生物安全操作手册

生物安全操作手册内容摘要：

决不要用嘴吸移液管；在吸取传染性材料的时候使用一次性移液管。 传染性的或有毒的材料不应该从移液管中强力地排出。 传染性的或有毒的液体要防止因用空气吹打液体而导致泡沫的产生。 决不要为了混合而用移液管反复地吹吸含有传染性或者有毒物质的液体。 移液管的排出除应该与液体或琼脂水平尽可能地近，内容物应该沿着管壁或瓶壁排出，不要从高处排出。 用于吸取传染性或者有毒材料移液管尾部应该用棉花塞住。 （ 5）、 其它设备 （水浴箱、冷藏箱） 水浴箱通常用于钝化、孵育或测试传染性物质，应该消毒。 对于冷水浴箱，推荐75% 丙烯乙二醇。 叠氮钠不应该被当作抑制细菌繁殖使用。 它可能有引起严重的爆炸的危险。 检查低温冰箱、液氮和干冰及冷藏库 ,定期清洁除去任何坏的安瓿、试管及含有传染性的材料并消毒。 在这清洁期间使用橡皮手套并保持通风。 对储存在冰箱或冷冻库中的所有有传染性的或有毒的材料进行适当分类。 安全措施应该与危害等级相同。 个人防护装备 个人防护装备是减少操作人员暴露于气溶胶、飞溅物以及意外接触等危险的一个屏障。 实验室应具备足够 的符合不同级别的个人防护装备，供实验室工作人员选择和使用。 （ 1）、 实验服、隔离衣 17 进入实验区域必须穿实验服，反复使用的实验服必须是耐用的。 在二级生物安全实验室里从事病原微生物学实验和 HBV、 HCV、 HIV 等血清学检测工作时，应该在实验服外面穿上隔离衣。 每隔适当的时间应更换实验服以确保清洁，当实验服或隔离衣已被危险材料污染时应立即更换，放在指定的位置，告知保洁人员先消毒再清洗。 实验服、隔离衣不得穿离实验区域。 （ 2）、 手套 应符合舒服、合适、耐磨、耐撕的要求。 在进行实验室一般性工作，以及在处理感染 性物质、血液和体液标本时，应戴手套，并保证： 所戴手套无漏损； 戴好手套后应完全遮盖手及腕部； 在撕破、损坏或受污染时应立即更换手套； 在完成工作后应摘除手套并彻底洗手。 用过的一次性手套应丢弃在生物垃圾袋内； 手套不得戴离实验室区域。 （ 3）、 工作鞋 实验区域必须穿不露脚趾的鞋，鞋应舒适，鞋底防滑。 推荐使用皮制的不渗液体的鞋类。 从事临床基因扩增检验项目和在二级生物安全实验室工作时应穿一次性鞋套，在从事可能出现漏出的工作时也应穿一次性鞋套。 用过的鞋套应丢弃 在生物垃圾袋内，鞋套不得穿离实验室区域。 （ 4）、 护目镜 在 HIV 初筛实验室，应备有护目镜。 在从事可能出现飞溅的工作时应戴护目镜，可避免实验物品飞溅对眼睛造成的伤害。 护目镜不得戴离实验室区域。 （ 5）、 口罩、帽子 在无菌室从事无菌实验时应戴口罩、帽子。 在从事可能出现飞溅的工作时应 戴口罩、帽子。 用过的口罩、帽子应丢弃在生物垃圾袋内，口罩、帽子不得戴离实验室区域。 （二） 、 人员管理 实验室应建立工作人员上岗考核制度，所有与实验活动相关的人员都应经过培训并取得上岗资质。 培训对象应包括实验室管理人员、实验室技术人员、样本运输人员、废弃物处置人员、仪器 设备维修人员及保洁工等。 实验室相关人员应每年接受生物安全培训。 培 18 训组织机构应采取有效方法对培训的效果进行评估。 应建立人员培训档案。 人为的失误和不规范的操作会极大地影响所采取的安全措施对实验室人员的防护效果。 熟悉如何识别与控制实验室危害的有安全意识的工作人员， 是预防实验室感染、差错和事故的关键。 因此，不断地进行安全措施方面的在职培训是非常必要的。 有效的安全规程首先始于实验室管理者，管理者应确保安全的实验室操作及程序融合到工作人员的基本培训中。 安全措施方面的培训是新工作人员岗前培训的有机组成部分，向工作人 员介绍生物安全操作规范和实验室操作规程，包括安全手册或实验的操作手册，确保工作人员阅读并理解这些规程。 各实验室生物安全责任人在对属下工作人员进行规范性实验室操作技术培训时起着关键作用，生物安全委员会可以帮助进行人员培训并研制教具和教案。 实验室人员 培训规划 进行岗位安全教育对于维持实验室工作人员和后勤保障人员的安全意识是很重要的。 下列各项是保证生物安全培训规划行之有效的必备要素： 需求评估 这一过程包括确定相关的任务、重要性等级（以发生频率、危害程度以及复杂性来表示）以及完成这些任务的必要步骤等细 节。 