷藏待检。 2. 直接镜检 Ｇ 杆菌 ， 形态及染色性无鉴别 意义。 3． 分离培养鉴定 (1) 肠外标本 :采自无菌部位的标本用血 琼脂 ， 血培养时可用肉汤增菌。 其他 标本中含有杂菌 ， 需用选择性培养基 以增加分离率 ， 常用伊红美蓝 (EMB) 琼脂 ， 因为 EMB能促进肠杆菌科细 菌生长并抑制其他Ｇ 菌。 (2) 肠道标本：常用的选择鉴别培 养基 (如 EMB)和针对沙门菌和志贺 菌的强选择鉴别培养基 ， (如 SS琼脂 )。 如疑耶尔森菌感染可用耶尔森菌选 择琼脂 (CIN)。 肠杆菌科细菌 鉴定 1) 常规生化鉴定 :为实验室最常用的方 法。 各菌属 (种 )主要生化特性有助 于鉴定细菌。 2) 鉴定试剂盒 :选用标准化和商品化的 微生物鉴定试剂盒 ， 特点是质量可 靠稳定鉴定能力强 ， 并与编码技术 结合 ， 可用仪器读取结果 ， 实现自 动化 ， 并提高了工作效率。 3) 血清学鉴定：用特异性抗血清进 行血清学分型鉴定后才能作出最 终报告。 4) 分子生物学鉴定：可鉴定至科 、 属 、 种 、 血清型和肠毒素基因 等。 甚 至可区分致病菌株和非 致病菌株。 耐药性问题日趋严重。 粘质沙雷菌对青霉 素 G等抗生素天然耐药 ， 而大多数是形成的 获得性耐药。 有染色体或质粒介导的超广谱 β内酰胺酶或 AmpC酶而产生的耐药性。 已 出现了耐多种抗菌药物的多重耐药菌株 ， 因 此必须根据抗菌药物敏感试验选用抗生素 ， 并作好耐药性监控工作。 同时细菌的耐药谱 还可成为医院感染流行病学调查中的标志。 (五 ) 抗菌药物敏感试验 一、分 类 埃希菌属包括 5个种： ① 大肠埃希菌是肠道中 G杆菌的主要 成员， 常引起肠内外的感染，是腹 泻和泌尿道感染的主要病原菌。 ② 蟑螂埃希菌偶而检出并有潜在的致 病性。 第二节 埃希菌属 ③ 弗格森埃希菌； ④ 赫尔曼埃希菌； ⑤ 伤口埃希菌。 最近还发现称为不脱胺／凝聚埃 希菌 G+Cmol％为 48～ 52。 二 、 临床意义 ⑴ 1. 致病因素 ⑴ 侵袭力 K抗原能抗吞噬 ， 并有抵抗抗体和 补体的作用。 菌毛能帮助细菌粘附于 粘膜表面称定殖因子 ， 能使细菌定殖 产生毒素而引起相应的症状 ， 直接侵 犯粘膜引起炎症。 ⑵ 内毒素 具有发热 、 休克 、 DIC等病理作用。 ⑶ 肠毒素 产生不耐热和耐热肠毒素两种肠 毒素：均可使肠道细胞中 cAMP 的水平升高 ， 引起肠液大量分泌 而导致腹泻。 二 、 临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的 G杆菌中最常见的 菌种 ， 可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型 0 6为多见 ， 本菌还可引起菌血症 、 胆囊炎 、 肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿 、 肠穿孔继发腹膜炎 、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。 有时与类杆菌 、 粪肠球菌混合感染。 产 生的脓液粘稠 ， 有粪臭味。 该菌对一般 抗生素敏感 ， 易产生超广谱 β内酰胺酶 ，而导致对第三代头孢菌素耐药。 ⑵ 肠道内感染 其中有些菌株能引起轻微腹泻至霍乱 样严重腹泻，并能引起致死性并发症如 溶血性尿毒综合征。 (1) 肠毒素型大肠埃希菌 (ETEC)： 引起儿童腹泻和旅行者腹泻 ， 类似轻型 霍乱样腹泻。 该菌产生耐热肠毒素 (ST) 和不耐热肠毒素 (LT)。 (2) 肠致病性大肠埃希菌 (EPEC)： 引起婴幼儿肠道感染 , 血清型是 05 0111等 , 是婴儿腹泻的重要病原菌。 (3) 肠侵袭型大肠埃希菌 (EIEC)： 类似于志贺菌 ， 侵犯肠粘膜细胞 ， 引起 菌痢样症状 ， 出现脓血粘液便。 引起肠道感染的大肠埃希菌 (4) 肠出血型大肠埃希菌 (EHEC)， 多为食 源性感染 ， 通过粪 口途径传播。 致病 因子是菌毛和 Vero毒素 ， 血清型是 0157 ： H7， 可引起出血性结肠炎 ， 有 2％ ～ 7％ 发展成溶血性尿毒综合征 ， 出现溶 血性贫血 ， 血小板减少性紫癜和急性肾 衰竭 ， 死亡率为 3％ ～ 10％。 (5) 肠凝聚型大肠埃希菌 (EaggEC)：代表 一群不产生 LT或 ST，不能用 O： H血清 分型，可粘附于 Hep2细胞的菌株。 与 世界各地慢性腹泻有关。 三 、 微生物特性 1. 形态结构 G直短杆状 ， 大小为 ～ ， 多数有鞭毛能运动 ， 引起肠外感染的菌株有荚膜 (微 荚膜 )和周身菌毛。 2. 抗原成分 ⑴ O抗原是多糖磷脂复合物 (LPS)， 耐 热加热 100℃ 不能灭活 ， 已有 171种 是血清学分型的基础。 ⑵ H抗原是不耐热的蛋白质 ， 已知有 56 种 ， 均为单相菌株。 ⑶ K抗原是多糖荚膜抗原 ， 对热稳定 ， 能阻止 O凝集。 血清型别按 O： K： H 的顺序以数字表示。 3. 培养特性 兼性厌氧，营养要求不高，在普通 琼脂上生长良好，形成圆形光滑、湿 润的菌落，在选择培养基上可发酵乳 糖形成有色菌落。 IMViC 试验结果为 ++。 四 、 微生物检验 (1) 肠道外感染标本 1. 标本采集 血液标本以无菌操作技术采集静脉血 5ml注入血液培养瓶。 痰标本取清晨口 腔清洁后从深部咳出的痰液。 脓 、 分泌 物等标本用无菌棉拭子直接采取。 2. 直接涂片染色检查 除血液标本外 ， 脓 、 痰 、 分泌物等标本 均作涂片染色检查。 尿液和各种体液离 心后取沉淀物作涂片 , 可见 G短杆菌。 3. 分离培养鉴定 (1) 血液标本接种肉汤增菌培养 ， 待生 长后移种血平板。 体液标本取离心 沉淀物接种于血平板。 尿液标本应 同时作菌落计数。 脓 、 痰和分泌物 标本可直接接种于血平板。 35℃ 孵 育 18～ 24h后观察菌落形态。 (2) 鉴别培养基上挑选有色菌落 ， 用生 化反应 、 血清学试验鉴定到属和种。 典型的生化反应特征： TSIA(双糖铁 )产酸／产酸。