移植免疫学实验管理程序文件

移植免疫学实验管理程序文件内容摘要：

一秒钟，然后将吸嘴提离液面。 用药用吸纸抹去吸嘴外面可能附着的液滴。 小心勿触及吸嘴口。 放液 将吸嘴贴到容器内壁并保持 100— 400 倾斜。 平稳地把按钮压到第一停点。 等一秒钟后把按钮压到第二停点以排出剩余液体。 压住按钮，同时提起加样器，使吸嘴贴容器壁擦过。 松开按钮。 按吸嘴弹射器除去吸嘴。 （只有改用不同液体时才需更换吸嘴。 ） 注意事项 流式实验室应备有 2 套连续可调式加样器 (— 10μl、 5— 40μl、40— 200μl 200— 1000μl)，加样器在使用时应 注意以下几点： 在取液前所取液体应在室温（ 15— 25℃）平衡；若吸液温度与室温不一致时将吸头预洗多次再用。 注意移液温度不得超过 21 70℃。 吸头浸入液体深度要合适，吸液姿势尽量保持不变。 在吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到加样器头上；打出液体后不应松开按钮，将吸头压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。 在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。 连续可调式加样器在取样加样过程中应注意吸嘴不能触及其它物品，以免被污染；吸嘴盒（架子）、废 液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染为原则。 改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸嘴；发现吸嘴内有残液时要换新吸嘴。 新吸嘴使用前要预洗。 吸嘴内有液体时不可将加样器平放、倒转，以防液体进入加样器套筒内。 使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后，最好拆下套筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈；切勿用油脂等润滑活塞及密封圈。 连续可调式加样器在使用完毕后应置于加样器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。 维护保养应及时记录，组长对记录应及时检查、核实。 4． 每 三个月对加样器进行清洗一次，先用 60%异丙醇擦洗，后用蒸馏水反复洗涤，去除异丙醇，晾干，在活塞处加一定量的 22 润滑剂。 每年一次送质量技术监督局校准。 5． 当杯或加样器有可污染时，在 121℃ 压力下消毒 20 分钟。 各区的加样器归各区专用（有标识），清洁和消毒时分别处理。 23 九 、离心机操作使用程序 1. 目的： 保证分离、低温分离技术的可行性。 2. 适用范围： 各种普通台式离心机、高速台式离心机和低温冷冻离心机。 3. 使用方法： 离心机 应放置在水平坚固的平台或地板上，并要求机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 外接电源系统的电压要匹配，并连接可靠地线。 打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先平衡好的样品放置于转头样品架上（离心套管须原配，并与样品同时平衡），关闭机盖。 根据离心机功能，设置各项要求：速度、时间、温度、加速度及减速度等；带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 待离心机完全停止转动时 打开机盖，取出离心样品，如果操作过程中出现液体不慎泄漏，立即用软布蘸 10%次氯酸钠或%%施康液反复擦洗机腔内壁和转头，然后用 70%酒精擦拭。 若冷冻离心机须待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 24 离心过程中若发现异常现象，应关闭电源，报请有关技术人员检修。 定期查看电机碳刷，当其长度小于 6mm 时，须及时更换。 附： 相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速，在以前实验资料中一般以每分钟多少转来表示。 现在国际资料中，已改用相对离心力（ RCF）来表示。 由于离心力不仅为转速函数 , 亦为离心半经的函数，即转速相同时，离心半经越长，产生的离心力越大。 因此仅以转速表达离心力是不够科学的，近年来主张用相对离心力（ RCF）来表示比较合理。 两者互换公式如下： N=RCF 105/ R RCF= R N N 表示转速，单位为转 /分（ r/min）。 R 表示离心半经，即离心管底端至轴心的距离，单位为厘米（ cm）。 RCF 表示相对离心力，单位用重力加速度 g(g =)。 25 十、旋涡振荡器操作使用程序 1. 目的： 保证待处理样品的完全混匀。 2. 适用范围： 各种类型的旋涡振荡器。 3. 标准操作： 旋涡振荡器应置于坚固的水平台上。 检查电源电压是否匹配后，接通电源。 将样品管垂直或略为倾斜地放置在振荡盘上，开机振荡数秒或数分钟直至样品完全混匀后，关机。 切忌将样品管平躺或倒转振荡，以免管内液体渗出。 保持振荡器清洁、干燥。 实验完成后，需关闭旋涡振荡器。 26 十一、恒温水 浴箱操作使用程序 1. 目的： 保证水浴箱工作温度恒定。 2. 适用范围： RTE— Ⅲ型电热恒温水浴箱 3. 标准操作： 水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。 在水浴箱内注入清洁温水至总高度 1/2～ 1/3 处。 把电源开关拨至 “ 开 ” 处，控温仪面板即有数字显示表示电源接通，同时将水泵开关拨至 “ 开 ” 处。 把温度控制器的温度调节旋钮按下，此时数字显示的温度为设定温度，同时旋转此按钮，观察显示数值、选择所需工作温度。 松开温度调节旋钮此 时数字显示的温度为水槽内测定温度，加热指示灯亮，仪器已进入自动恒温控制状态。 当水槽内测定温度达到设定温度时，加热中断、指示灯熄灭，再通电 90 分钟后，温度可保持稳定。 在每次水浴箱使用前，放入标准温度计同时监测实际水温，以校正温度。 水浴箱工作温度波动范围应控制在：设定温度 +/– 1℃以内。 水浴箱正面外下壁贴有温度质量控制表，记录每天温度；如温度超出正常范围，该温度应划上红圈，并把修正操作记录 27 下来。 水浴箱内外应保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦拭。 仪器不用时，需套好塑料薄膜防尘罩，以免温度控制器受潮影响使用。 4． 每半年矫正一次。 28 十 二 、实验室的清洁程序 一、 目的：防止实验室内污染。 二、 范围：整个实验室。 三、 职责：实验室人员必须明确造成污染的来源及处理办法。 四、 工作程序： 1. 实验前对各区空间，实验台面等及走廊进行紫外线消毒 30 分钟并做好记录。 2. 实验室人员在操作过程必须穿白大褂，戴手套、口罩、帽子。 3. EP 管必须经高温消毒灭菌。 4. 未消毒的物品放置标本接收室，灭菌过的物品先放置试剂室，在灭菌有效期内使用。 5. 已灭菌的离心管在取用时须用专用镊子夹取，不允许用手去拿。 6. 试验过程如发生液体外泻，应立即用浸有 10％次氯酸钠溶液的卫生纸覆盖污染处半小时，再用浸有 75％酒精的软布擦拭干净，然后用移动紫外车紫外照射并记录。 7. 实验用过的 Tip 头、离心管的处理见废弃物处理程序。 8. 每次工作结束后，用 75％的酒精清洁移液枪一次。 使用过的试管架，工作台面用 10％次氯酸钠擦拭 1 遍后，再用 75％的酒精清洁1 遍，然后用紫外线照射 60min 以上。 9. 各种用途的镊子应标明标识专项专用，用后应浸泡在 75%酒精中。 Tip 头等一次性材料污染，应立即更换应。 试验结束后对使用过的一次性手套口罩帽子应丢入专用的 29 垃圾袋中。 ，各区的地面需进行清洁，各区的清洁拖把、抹布等应严格分开使用并分开存放，清洁顺序按试剂室到扩增室进行。 ，应做好各区的清洁工作，然后做好实验后清洁消毒记录，并将各区的废弃物及垃圾袋密封后带出试验区，打开该区紫外灯进行消毒 60min 以上。 13. 10％次氯酸钠每 1 月配制一次， 75%酒精每周领取一次。 30 十 三 、应急处理程序。