确立培训目的 期望受培训者在进行培训之后，能在工作中加以应用。 培训的目的是要了解开展实验的条件以及所需的熟练水平。 规定培训的内容和方法 培训内容是受培训者为了实现实验操作目标所必须掌握的知识或技术。 通常由那些对工作和相关要求最为了解的人员来确定生物安全培训规划的内容。 其他的内容可能集中在练习如何解决工作中发生的问题，以及学习纠正人们在使用某一技术过程中所犯的错误。 人员培训的内容应包括实验室生物安全的基本知识、基本技能、消防和应急处置预案、化学、生物危险和传染预防、应急救护等课程。 还应包 括： A. 吸入危险（气溶胶产物），如何使用接种环、划线接种琼脂平板、移液、 制作涂片、打开培养物、采血 /血清标本、离心等。 19 B. 食入危险，如处理标本、涂片以及培养物。 C. 在使用注射器和针头时刺伤皮肤的危险。 D. 处理血液以及其它有潜在病理学危险的材料 E. 感染性材料的清除污染和处理。 根据科室实际情况采用如下培训方法： （ 1）、以小组为单位专题学习和讨论。 （ 2）、以科室为单位 专题讲座和整体培训。 （ 3）、以科室网络形式专题自学和考查。 考虑不同培训对象的差异 有效的培训一定要考虑培训 对象的特点。 不同人员在资质、读写、文化、口语以及培训前所掌握的技术水平等方面都可能不一致。 培训规划能否提高受培训者的操作技能和个人安全水平，这可能取决于培训所采用的方法。 对某些人应采用更直观的或“手把手”的方式更好；而其他人则以学习文字材料更有效果。 工作人员如有特别要求时也应提出对课程调整。 针对不同的学习要求 教学内容（培训课程、录像、文字材料等）不应该同所教授的技术或主题相冲突、相抵制或没有关联。 例如，如果培训的目的是要提高解决问题的能力，那么在教育中就应该强调思维／推理而并非死记硬背，应该要求培养 创造性的行为和／或相应的反馈（肯定／正确／可靠）能力。 此外，提供与实际工作条件相似的实践机会有助于将技能应用到实际工作中。 培训评估 培训评估有助于判断培训是否达到了预定效果。 培训评估通常包括下列四种方式： 检查培训对象对所进行培训的反应 ； 考核培训对象对所培训内容的记忆和 /或操作执行情况 ； 评估培训对象在工作中的行为变化 ； 按培训机构的目的或目标来考查是否已有明确的效果。 对培训效果最完整的评估应包括全部上述四个方面。 仅考虑培训对象对所进行培训的反应是一种最不有效的评估方法，因为这种反应与培 训对象对培训内容的实际掌 20 握程度之间可能没有关系，它也不应作为评估培训效果的唯一指标。 培训调整 由于衡量结果的标准多种多样，因此对培训效果的评估很难表明培训规划究竟是完全成功还是彻底失败。 通常的结果为，培训对象与其他人相比，对课程内容的某些部分会有更好的理解、掌握和应用。 培训所造成的知识或能力上的不同或差异，可能提示是否需要更长的培训时间、采用其他的培训方法或聘请更有能力的教师。 编写人 审核人 批准人 生效日期 20200601 21 苏州大学附属第一 医院 第 1 页，共 2 页 第一版 日期： 生物安全监督程序 五 、 生物安全 监督程序 监督程序由生物安全管理小组 负责管理。 程序的目的是对实验室工作人员 进行定期的健康评估，特别应注意与实验室工作人员健康有关的生物因子处理的因素或条件。 对特殊的实验室工作人员医学监督程序可以做一些预防测定，包括免疫、定期身体检查和采集血清样本。 实验室应定期对实验人员开展与其从事实 验活动相关的健康体检，建立人员健康档案。 实验室工作人员应在身体状况良好的情况下进入实验区工作，若出现疾病、过劳状态或其他意 外状况，则不应进入实验区或立即退出实验区。 监督程序的目的是： 推荐下列的合适的医学预防（措施）做实验室工作人员的定期评价以确定与工作相关的医学环境的影响是否普遍存在，如果是的话，采用明确的监测以降低这些影响。 对一个特定的实验室工作人员医学监督的范围取决于： 研究课题本身存在的潜在危险因素、直接或潜在暴露生物因子的实验室工作人员与现在或以前健康状况有关的某些附加因素，医学监督程序可提供实验室工作人员可能导致的潜在暴露。 暴露于结核杆菌实验室工作人员的筛选 面对职业暴露于结核杆菌的实验室工作人员在本院生 物安全办公室登记。 