聚合酶链式反应技术

聚合酶链式反应技术内容摘要：

端 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 活学活用 1 ．在遗传病及刑侦破案中常需要对样品 DNA 进行分析， P C R技术能快速扩增 DNA 片段，在几个小时内复制出上百万份的 DNA 拷贝，有效地解决了因为样品中 DNA 含量太低而难以对样品进行分析研究的难题。 据图回答相关问题： 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 ( 1) 在相应的横线上写出引物 Ⅱ ，并在复性这一步骤中将引物 Ⅱ 置于合适的位置。 ( 2) 在相应的横线上写出循环一次后生成的 DNA 分子。 ( 3) 若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P 标记，请分析循环一次后生成的 DNA 分子的特点是______________________________ ；循环 n 次后生成的DNA 分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 答案 ( 1 ) 5 ′ — G — A — OH ( 3 ) 每个 DNA 分子各有一条链含 32 P 标记 1 / 2 n 解析 ( 1 ) D N A 聚合酶不能从头开始合成 DNA ，只能从3 ′ 端延伸 DNA 链，所以引物就提供了 3 ′ 端，子链延伸方向 5 ′ → 3 ′ ，引物 Ⅰ 与 b 链部分碱基互补，引物 Ⅱ则与 a 链部分碱基互补，且连接到 a 链的 3 ′ 端，故引物 Ⅱ 的结构为 5 ′ — G — A — OH ，复性结果为： 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 HO — A — G — 5 ′ 5 ′ — G — G …… T — C — 3 ′ ( 2) 经过一次循环后，产生的两个 DNA 分子分别含有引物 Ⅰ 和引物 Ⅱ。 ( 3) 由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P 标记，所以新合成的子链均含有放射性，一次循环后的两个 D N A 各有一条链含32P ，若复制 n 次，产生子链共 2n 2 ，其中只有亲本的两条母链不含32P ，则其所占比例为 2 / ( 2n 2) ＝1/ 2n。 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 探究点二 DNA 片段的 P C R 扩增和产物检测 DNA 片段的 P C R 扩增可以利用 P C R 热循环仪完成，而产物的检测则利用琼脂糖凝胶电泳进行。 阅读教材，完善下列内容： 1 ． DNA 片段的 P C R 扩增 准备 移液 混合 离心 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 _____ ：将离心管放入 P C R 仪中，设置程序进行反应 ( 1) 加入离心管中的物质应包括： __________ 、 ___ ___ ___ ___ 酶、4 种 __________________ 、 2 种 ______ 、缓冲液。 ( 2) 离心管中要加入少量石蜡油，目的是 ___________________。 ( 3) 热循环仪的反应程序应设定为： 防止反应溶液的挥发 反应 模板 DNA TaqDNA聚合 三磷酸脱氧核苷酸 引物 94 94 40 72 第 15课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 ( 4)。