体外诊断试剂生产及质量控制技术指导原则-生物芯片部分

体外诊断试剂生产及质量控制技术指导原则-生物芯片部分内容摘要：

他： 包括试剂瓶标签、铝箔袋、衬垫、可密封塑料袋、说明书、干燥剂和包装外盒等，应参照国家食品药品监督管理局颁布的《 体外诊断试剂说明书编写指导原则 》和《 医疗器械说明书、标签和包装标识管理规 定》 建立相应质量控制标准，如数量、规格等。 （二）蛋白检测芯片 1． 主要生物原料 与生产的产品质量最密切相关的生物原料包括各种活性抗原、重组抗原、单克隆杭体、多克隆抗体以及多肽类生物原科。 这类原料可用于点膜、标记相关酶、纳米金、光学基团及中和反应用抗原或抗体等。 使用前应按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验，以保证其达到规定的质量标准。 主要生物原料若为企业自己生产，其工艺必须相对稳定；若购买，其供应商要求相对固定，不能随意变更供应商，如果主要原料（包括工艺）或其供应商有变更， 应依据国家相关法规的要求 变更 申请。 主要生物原料的常规检验项目一般包括： ⑴ 外观 肉眼观察，大部分生物原料为澄清透明的液体，不含异物、浑浊或摇不散的沉淀或颗粒；或者为白色粉末，不含有其他颜色的杂质；特殊生物原料应具备相应外观标准。 ⑵ 纯度和分子量 主要经 SDSPAGE 电泳后，利用电泳扫描仪进行分析，也可用其他适宜的方法，如高效液相法等。 根据所检测生物原料的分子量选择适宜丙烯酸胺凝胶浓度进行电泳。 一般情况下，每个电泳道加样量为5μg，同时用已知分子量的蛋白标准品作参照，采用合适的电泳电流，电压和电泳时间；电泳后的凝胶可用考马斯亮蓝染 色或银染法染色。 染色后的凝胶用电泳扫描仪分析原料的纯度和分子量，纯度应达到相应的质量标准，分子量大小应在正确的条带位置。 ⑶ 蛋白浓度 蛋白浓度可通过 Lowry法、 280nm 光吸收法、双缩脲方法等进行检测。 ⑷ 效价 效价的测定一般根据蛋白含量测定结果，通过倍比稀释法进行。 效价应达到规定的要求。 ⑸ 功能性实验 功能性实验是指生物原料用于试剂盒实际生产中的情况，一般考查使用该原料的试剂的灵敏度、特异性和稳定性等，并比较其与上批次原料的相关性。 2． 主要生物辅料 生物辅料指的是在生产过程中作为蛋白保护剂用途的一类生物原料，主要包括小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白和酪蛋白等。 这些生物原料均应按照《中国生物制品主要原辅材料质控标准（ 2020年版）》所规定的质量标准要求进行检验，达到相应的质量标准后方可 应用于生产。 建议作以下检验： ⑴ 牛血清或羊血清 外观：为浅黄色 澄清 稍粘稠的液体，无溶血或异物 无菌试验：将血清直接放 37度培养 7天，放在明亮处观察，不得出现混浊。 总蛋白含量：用双缩脲方法来测定，标准为不小于 32mg/ml。 球蛋白含量：取待测血清 1ml，加入 %的 NaCl 溶液。 加入饱和硫酸铵 1ml，置 4℃ ， 2 小时， 8000rpm 离心 10 分钟，弃上清。 沉淀溶于 %NaCl 溶液，至 1ml，用 Lowry 方法测定蛋白含量，不能大于 2mg/ml。 ⑵ 牛血清白蛋白： 外观：应为浅黄色冻干粉末无吸潮，无结块，无肉眼可见的其它杂质颗粒。 溶解性：将牛血清白蛋白配成 10%溶液，溶解时间在。