d-对羟基苯甘氨酸的生产工艺

d-对羟基苯甘氨酸的生产工艺内容摘要：

，可以分为有机碳源和无机碳源两大类，凡必须利用有机碳源的微生物就是异养微生物，凡能利用无机碳源的微生物就是自养微生物。 糖类是最广泛利用的碳源。 （ 3）氮源：氮源主要是供给合成菌体结构的原料，很少作为能源利用。 与碳源相似，微生物作为一个整体来说，能利用的碳 源种类十分广泛。 某些微生物 宁夏职业技术学院毕业论文 D对羟基苯甘氨酸的生产工艺 （如固氮菌）能利用空气中分子态的氮或利用无机氮化物如铵盐、硝酸盐合成有机氮化物。 多数致病菌则必须供给蛋白胨、氨基酸等有机氮化物才能生长。 （ 4）无机盐类：无机盐主要可为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素。 微生物需要的无机盐类很多，主要有 P、 S、 K、 Na、 Ca、 Mg、 Fe 等，其主要功能为构成菌体成分；调节渗透压；作为某些酶的成分，并能激活酶的活性等。 （ 5）生长因子：有些微生物虽然供给它适合的碳源氮源和无机盐类，仍不能生长，还要供给一定量的所谓“生长因子”。 其种类很多，主要 是 B 族维生素的化合物等。 生长因子可以从酵母浸出液、血液或血清中获得。 微生物发酵控制 微生物发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。 微生物发酵所需的培养基必须包括微生物所需的五大营养物质，且有固定比例及严格的数量与质量要求，发酵为我车间的第一道工序，培养基的正确配制则是发酵的前提，其需要玉米浆为氮源，液态葡萄糖为碳源，因为我们发酵所需的最终产品为一种诱导酶，培养基中必须加入诱导剂。 此外还有硫酸铵、硫酸镁等。 配好培养基后需要经过高温高压蒸汽灭菌来消除培养基 及罐体内的杂菌，我们采取二级发酵来培养 菌体。 制备好种子后在无菌条件下将种子接种至一级种子罐中，在适宜的温度及 PH 条件下培养种子，实现种子的一级扩大培养。 在此过程中在规定时间段里取样测量其菌体生长量，残糖量， PH，涂片看其生长情况及无菌情况。 在菌体量达到移种条件且无菌情况正常即可移种至发酵罐进行二级扩大培养，并使其诱导产酶。 在培养过程中同样需要控制适宜的温度及 PH，也需在规定时间段里取样测量其菌体生长量，残糖量， PH，涂片看其生长情况及无菌情况，并测量酶活。 在菌体生长量达到要求后，并无菌正常的情况下便可放罐至提取工段的转化进行菌体收集，投放底物， 利用诱导酶将底物转化为我们所需要的 D— 对羟基苯甘氨酸。 主要用的两种酶，海因酶和氨甲酰水解酶。 工艺控制要点 1 在培养基配方中，生物素的用量直接影响 D酸的合成。 生物素的含量低，菌体得不到很好的生长。 反之，由于生物素的含量过高，会造成菌体的大量繁殖，不产或少的。 宁夏职业技术学院毕业论文 D对羟基苯甘氨酸的生产工艺 2 种龄和接种量必须严格控制。 一级种子控制在 11~12h，二级种子控制在 7~10h。 接种量控制在 1%左右。 如果种龄过长或接种量过大，都会造成菌体生长过长，提前衰老自溶，产酸量少。 反之，菌体生长缓慢，发酵周期加长，还容易染菌。 3 菌种在不同的生长时期需 要不同的 培 养 温度，在工艺控制上应该满足它的需要。 一般采取三级控制， 0~12h 控制在 32℃ ~34℃ ,12~14h 控制在 32~33℃ ，在24h 以后控制在 34~36℃ . 4 通风量影响培养液中的溶氧含量。 在菌体生长期间，通风量过大，会造成菌体代谢活动过剧，提前衰老。 在合成阶段，通风量过小，不能进行三羧酸循环，导致乳酸积累以至酸败。 应此，制药根据实际需要合理通风，在长菌期间低风量，产酸期间高风量，发酵成熟期又转为低风量，才能获得 产物的大量积累。 5D酸产菌的最适 pH 一般是中性或偏碱性，而且在不同的时期需要的 pH 不同。 为了保证发酵的正常进行，必须根据发酵液 pH 变化的规律，通过流加铵盐的方法及时调整发酵液的 pH并补加 氮源，这是保证了可以获得高产 D酸的重要措施。 通过的控制方法是当 pH 低于 时即流加铵盐，每次加量不得多于 %。 6 要获得高产的 D酸，必须要有足够的，生长旺盛的菌体。 在实际生产中，往往采取中间补料的方法，即在发酵过程中适时，适量地补充一些生物素，营养盐和糖液。 7D酸生产菌对杂菌和噬菌体的抵抗能力差。 所以，在发酵是要特别注意防止杂菌和噬菌体侵害。 一旦遭遇，轻者造成产酸低，难提取 ，重则倒灌，损失惨重 第二章 提取工段工艺控制 提取工段包括转化 （预处理） 、膜过滤、脱色、结晶、离心干燥。 每个环节对 D— 对羟基苯甘氨酸的生产都至关重要，需要各个工段都严格控制工艺控制点，齐心协力做好车间的生产任务。 转化 （预处理） 转化是提取工段的第一个环节，其将发酵罐放的发酵液，在絮凝罐里絮凝，收集菌体，并排掉上清液。 在转换罐里投放底物并加水溶解， 主要底物是：苯海因，壳聚糖。 然后将收集到得菌体加到转化罐里，在 合适的转化周期，在 适宜的温度、 通气量， PH 下将底物转化。