改性聚苯乙烯微球对蛋白质的吸附与解吸特性

改性聚苯乙烯微球对蛋白质的吸附与解吸特性内容摘要：

心 — 再分 散的方法用 1,4二氧六环 ,水 ,乙醇彻底洗涤 ,真空 干燥 ,可 得到 PS— PEG 微球 . 微球对牛血清蛋白的吸附实验 分别用邻苯二甲酸氢钾 ,醋酸一醋酸钠和磷酸二 氢钾 — 磷酸氢二钠配制四个不同 pH(4,5,6 和 7)的缓 冲体系 ,取 — PEG 微球 ,加入 10mL不同 BSA质量浓度的缓冲溶液 ,密封 ,在摇床上振荡一定 时间后 ,离心 ,取上清液 ,在 280nm 处测吸光度 ,根据 标准曲线计算溶液中残留的 BSA量 ,进而计算得到 微球的吸附量 . ? 29? — PEG 微球对牛血清蛋白的解吸实验 取约 不同吸附剂 ,各 加入 03mg/mL的 BSA溶液 10mL,其中 NaC1 质量浓度为 , 吸附平衡后抽滤除去母液 ,再分别加入 10mL蒸馏水 振荡 2h,取上清液测 BSA质量浓度 ,计算解吸率 . 2 结果与讨论 微球的制备与形态 应用于生物医药领域的聚合物微球分离材料要 求表面洁净 ,尺寸均一 ,具有一定的刚性 ,这就对制备 方法提出了较高的要求 .常规的微球制备方法有多 种 ,如悬浮聚合 ,乳液聚合 ,分散聚合等 ,但能满足生 物医用的主要是沉淀聚合 ,该方法制备过程不加稳定 剂等杂质 ,微球尺寸在亚微米 级范围内可控 ,且分布 很窄 .本文使用了沉淀聚合基础上发展起来的一种 新方法 ,即蒸馏一沉淀法 ,由图 l可知 ,微球呈极规整 的球形 ,尺寸在 左右 ,几乎呈单分散状态 . 图 1PS 扫描电镜图 2_2PEG 修饰 PS 微球 众所周知 ,Ps 微球具有很强的疏水性 ,可用作水 溶液中疏水化合物的吸附 ,但由于其强烈的疏水作 用 ,导致解吸困难 ,要用强疏水的有机溶剂 ,造成污 染 .因此用两亲性聚合物 PEG 对其进行修饰 ,能有效 地减弱其疏水性 ,达到对蛋白分子的可逆吸附目 的 .为考察不同 PEG 负载量对蛋白吸附的影响 ,合成 了氯含量不同的氯甲基化微球 ,并用 PEG 全部取代 微球上的氯 ,以 PEG 的平均相对分子质量 2020 为 计 ,可换算得到微球上 PEG 负载量 ,结果见表 1. 表 1 微球功能基含量 微球氯入 : PS— ? 30? 对牛血清蛋白的吸附性能 图 2 是 对牛血清蛋白吸附动力学曲线 . 从图中可见 ,在 2h 左右能达到平衡吸附的 90%以 上 ,在 3h 内基本能达到吸附平衡 .因此吸附实验一 般做到 5h. f,mln 图 2BSA在 微球上的吸附时间曲线 — PEG1 牛血清蛋白的等电点为 ,为研究吸附作用力 , 测定了不同 pH条件下的平衡吸附量 ,结果见图 ,无论对哪种微球 ,pH在 5 附近吸附量 最大 ,此时 ,BSA接近等电点 ,呈电中性 ,疏水性最 大 ,因此微球对 BSA的吸附作用力以疏水作用力为 主 .同时看到 ,在相同的 pH下 ,随 PEG 负载量的增 加 ,微球疏水性减弱 ,吸附量减少 ,这进一步说明了疏 水作用为主。