职业安全和健康管理从下列范围鉴定潜在暴露：可能处理肺结核菌的实验室、可能有感染结核风险的新进实验室工作人员在聘用时必须用肺结核皮肤试验（ PPD）测试 TB 暴露因素以建立其基础值。 所有可能有暴露风险的实验室工作人员每年必须做 PPD 试验以建立基础值。 暴露于活性 TB 环境中的实验室工作人员必须报告在暴露初期的 TB 试验基础值和暴露 3 个月后的暴露事件和 PPD 测试结果。 免疫 在某些情况下，做特殊研究的人员要用合适的疫苗免疫。 22 疫苗 建议 B 型肝炎疫苗 推荐给使用人类血液 ，体液或组织工作的人员 其他疫苗 由实验室工作人员健康医生决定。 在一些事件中定期收集上述血清样本测定疫苗引起的抗体。 医学限制 生殖生物学危害 生殖生物学危害包括但并不仅仅限于下列： 巨细胞病毒（ CMV） B 型肝炎病毒（ HBV） E 型肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒（ HIV） 人类细小病毒 B19 风疹（德国麻疹） 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 水痘带状疱疹病毒（鸡疹） 只要需要，生物安全 管理小组 与各专业科室一起去评价实验室工作程序以确保最小的暴露。 其它限制 经过与实验室工作人 员及医生讨论后，制定对实验室工作人员的工作限制，并确定实验室工作人员的基础数据。 如果实验室工作人员处于预防ＨＩＶ感染、 免疫抑制和抑制免疫系统的药物治疗时，必须将有关情况告知医生和生物安全 管理小组。 实验室工作人员血清贮存 许多传染病并非明显疾病条件引起。 可预先收集新进实验室工作人员、传染 病实验室实验室工作人员的血清作为本底血清；如果有与相关生物因子病人接触的实验室工作人员，应增加收集这些实验室工作人员的血清样品。 编写人 审核人 批准人 生效日期 20200601 23 苏州大学附属第 一医院 第 1 页，共 6 页 第一版 日期： 意外事故应急 处理 六、意外事故应急 处理 （一）、 暴露事件的紧急处理 暴露事件 是实验室工作人员在执行本职工作时与潜在传染性物质的接触（眼、嘴、其它黏膜、经吸入方式进入呼吸道、破损皮肤、或非肠道）。 遭到已知的或潜在暴露事件的实验室工作人员必须按照以下相应暴露事件的处理措施，尽快脱去手套并处理被污染部位。 皮肤感染 ： 用抗菌皂液和温水冲洗感染部位 15 分钟。 必要时进行医学处理。 眼、面部飞溅 ： 用冲眼器冲洗或温水冲洗感染部位 15 分钟。 气溶胶暴露 ： 屏住呼吸迅速离开房间，小心脱去个人防护用品。 当脱去个人防护用品时必须 确保个人防护用品暴露面朝里，用皂液和水仔细洗手，在实验室入口处贴上飞溅标 记，实验室排风至少 1 小时。 实验室清洁后才准许人员再次进入。 大范围的污染，必须通知生物安全办公室，安排相关人员清洁实验室以便再进入。 报告事件 实验室工作人员必须向实验室生物安全责任人报告事件。 实验室生物安全责任人必须完成一份部门伤害报告表和一份健康服务报告表，并附上事件发生时的情况说明和暴露途径。 医疗援助 当实验室工 作人员在事发现场得到了第一时间的援助后应立即电话告知生物安全办公室。 对于某一些暴露，如非人类灵长目动物叮咬、抓伤或蚊虫叮咬、或暴露在传染因子中，工作人员应及时接受评估。 当生物安全办公室无法联系或需更复杂的治疗时，工作人员应向医院急诊室求助。 生物安全办公室将提供后暴露评估，该评估对经历“暴露事件”的实验室工作人员是免费的。 后暴露的观察期取决于暴露的种类，与传染因子的不同潜伏期有关。 实验室工作人员可从生物安全办公室获得他们医疗记录的复印件，生物安全办公 24 室必须保留实验室工作人员的医疗记录。 实验室事件 的调查 生物安全委员会及生物安全管理小组将进行实验室事件所需要的调查，调查的目的在于防止类似事件的发生，同时获得关于其详情和经历此事件的人数的资料。 另外生物安全管理小组在与各专业科室协商后，可以采取进一步的措施，追踪那些已被暴露实验室工作人员的健康状况。 应该强调，向实验室生物安全责任人报告事件是经历事件的实验室工作人员的责任。 随后，实验室生物安全责任人应向生物安全管理小组报告事件。 当伤害包括锐器和人体物质（血液、组织、细胞等）时，生物安全管理小组必须。