lc-15岛津高效液相色谱仪确认方案

lc-15岛津高效液相色谱仪确认方案内容摘要：

︱ SS︱和 SR 的测定 用两通代替色谱柱，连接至液相色谱仪。 以 过滤脱气的超纯 水为流动相，分别设定流速为 ， ， ，平衡 15min 后进行校验。 待流速稳定后，用秒表计时，在流动相流出口处用容量瓶准确地收集流动相，流速为，其他流速流动相收集时间 5min，各测量 3次，称重后用温度计测量超纯水温度并记录。 按下式计算︱ SS︱和 SR，并记录测试数据和结果。 F=(W2W1)/(ρ .t ) ︱ Ss︱ =（ FmFs） / Fs 100 % SR=( FmaxFmin)/Fm 100 % 式中 ： F— 流速实测值 ， mL/min； Fm— 同一组测量值的平均值 ， mL/min； Fs— 流量设定值 ， mL/min； W2— 容量瓶和流动相的质量 ， g； W1 — 容量瓶的质量 ， g； ρ — 试验测试温度下流动相的密度， g/cm3； t— 收集流动相的时间， min； Fmax— 同一组测量中流量最大值 ， mL/min； Fmin— 同一组测量中流量最小值 ， mL/min。 柱温箱温度稳定性测试 判断标准 柱温箱稳定性指标 测试项目 判断标准指标 温度设定值 (℃ ) 30 35 40 温度设定值误差 |△ T|＜ 2℃ 成都力思特制药股份有限公司 第 7 页 共 20 页 药品生产质量管理文件 控温稳定性误差 TC ≤ 1℃ 柱温箱温度设定值误差△ T和控温稳定性 TC 的检定 将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择要求的温度进行检定。 通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔十分钟记录一次读数，共计 7次，求出平均值。 平均值与设定置之差为△ T， 7 次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性 TC。 检测器性能测试 波长准确度 判断标准 标准溶液波长（ nm） 扫描波长误差 257 不超过 177。 2nm 350 不超过 177。 2nm 测试方法 取紫外标准溶液，利用吸收池进行扫描测试，紫外标准溶液吸收峰值为 257nm和 350nm。 打开紫外检测器稳定 1h，然后取空白溶液充满吸收池，进行空白扫描，参数设计为：空白扫描，波长范围选择 240— 365nm， ，扫 描速度 100nm/min。 扫描后换成标准溶液进行标准溶液扫描，扫描后显示图谱和峰值波长，将波长与标准波长对照。 基线噪声与漂移 判断标准 测试项目 判断标准指标 基线噪声 ≤ 5 104AU 基线漂移 ≤ 5 103AU/h 测定方法 将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到 254nm，流动相为 100%甲醇，流速为 ，开机，待基线稳定后，记录基线 3040 分钟，计算基线漂移和噪声。 基线漂移应≤ 5 103(AU/h)，基线噪声应≤ 5 104(AU)。 线性测试 判断标准 成都力思特制药股份有限公司 第 8 页 共 20 页 药品生产质量管理文件 线性测试：相关系数 R2≥ 测试方法 流速： ；流动相：甲醇：水 =85： 15；检测波长： 254nm；柱温： 30℃；进样量： 20uL。 测试：待系统平衡后， 分别取联苯标样配成 102mg/mL、 102mg/mL 、 102mg/mL 、 102mg/mL、 102mg/mL、 102mg/mL，以 20μ L 定量环进样，记录色谱图。 以标样浓度 C 为 横坐标，以联苯峰面积 A 为纵坐标作线性回归，得其线性方程及相关系数 R2。 进样器精密度与残留测试 判断标准 测试项目 判断标准 进样器精密度 保留时间： RSD≤ % 峰面积： RSD≤ % 残留 残留面积 ≤ % 残留高度≤ % 测试 流速： ；流动相：甲醇；检测波长： 254nm；柱温： 30℃；进样量：20uL。 测试：待系统平衡后，分别取联苯标样配成 102mg/mL、 102mg/mL 、 102mg/mL 、 102mg/mL、 102mg/mL、 102mg/mL，以 20μ L 定量环进样， 基线稳定后， 先进 3 针甲醇空白溶液，然后 连续进 6 针联苯 /甲醇标准溶液，最后再进 1针 甲醇空白溶液 ，记录保留时间和峰面积。 分别按下式计算保留时间和峰面积的相对标准偏差 RSD。 RSD= {[Σ（ XiX 平均 ） 2/（ 61） ]1/2 } / X 平均 100 % 式中： Xi— 第 i次测量的保留时间或峰面积； X 平均 — 6次测量结果的算术平均值。 残留按下式计算： 436( A A ) 100%A残 留 面 积成都力思特制药股份有限公司 第 9 页 共 20 页 药品生产质量管理文件 式中： A4— 第 四针空白的峰面积； A3— 第三针空白的峰面积； A6— 第六针联苯标液峰面积。 式中： H4— 第四针空白的峰高度； H3— 第三针空白的峰高度； H6— 第六针咖啡因标液峰高度。 运行确认的结果及结论 根据检查项目和可接受标准，对每个项目的检查结果进行确认，并给出运行确认的结论，结果记录于附件 D中。 若验证方案需要变更，须按方案制。