pcr(polymerasechainreaction)内容摘要:
ACTTGCATCATCGTATCGTTACATGTAGTAGTCTATCTGCTAACTGTCACTAGAGCTGCTACGTAGTACTGTAGCTAAACTAGCTA PCR Process 1 cycle 2 cycle 3 cycle Process 变性 退火 延伸 加样器的使用 模板的制备 DNA DNA:血细胞、绒毛、尿样、毛发、精斑、口腔上皮细胞 :脱蜡、蛋白酶 K消化 RNA 新鲜 组织或细胞 所用器皿和试剂必需经高温灭菌或 DEPC处理 (一 ) 组织处理: 取新鲜大鼠肝用预冷的生理盐水洗去表面血液,每克肝脏加 2ml的裂解液,匀浆器中匀浆 (一) 引物: 5’ –TTTTCGTAGTAACGGAAGCC3 ’ 5’ –TAAGGATTCTCAGATGCAAATG3 ’ 引物的设计可以参照: 两分钟 StepByStep学会引物设计软件 Primer 核酸基因技术讨论版 /生物信息学讨论版 / PCR技术讨论版 PCR反应 (二) 无菌 eppendorf管中加 双 /三蒸水 9 l 10 缓冲液 2 l dNTP混合物 3 L 引物 2 l 模板 DNA 2 l 25mmol/L Mg2+ l 液体石蜡 10 l 混匀离心 5sec, 94℃ 水浴, 2min + Taq DNA聚合酶 l 程序设置: 94℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 30s 35。pcr(polymerasechainreaction)
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